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下列是公司產(chǎn)品ELISA試劑盒的詳細(xì)說(shuō)明書(shū):
中文名稱(chēng):RPL23A人核糖體蛋白L23A博湖elisa試劑盒
英文簡(jiǎn)稱(chēng):Human Ribosomal Protein L23A(RPL23A)ELISA Kit
產(chǎn)品貨號(hào):PH101717
規(guī)格:96T/48T
適用范圍:僅供科研使用
保存及有效期:2-8℃保存,6個(gè)月,-20℃一年
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國(guó)家明確要求要采用批批檢定的形式對(duì)ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān),我司嚴(yán)格按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn),已獲得國(guó)家承認(rèn)的“三證”,每一個(gè)產(chǎn)品都有對(duì)應(yīng)的生產(chǎn)批號(hào),只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必?fù)?dān)心會(huì)有過(guò)期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準(zhǔn)備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來(lái),在室溫下放置20-30
min后,再進(jìn)行測(cè)定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度,以滿足后面的測(cè)定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素:包括類(lèi)風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類(lèi)風(fēng)濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測(cè)抗原時(shí),可用2-巰基乙醇加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解。
檢測(cè)程序:
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向?yàn)V紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37 ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測(cè) 吸光值。
使用方法:
測(cè)定法的靈敏度來(lái)自作為報(bào)告的酶。眾所周知,酶是一種有機(jī)催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱(chēng)為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 24μg/ml 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
紫杉醇-d5Paclitaxel-d5質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 人膽堿乙?;?CHAc)ELISA檢測(cè)試劑盒Humancholineacetylase,CHAcELISAKit
96T/48T Humanadenylylcyclase1,AC-1ELISA試劑盒人腺苷酸環(huán)化酶1(AC-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
7-差向紫杉酚7-epi-Taxol質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 大鼠細(xì)胞色素P450(CYP450)試劑盒 Rat cytochrome
P450,CYP450 ELISA Kit HumanAi-ThrombinⅢ,AT-ⅢELISAKit人抗凝血酶Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
紫杉醇CPaclitaxel C質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱(chēng)RatNN-T4ELISAKit大鼠新生甲狀腺素(NN-T4)規(guī)格:96T/48T 人靶向核糖核酸酶()ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2'-O-(tert-Butyldimethylsilyl)-6α-羥基-7-差向-紫衫醇2'-O-(tert-Butyldimethylsilyl)-6α-hydroxy-7-epi-paclitaxel質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 果蠅DNA損傷彗星熒光檢測(cè)試劑盒20 兔子抗中性粒細(xì)胞顆??贵w(ANGA)試劑盒 Rabbit ai-neuophil
granules aibody,ANGA ELISA Kit
脫氧膽酸鈉;去氧膽酸鈉質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR deoxycholate 英文名稱(chēng)RatCCL24ELISAKit大鼠CCL24規(guī)格:96T/48T 大鼠氧化型低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒 ,英文名: OxLDL ELISA Kit
牛磺熊去氧膽酸質(zhì)量規(guī)格:≥97%Tauroursodeoxycholic
Acid Dihydrate 蠟質(zhì)芽孢桿菌(Bacilluscereus)鑒定16SrDNAPCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20 人內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑(vaspin)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanVisceraladipose-specificserineproteaseinhibitor,vaspinELISAKit
96T/48T
?;切苋パ跄懰徕c質(zhì)量規(guī)格:≥97%Tauroursodeoxycholic
Acid Salt ELISAKitFSA人胚胎性硫糖蛋白抗原規(guī)格:48T/96T 大鼠Toll樣受體9(TLR9)試劑盒 Rat Toll-like receptor 9,TLR-9 ELISA kit
新生霉素鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:>90%,進(jìn)分Novobiocin 小鼠W-10b蛋白(W10B)ELISA試劑盒 ,英文名: W10B ELISA Kit CLIAKitforsRANKL(Humansolublereceptoractivatorofnuclearfactor-kBligand)ELISAKit人可溶性核因子κB受體活化因子配基規(guī)格:48T/96T
米諾地爾(標(biāo)準(zhǔn)品)Minoxidil質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Ratperoxisomeproliferatorsactivatorreceptorsalpha,PPAR-αELISAKit大鼠過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 人蛋白酪酸激酶(PTK/CD115)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
米諾地爾(硫酸鹽)敏樂(lè)啶Minoxidil Sulfate質(zhì)量規(guī)格:>99.0% GMS10甲基化基因轉(zhuǎn)化感受態(tài)1毫升 小鼠CD33分子(CD33)試劑盒 Mouse cluster Of
differeiation,CD33 ELISA Kit
米諾地爾(硫酸鹽)敏樂(lè)啶(標(biāo)準(zhǔn)品)Minoxidil Sulfate質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 MouseSomalcellderivedfactor1a,SDF-1aELISA試劑盒小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 外顯肽(extein)ELISA試劑盒 ,英文名: extein ELISA Kit
MQAE(氯離子熒光探針)N-(Ethoxycarbonylmethyl)-6-methoxyquinolinium
bromide質(zhì)量規(guī)格:進(jìn)分 小鼠可溶性CD30(sCD30)ELISA試劑盒 ,英文名: sCD30 ELISA Kit Mousepituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide,PACAPELISA試劑盒小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
RPL23A人核糖體蛋白L23A博湖elisa試劑盒ELISA 試驗(yàn)時(shí),注意事項(xiàng)如下:
1. 正式試驗(yàn)時(shí),應(yīng)分別以陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高,說(shuō)明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽(yáng)性標(biāo)本的OD值。選擇OD值z(mì)ui大而蛋白量zui少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見(jiàn)酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要**價(jià)廉、**、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無(wú)色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。