檢測程序：
1.  加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。
3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6.  洗板：同前。
7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。
8.  每孔加入100ul 終止液混勻。
9.  30分鐘內(nèi)用酶標儀在 45 0 nm 處測 吸光值。

下列是公司產(chǎn)品ELISA試劑盒的詳細說明書：
中文名稱：SEPT2人胞裂蛋白2ELISA試劑盒說明書
英文簡稱：Human Septin 2(SEPT2)ELISA Kit
產(chǎn)品貨號：PH102620
規(guī)格：96T/48T
適用范圍：僅供科研使用
保存及有效期：2-8℃保存，6個月，-20℃一年

試劑和樣本的控制方法：
一、試劑
1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關(guān)，我司嚴格按照國家標準進行生產(chǎn)，已獲得國家承認的“三證”，每一個產(chǎn)品都有對應(yīng)的生產(chǎn)批號，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必擔(dān)心會有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。
2.試劑的準備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后，再進行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達到所需的溫度，以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風(fēng)濕因子、補體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；
類風(fēng)濕因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG；
②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；
③檢測抗原時，可用2-巰基乙醇加入到標本稀釋液中使RF降解。

使用方法：
測定法的靈敏度來自作為報告的酶。眾所周知，酶是一種有機催化劑，很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng)，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。   24μg/ml    5號標準品    150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
 12μg/ml    4號標準品    150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
 6μg/ml     3號標準品    150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
 3μg/ml     2號標準品    150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
 1.5μg/ml   1號標準品    150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。|
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
ELISA 試驗時，注意事項如下： 
     1. 正式試驗時，應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件，待檢樣品應(yīng)作一式二份，以保證實驗結(jié)果的準確性。有時本底較高，說明有非特異性反應(yīng)，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。 
     2. 在ELISA中，進行各項實驗條件的選擇是很重要的，其中包括: 
     （1） 固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。 
     （2） 包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度（0.1、1.0和10μg／ml等）進行包被后，在其它試驗條件相同時，觀察陽性標本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg／ml。 
     （3） 酶標記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定（見酶標記抗體部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。 
     （4） 酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要**價廉、**、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應(yīng)注意防護。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后，應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入 。

纖維素酶(酶活>45 U/mg)Cellulase質(zhì)量規(guī)格：酶活>45 U/mg，BC  RatPyruvateKinase,M2-PKELISAKit大鼠同酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  人傳染性單核細胞增多癥抗體(IM-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

DL-脯氨酸DL-Proline質(zhì)量規(guī)格：0.99  HISTONEH3蛋白共沉淀分析試劑盒5  豚鼠乙型肝炎病毒表面抗體(HBsAb)試劑盒 Guinea pig ai-hepatitis B virus surface aibody,HBsAb ELISA kit

DL-丙氨酸甲酯鹽酸鹽DL-Alanine methyl ester 質(zhì)量規(guī)格：0.98  MouseVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor1,VEGFR-1/Flt1ELISA試劑盒小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  糖化血紅蛋白A1c(A1c)ELISA試劑盒 ，英文名： A1c ELISA Kit

L-谷氨酸5乙酯H-Glu(OEt)-OH質(zhì)量規(guī)格：0.985  小鼠巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP3α)ELISA試劑盒 ，英文名： MIP3α ELISA Kit  MousesubstancePreceptor,SP-RELISA試劑盒小鼠P物質(zhì)受體(SP-R)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
帕羅西汀馬來酸鹽質(zhì)量規(guī)格：美國進口Paroxetine maleate  英文名稱RatCCL11ELISAKit大鼠CCL11規(guī)格：96T/48T  大鼠氧還原蛋白過氧化物酶2(PRDX2)ELISA試劑盒 ，英文名： PRDX2 ELISA Kit

4-羥基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸乙酯 1,1-二氧化物質(zhì)量規(guī)格：美國進口4-Hydroxy-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylic acid ethyl ester 1,1-Dioxide  蘭花Vacin&We培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑  人抗鈣蛋白酶抑素抗體(ACAST-DⅣ)ELISA檢測試劑盒HumanaoaibodiesagainsttheC-terminaldomainⅣ,ACAST-DⅣELISAKit 96T/48T

甲基4-羥基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸鹽 1,1-二氧化物質(zhì)量規(guī)格：美國進口Methyl 4-Hydroxy-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide  ELISAKitⅧ-Ag人凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原規(guī)格：48T/96T  大鼠toll樣受體3(TLR3)試劑盒 Rat toll-like receptor 3,TLR3 ELISA kit

去甲基吡羅昔康(吡羅昔康雜質(zhì)B)質(zhì)量規(guī)格：美國進口Desmethyl Piroxicam (Piroxicam Impurity B)  小鼠V-Ha-Ras肉瘤病毒癌基因同源物(HRAS)ELISA試劑盒 ，英文名： HRAS ELISA Kit  CLIAKitforsP-selectin(MousesolubleP-selectin)ELISAKit小鼠可溶性P選擇素規(guī)格：48T/96T
磺胺嘧啶質(zhì)量規(guī)格：美國進口Sulfadiazine  Tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand 4 (AIL-R4) ELISA Kit 人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體4(AIL-R4)ELISA試劑盒  石蠟切片組織組蛋白H3-K4甲基化熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20

SEPT2人胞裂蛋白2ELISA試劑盒說明書N-乙?；前粪奏べ|(zhì)量規(guī)格：美國進口N-Acetyl Sulfadiazine  HumanCalfiestinalalkalinephosphatase,CIAPELISAKit 人牛小腸堿性1酸酶(CIAP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝  ELISAKitPTP/PTPase/CD148人蛋白酪氨酸1酸酶規(guī)格：48T/96T

5'-羥基苯卡維地洛質(zhì)量規(guī)格：美國進口5'-Hydroxyphenyl Carvedilol  humaninhibinbeta-B,InhbbELISA試劑盒人抑制素β-B(Inhbb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  大鼠熱休克因子1(HSF1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

O-去甲卡維地洛質(zhì)量規(guī)格：美國進口O-Desmethyl Carvedilol  組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-7)活性比色法定量檢測試劑盒20  人胎盤堿性1酸酶(PLAP)試劑盒 Human Placeal alkaline pkosphatase,PLAP ELISA Kit