試劑和樣本的控制方法：
一、試劑
1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān)，我司嚴(yán)格按照國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn)，已獲得國家承認(rèn)的“三證”，每一個(gè)產(chǎn)品都有對應(yīng)的生產(chǎn)批號，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必?fù)?dān)心會(huì)有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。
2.試劑的準(zhǔn)備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后，再進(jìn)行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度，以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；
類風(fēng)濕因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG；
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；
③檢測抗原時(shí)，可用2-巰基乙醇加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解。

下列是公司產(chǎn)品ELISA試劑盒的詳細(xì)說明書：
中文名稱：NKRF人NFKB抑制因子進(jìn)口檢測試劑盒
英文簡稱：Human NFKB Repressing Factor(NKRF)ELISA Kit
產(chǎn)品貨號：PH103154
規(guī)格：96T/48T
適用范圍：僅供科研使用
保存及有效期：2-8℃保存，6個(gè)月，-20℃一年

使用方法：
測定法的靈敏度來自作為報(bào)告的酶。眾所周知，酶是一種有機(jī)催化劑，很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng)，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。   24μg/ml    5號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 12μg/ml    4號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 6μg/ml     3號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 3μg/ml     2號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 1.5μg/ml   1號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
ELISA 試驗(yàn)時(shí)，注意事項(xiàng)如下： 
     1. 正式試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗(yàn)條件，待檢樣品應(yīng)作一式二份，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高，說明有非特異性反應(yīng)，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。 
     2. 在ELISA中，進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的，其中包括: 
     （1） 固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選：用等量抗原包被，在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。 
     （2） 包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時(shí)，要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度（0.1、1.0和10μg／ml等）進(jìn)行包被后，在其它試驗(yàn)條件相同時(shí)，觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg／ml。 
     （3） 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定（見酶標(biāo)記抗體部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。 
     （4） 酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要**價(jià)廉、**、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后，應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入 。

環(huán)吡酮-d11  Ciclopirox-d11  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱RatBigETELISAKit大鼠大內(nèi)皮素(BigET)規(guī)格：96T/48T

環(huán)吡酮β-D-葡萄糖苷酸  Ciclopirox beta-D-Glucuronide  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱RatBonemorphogeneticprotein2ELISAKit大鼠骨成型蛋白質(zhì)2(BMP-2)規(guī)格：96T/48T

4-羥基纈沙坦（非對映）  4-Hydroxy Valsartan (Mixture of Diastereomers)  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱RatBonemorphogeneticprotein3ELISAKit大鼠骨成型蛋白質(zhì)3(BMP-3)規(guī)格：96T/48T

雌酮醋酸鹽  Estrone Acetate  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱RatBonemorphogeneticprotein4ELISAKit大鼠骨成型蛋白質(zhì)4(BMP-4)規(guī)格：96T/48T

4-甲氧基-13C,d3-雌酮  4-Methoxy-13C,d3-estrone  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱RatBonemorphogeneticprotein6ELISAKit大鼠骨成型蛋白質(zhì)6(BMP-6)規(guī)格：96T/48T

4-甲氧基-[13C,2H3]-雌酮  4-Methoxy-[13C,2H3]-estrone  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱RatBonemorphogeneticprotein7ELISAKit大鼠骨成型蛋白質(zhì)7(BMP-7)規(guī)格：96T/48T

雌酮-2,4,16,16-d4 3-硫酸鈉鹽  Estrone-2,4,16,16-d4 3-sulfate  salt  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱RatBonemorphogeneticprotein7ELISAKit大鼠骨成型蛋白質(zhì)7(BMP-7)規(guī)格：96T/48T

2-羥基雌酮  2-Hydroxy Estrone  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱RatBone-specificAlkphase-BELISAKit大鼠骨特異性堿性0酸酶(AlP-B)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

雌酮 3-硫酸鉀鹽  Estrone 3-sulfate potassium salt  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱RatBone-specificAlkphase-BELISAKit大鼠骨特異性堿性0酸酶(AlP-B)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

雌酮 3-甲酯  Estrone 3-methyl ether  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱RatBradykinin(BK)ELISAKit大鼠緩激肽酶聯(lián)分析(BK)ELISAKit規(guī)格：96T/48T
人支氣管平滑肌細(xì)胞總RNAHBSMC NA檸檬酸鐵銨Ammomium ferric 質(zhì)量規(guī)格：AR

小鼠雪旺細(xì)胞(MSC)(5×105)氯化膽堿Choline chloride質(zhì)量規(guī)格：>98%,適用于細(xì)胞培養(yǎng)

中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO 1beta9,12.5 Clone 36D-葡萄糖酸內(nèi)酯D-Gluconolactone質(zhì)量規(guī)格：>99%

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(HNP抗性);HNP MEF(CF-1) 小鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL氯吡脲；氯吡苯脲；吡效隆Forchlorfenuron,4-CPPU,CPPU,KT-30質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

GC-1, 鼠精原細(xì)胞 Mouse醋酸鎂四水(分子生物學(xué)級)Magnesium acetate, tetrahydrate質(zhì)量規(guī)格：>99%,分子生物學(xué)級
小鼠維生素C(VC)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Thevebioside  114586-47-9  中文名：  分子式：C36H56O13 

小鼠維生素B6(VB6)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Loxoprofen  中文名：洛索洛芬  分子式：C15H18O3  度：98.0%

小鼠維生素B12(VB12)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Losartan  中文名：氯沙坦  分子式：C22H23ClN6O  度：98.0%

小鼠維生素A(VA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Losartan  中文名：氯沙坦  分子式：C22H23ClN6O 

小鼠網(wǎng)膜素elisa試劑盒   小鼠網(wǎng)膜素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠網(wǎng)膜素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠網(wǎng)膜素試劑盒、小鼠網(wǎng)膜素elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。     Medetomidine   86347-15-1  中文名：鹽酸美托咪啶  分子式：C13H17ClN2

NKRF人NFKB抑制因子進(jìn)口檢測試劑盒檢測程序：
1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向?yàn)V紙上印干。
3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6.  洗板：同前。
7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。
8.  每孔加入100ul 終止液混勻。
9.  30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測 吸光值。