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操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
產(chǎn)品名稱 |
英文名稱 |
貨號 |
KIND2人Kindlin人2蛋白elisa試劑盒說明書 |
Human Kindlin 2(KIND2)ELISA Kit |
PH103240 |
優(yōu)勢特點(diǎn):產(chǎn)品僅用于科研
1.高效、靈敏、特異的抗體;
2.穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
3.吸附性能好,空白值低,孔低透明度高的固相載體;
4.使用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)液、尿液、唾液等等多種標(biāo)本類型;
5.節(jié)省實(shí)驗經(jīng)費(fèi)。
組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計算好的每次實(shí)驗所需的總量配制(100ul/孔),實(shí)際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制。
7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實(shí)驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
克霉唑 Clotrimazole
質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR
Ratnicotinamideadeninedinucleotidephosphate,NADPHELISA試劑盒大鼠煙酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸(NADPH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
克霉唑(標(biāo)準(zhǔn)品) Clotrimazole 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>97%,標(biāo)準(zhǔn)品 Ratnicotinicacetylcholinereceptor,N-AChRELISAKit大鼠型乙酰膽堿受體(N-AChR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
秋水仙堿 Colchlcine 質(zhì)量規(guī)格:> 98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) Ratnicotinicacetylcholinereceptor,N-AChRELISA試劑盒大鼠型乙酰膽堿受體(N-AChR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
秋水仙堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Colchlcine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Ratniicoxide,NOELISAKit大鼠(NO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
硫酸粘桿菌素,多粘菌素E硫酸鹽 Colistin Sulphate 質(zhì)量規(guī)格:≥19000IU/mg,EP6 Ratniicoxide,NOELISA試劑盒大鼠(NO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
硫酸粘桿菌素(標(biāo)準(zhǔn)品) Colistin Sulphate 質(zhì)量規(guī)格:效價測定 Ratniicoxidesyhase,NOSELISAKit大鼠合成酶(NOS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鹽酸依氟鳥氨酸 Eflornithine HCl 質(zhì)量規(guī)格:>98%,水合物 Ratniicoxidesyhase,NOSELISA試劑盒大鼠合成酶(NOS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
色甘酸鈉 Cromolyn 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP32,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) ratNoradrenaline,NAELISAKit大鼠去甲(NA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
色甘酸鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) Cromolyn 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 ratNoradrenaline,NAELISA試劑盒大鼠去甲(NA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
環(huán)孢菌素,環(huán)孢素A,環(huán)孢霉素A Cyclosporine A 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
RatN-terminalpro-brainnaiureticpeptide,-proBNPELISAKit大鼠N端前腦素(-proBNP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
大額牛肺細(xì)胞;BFR-L1硝酸奧昔康唑(標(biāo)準(zhǔn)品)Oxiconazole Nitrate質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定
Ishikawa, 人內(nèi)膜癌細(xì)胞系普瑞巴林(標(biāo)準(zhǔn)品)Pregabalin質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定
人腦瘤細(xì)胞;SF767 大鼠腮腺細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL(S)-(+)-苯乙醇酸(普瑞巴林雜質(zhì))(標(biāo)準(zhǔn)品)[(S)-(+)-MandelicAcid] (Pregabalin impurity)質(zhì)量規(guī)格:供檢查用
腎系膜細(xì)胞生長添加物MCGS山梨醇(標(biāo)準(zhǔn)品)D-Sorbitol質(zhì)量規(guī)格:供檢查用
TNFSF9
Others Rat 大鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 乙二醇(標(biāo)準(zhǔn)品)Ethylene Glycol質(zhì)量規(guī)格:供檢查用
小鼠狀腺原酸elisa試劑盒 小鼠狀腺原酸試劑盒
規(guī)格型號:96T/48T 小鼠狀腺原酸試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠狀腺原酸試劑盒、小鼠狀腺原酸elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Herbaridine B
中文名: 分子式:C17H20O6 度:%
小鼠狀腺原酸(T3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Horminone 21887-01-4 中文名:7α-羥基羅列酮 分子式:C20H28O4
小鼠狀腺原酸(T3)ELISAKit ELISA. 96T/48T Hemapolin 中文名:甲基環(huán)硫雄醇中間體 E 分子式:C20H32OS 度:98.0%
小鼠狀腺原酸 英文名稱: T3 Mouse iiodothyronine 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: T3 Herbarin 36379-67-6 中文名: 分子式:C16H16O6
小鼠轉(zhuǎn)移趨化生長因子β 英文名稱:
Mouse ansforming Growth Factor β 規(guī)格: 48T/96T
英文縮寫: TGFβ Nebivolol 169293-50-9
中文名:鹽酸奈必洛爾 分子式:C22H26ClF2NO4
注意事項:
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
3. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5 分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD 值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物請避光保存。
7. 嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號組分不得混用。
KIND2人Kindlin人2蛋白elisa試劑盒說明書服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費(fèi)代測。