下列是公司產(chǎn)品ELISA試劑盒的詳細(xì)說明書：
中文名稱：HTRA1人HtrA絲氨酸肽酶1elisa試劑盒說明書
英文簡稱：Human HtrA Serine Peptidase 1(HTRA1)ELISA Kit
產(chǎn)品貨號(hào)：PH103268
規(guī)格：96T/48T
適用范圍：僅供科研使用
保存及有效期：2-8℃保存，6個(gè)月，-20℃一年

試劑和樣本的控制方法：
一、試劑
1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對(duì)ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān)，我司嚴(yán)格按照國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn)，已獲得國家承認(rèn)的“三證”，每一個(gè)產(chǎn)品都有對(duì)應(yīng)的生產(chǎn)批號(hào)，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必?fù)?dān)心會(huì)有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。
2.試劑的準(zhǔn)備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后，再進(jìn)行測(cè)定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度，以滿足后面的測(cè)定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；
類風(fēng)濕因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG；
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；
③檢測(cè)抗原時(shí)，可用2-巰基乙醇加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解。
檢測(cè)程序：
1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向?yàn)V紙上印干。
3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6.  洗板：同前。
7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。
8.  每孔加入100ul 終止液混勻。
9.  30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測(cè) 吸光值。

使用方法：
測(cè)定法的靈敏度來自作為報(bào)告的酶。眾所周知，酶是一種有機(jī)催化劑，很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng)，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。   24μg/ml    5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 12μg/ml    4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 6μg/ml     3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 3μg/ml     2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 1.5μg/ml   1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
雷帕霉素/西羅莫司（標(biāo)準(zhǔn)品）  Rapamycin(Sirolimus)  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 RatterminalcomplemecomplexC5b-9,TCCC5b-9ELISAKit大鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCCC5b-9)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

甲磺酸雷沙吉蘭  Rasagiline Mesylate  質(zhì)量規(guī)格：>98.5% RatTestoterone,TELISAKit大鼠睪同(T)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

白藜蘆醇  Resveratrol  質(zhì)量規(guī)格：>97.0%,BR RatTGF-beta-inducibleearlyresponsegene-1,TIEG1ELISAKit大鼠TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

白藜蘆醇（標(biāo)準(zhǔn)品）  Resveratrol  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%，標(biāo)準(zhǔn)品 Ratthioredoxieductase,xRELISAKit大鼠硫氧還蛋白還原酶(xR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

瑞替加濱堿  Retigabine Base  質(zhì)量規(guī)格：含量>99.0% RatThioredoxin,xELISAKit大鼠硫氧化還原蛋白(x)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

瑞替加濱  Retigabine  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>95%, Ratthrombieceptor,ELISAKit大鼠凝血酶受體()ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

利巴韋林  Ribavirin  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR RatThrombinactivatablefibrinolysisinhibitor,TAFIELISAKit大鼠纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

利巴韋林（標(biāo)準(zhǔn)品）  Ribavirin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Ratthrombin-aithrombincomplex,TATELISAKit大鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物(TAT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

硫酸核糖霉素  Ribostamycin Sulfate  質(zhì)量規(guī)格：≥630μg/mg,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) Ratthrombomodulin,TMELISAKit大鼠血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

利福布丁  Rifabutin   質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR RatThrombopoietin,TPOELISAKit大鼠血小板**素(TPO)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S2酞菁(以升華法化)Phthalocyanine (purified by sublimation)質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(N)

TF Others Mouse 小鼠 ansferrin / CD176 / Seroansferrin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 苉(升華提)Picene (purified by sublimation)質(zhì)量規(guī)格：>99.5%(GC)

視網(wǎng)膜muller細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)5,6,11,12-四苯基并四苯(升華提)5,6,11,12-Tetraphenylnaphthacene (purified by sublimation)質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC)

KU812細(xì)胞，人外周血嗜堿性白細(xì)胞 615小鼠癌瘤株,Ca763細(xì)胞 MTT細(xì)胞活力和增殖檢測(cè)試劑盒MTT1,2,3,4,8,9,10,11,15,16,17,18,22,23,24,25-十六氟酞菁銅(II)(以升華法化)1,2,3,4,8,9,10,11,15,16,17,18,22,23,24,25-Hexadecafluorophthalocyanine Copper(II) (purified by sublimation)質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(N)(T)

NCI-H446(人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×23,4,9,10-苝四羧酸二酐(>98.0%(T))3,4,9,10-Perylenetetracarboxylic Dianhydride質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)
血小板衍生生長因子c   英文名稱：   Human Platelet Derived Growth Factor C   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   PDGF-C  Aspergillon A  中文名：  分子式：C22H32O 

血小板衍生生長因子   英文名稱：   Platelet Derived Growth Factor   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   PDGF  O-Benzyl-L-serine  中文名：O-芐基-L-絲氨酸  分子式：C10H13NO3 

血小板衍化生長因子-BB   英文名稱：   plateler-derived growth factor BB   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   PDGF-BB  Periplocin  中文名：杠柳苷  分子式：C36H56O13 

血小板衍化生長因子-AB   英文名稱：   plateler-derived growth factor AB   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   PDGF-AB  Periplocin  中文名：杠柳苷  分子式：C36H56O13  度：98.5%

血小板衍化生長因子 -BB(PDGF-BB)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 R&D     Pentagalloylglucose  14937-32-7  中文名：五沒食子酰葡萄糖  分子式：C41H32O26
ELISA 試驗(yàn)時(shí)，注意事項(xiàng)如下： 
     1. 正式試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)分別以陽性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件，待檢樣品應(yīng)作一式二份，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高，說明有非特異性反應(yīng)，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。 
     2. 在ELISA中，進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的，其中包括: 
     （1） 固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選：用等量抗原包被，在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。 
     （2） 包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時(shí)，要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度（0.1、1.0和10μg／ml等）進(jìn)行包被后，在其它試驗(yàn)條件相同時(shí)，觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值z(mì)ui大而蛋白量zui少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg／ml。 
     （3） 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定（見酶標(biāo)記抗體部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。 
   HTRA1人HtrA絲氨酸肽酶1elisa試劑盒說明書  （4） 酶的底物及供氫體的選擇：對(duì)供氫體的選擇要**價(jià)廉、**、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后，應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入 。