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我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無**、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究
產(chǎn)品名稱 |
NCI-h1688細(xì)胞 |
規(guī)格 |
T25 |
貨號 |
BH-0109351 |
產(chǎn)品詳細(xì) 經(jīng)典小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-h1688
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞是1982年由Carney D和Gazdar AF等從一位小細(xì)胞肺癌患者的胸腔積液中建立的。細(xì)胞的原始形態(tài)并不具有小細(xì)胞肺癌特征。這個細(xì)胞株是小細(xì)胞肺癌的生化和形態(tài)學(xué)上的變種,表達(dá)神經(jīng)元特有的烯醇酶和腦型肌酸激酶同工酶;多巴脫羧酶、蠶素、抗**、催產(chǎn)素或胃泌釋放肽未達(dá)到可檢測水平。與正常細(xì)胞相比,該細(xì)胞CS-myc DNA序列擴(kuò)增約20倍,RNA增加15倍。初傳代培養(yǎng)基用含有5%FBS的RPMI1640,另外添加10 nM氫化可的松、0.005 mg/ml胰島素、0.01 mg/ml轉(zhuǎn)鐵
培養(yǎng)條件 RPMI1640+10%FBS
傳代方法 1:2傳代
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個; 人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞
3、50ml離心筒2個
4、培養(yǎng)皿1個,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細(xì)胞計數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計數(shù)器、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C?;蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及細(xì)胞化學(xué)檢測。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明 :
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)玻璃**,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
血清淀粉樣蛋白 英文名稱: serum amyloid A
protein 規(guī)格:
48T/96T 英文縮寫: SAA Parecoxib
中文名:帕瑞考昔鈉 分子式:C19H17N2NaO4S 度:98.0%
血清低密度脂蛋白(LDL)測試盒 Two semi test case p-Anisoin 中文名:對茴香偶姻 分子式:C16H16O4 度:98.0%
血濃度測試盒
可見分光光度法 50管/48樣
p-Anisil 中文名:茴香偶酰 分
商陸皂苷T HPLC≥98% 20mg 小鼠游離甲狀腺素(FT4)ELISA試劑盒 ,英文名: FT4 ELISA Kit
商陸皂苷甲 HPLC≥98% 20mg 小鼠(EPI)ELISA檢測試劑盒MouseEpinephrine/Adrenaline,EPIELISAKit 96T/48T
商陸皂苷辛 HPLC≥98% 20mg 人解脲脲原體抗體(UU-Ab)試劑盒 Human ureaplasma urealyticum(UU)aibody ELISA kit
商陸皂苷乙 HPLC≥98% 20mg Ratai-doublesandedDNA,dsDNAELISAKit大鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
商陸皂苷元 HPLC≥98% 20mg 組蛋白H2B-K46乙?;瘷z測試劑盒10/20等
尚含雞納甙 HPLC≥98% 20mg MouseAngiotensinconveingenzyme,ACEELISA試劑盒小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
芍藥苷 HPLC≥98% 20mg 小鼠游離(F-TESTO)ELISA試劑盒 ,英文名: F-TESTO ELISA Kit
芍藥內(nèi)酯苷 HPLC≥91.4% 20mg 小鼠克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16)ELISA檢測試劑盒MouseClaracellprotein,CC16ELISAKit 96T/48T
蛇床素 HPLC≥98% 20mg 人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CF)試劑盒 Human CF ELISA Kit
蛇床酮 HPLC≥98% 20mg
Ratai-EndomysialAibodyIgA,EMAIgAELISAKit大鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMAIgA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
玉米赤霉烯酮親和柱25根/盒,1mlHemapolin426甲基環(huán)硫雄醇中間體 E
赭曲霉A親和柱25根/盒,3mlGynuramide II29533
可溶性表達(dá)宿主菌HB21510ul/支Guaiacol glycidyl ether224
融合表達(dá)宿主菌TG10ul/支Griseofulvin1267灰黃霉素
輔助噬菌體M13K070ul/支,pfu=13Gracillin18纖細(xì)薯蕷皂苷
收到如何處理:
1、首先,觀察培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、NCI-h1688細(xì)胞懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作。