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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:HepG2細胞

  • 產(chǎn)品型號: BH-0109385
  • 產(chǎn)品**:派瑞曼
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
HepG2細胞來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實驗室,可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù)。
詳情介紹:

細胞生物學研究有以下幾個方面。產(chǎn)品僅用于科學研究
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括。
①細胞核、染色體以及基因表達的研究。
②生物膜與細胞器的研究。
③細胞骨架體系的研究。
④細胞增殖及其調(diào)控。
⑤細胞分化及其調(diào)控。
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細胞的起源與進化。
⑧細胞工程。

產(chǎn)品名稱

HepG2細胞

規(guī)格

T25

貨號

BH-0109385

產(chǎn)品詳細 肝癌細胞;HepG2
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞來源于一名15歲的白人少年的肝癌組織。該細胞表達甲胎蛋白、白蛋白、α-2-巨球蛋白、α-CQ-E抗胰蛋白酶、轉(zhuǎn)鐵蛋白、α-CQ-E抗凝乳蛋白酶、結(jié)合珠蛋白、銅藍蛋白、纖溶酶原、補體C4、C3激活物、纖維蛋白原、α-1酸性糖蛋白、α-2-HS-糖蛋白、β-脂蛋白、視黃醇結(jié)合蛋白;表達胰島素受體和胰島素樣生長因子IGFⅡ的受體;該細胞具有CQ-羥基-CQ-甲酰輔酶A還原酶和肝甘油三酯脂肪酶的活性。目前尚未證明該細胞中有HBV基因組。
培養(yǎng)條件 DMEM(高糖)+10%FBS
傳代方法 1:2傳代
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學科領(lǐng)域較為寬廣,如細胞學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等; 
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
    1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
    2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
    3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織完全被消化;
    4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
    5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、熒光鑒定:
    1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
    2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
    3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
    4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
    5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
    6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

培養(yǎng)操作:
1)復(fù)蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。      
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。 
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
小鼠增殖細胞核抗原   英文名稱:   Proliferating Cell Nuclear Aigen   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   PCNA  m-Nitrohydrocinnamic acid  中文名:  分子式:C9H9NO4 

小鼠早期生長反應(yīng)因子1   英文名稱:   Mouse Early Growth Response Protein 1   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   EGR-1  Nandrolone laurate  中文名:月桂酸諾龍
氧化石蒜堿 HPLC≥98% 20mg Humanmelanoma-associatedaigen,MAGEELISAKit 人黑色素瘤相關(guān)抗原(MAGE)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

氧化小檗堿 HPLC≥98% 20mg CLIAKitfor26SPSMELISAKit大鼠26S蛋白酶體規(guī)格:48T/96T

氧化型谷胱甘肽 HPLC≥98% 20mg 飲料甘素(dulcin)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒20

藥根堿 HPLC≥98% 20mg MouseL-SelectinELISAKit小鼠L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

野百合堿 HPLC≥99% 20mg 小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP3)ELISA試劑盒 ,英文名: IGFBP3 ELISA Kit

野黃芩苷 HPLC≥98% 20mg 兔子白介素1(IL-1)ELISA檢測試劑盒RabbitIerleukin1,IL-1ELISAKit 96T/48T

野黃芩素 HPLC≥98% 20mg 犬肝堿性0酸酶(L-ALP)試劑盒 Canine Liver Alkaline Phosphatase,L-ALP ELISA Kit

野鷲尾苷 HPLC≥98% 20mg 英文名稱HumanIercellularadhesionmolecular1ELISAKIT人細胞間粘附分子1(ICAM-1)(CD54)ELISAKIT規(guī)格:96T/48T

野菊花內(nèi)酯 HPLC≥98% 10mg 大量藍藻菌基因組DNA氯化銫萃取試劑盒5

野馬追內(nèi)酯A HPLC≥95% 20mg RatIerleukin5,IL-5ELISA試劑盒大鼠白介素5(IL-5)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
蛋白提取試劑盒0次 4-Aminobenzophenone113714-氨基二苯甲酮

植物總蛋白提取試劑盒(適用于模式植物)次 4-Aminoantipyrine1983/7/84-氨基安替比林

HepG2細胞植物總蛋白提取試劑盒-通用型次 4-Amino-hydroxybenzoic acid237434-氨基-羥基苯甲酸

2×GC buffer   1ml/5×1ml/×1ml4-Amino-hydroxy-naphthalenesulfonic acid11634-氨基-羥基-萘磺酸

2×Long Taq PCR MasterMix   0μl/5×0μl4-Amino,5-dichloropyridine228898



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