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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱(chēng):J82細(xì)胞

  • 產(chǎn)品型號(hào): BH-0109481
  • 產(chǎn)品**:派瑞曼
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡(jiǎn)單介紹:
J82細(xì)胞在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
詳情介紹:

我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買(mǎi)到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以?xún)?nèi),活力>95%,無(wú)**、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究

產(chǎn)品名稱(chēng)

J82細(xì)胞

規(guī)格

T25

貨號(hào)

BH-0109481

產(chǎn)品詳細(xì) 膀胱移行細(xì)胞癌;J82
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞源自一名58歲患有膀胱移行細(xì)胞癌的白人男性。胞內(nèi)無(wú)橋粒,有大量粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及突出絨毛,表達(dá)ras基因。
培養(yǎng)條件 MEM培養(yǎng)基(GIBCO,添加NaHCO3 1.5g/L,Sodium Pyruvate 0.11g/L),90%;胎牛血清,10%。 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度。
傳代方法 1:2傳代
實(shí)驗(yàn)材料: 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶 
2. 100ml燒杯2個(gè); 人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞
3、50ml離心筒2個(gè) 
4、培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊; 
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把; 
8、酒精燈1臺(tái); 

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。 
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲(chǔ)存,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類(lèi)。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低  1°C。或者,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。 
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片); 
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí); 
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中; 
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。 

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明 :
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)玻璃**,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕; 
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
小鼠嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子   英文名稱(chēng):   Eotaxin   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫(xiě):   Eotaxin  Floribundone 1  中文名:  分子式:C32H22O10 

小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子elisa試劑盒   小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T   小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子試劑盒、小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子elisa試劑盒   保存條件:2-8℃
黃質(zhì)寧 HPLC≥98% 5mg 人饑餓(GHRL)試劑盒 Human Ghrelin,GHRL ELISA Kit

黃鐘花醌 HPLC≥98% 5mg RatCollageypeⅠ,ColⅠELISAKit大鼠Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

灰葉草素, 羥基魚(yú)藤素 HPLC≥98% 5mg 10倍碳酸濃縮緩沖溶液100毫升

灰葉酸 HPLC≥98% 5mg MouseComplemefragme3a,C3aELISA試劑盒小鼠補(bǔ)體片斷3a(C3a)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

檜脂素,灑維寧 HPLC≥98% 5mg 小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒 ,英文名: ACE ELISA Kit

霍香黃酮醇 HPLC≥98% 5mg 小鼠α1微球蛋白(α1-MG)ELISA檢測(cè)試劑盒Mouseα1-microglobulin,α1-MGELISAKit 96T/48T

雞蛋花甙 HPLC≥98% 5mg 人活性氧(ROS)試劑盒 Human Reactive OXyen Species,ROS ELISA Kit

雞豆黃素配糖物 HPLC≥98% 5mg RatCollageypeⅡ,ColⅡELISAKit大鼠Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

雞納酸 HPLC≥98% 5mg 10倍合成基礎(chǔ)培養(yǎng)液100毫升

雞矢藤苷甲酯 HPLC≥98% 5mg MouseComplemefragme4a,C4aELISA試劑盒小鼠過(guò)敏/補(bǔ)體片斷4a(C4a)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
貓?jiān)葱猿煞謫沃責(zé)晒釶CR檢測(cè)試劑盒(定量)(不含提取)48N-Acetyl-L-tyrosine5375乙酰酪氨酸

鵝源性成分單重?zé)晒釶CR檢測(cè)試劑盒(定量)(不含提?。?84-Acetylbiphenyl9214-乙?;?

兔源性成分單重?zé)晒釶CR檢測(cè)試劑盒(定量)(不含提?。?8N-Acetyl-m-toluidine5372N-乙酰間甲苯胺

貂源性成分單重?zé)晒釶CR檢測(cè)試劑盒(定量)(不含提取)48Allopurinol31別嘌醇

牛羊源性成分通用單重?zé)晒釶CR檢測(cè)試劑盒(定量)(不48Adipic dihydrazide713己二酸二酰肼
收到如何處理:
1、首先,觀察培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、J82細(xì)胞貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,可正常傳代;若未超過(guò)80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過(guò)80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。


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