產(chǎn)品詳細(xì) 視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞；ARPE-19
形態(tài)特性 上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系源自于一名19歲車(chē)禍罹難的健康男性的視網(wǎng)膜組織，由Amy Aotaki-Keen建系于1986年。該細(xì)胞系表達(dá)視網(wǎng)膜色素細(xì)胞特有的分子標(biāo)記如胞內(nèi)視黃醛結(jié)合蛋白和PRE-65。
培養(yǎng)條件 DMEM+10%FBS
傳代方法 1：2傳代
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面。產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括。
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究。
②生物膜與細(xì)胞器的研究。
③細(xì)胞骨架體系的研究。
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控。
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控。
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化。
⑧細(xì)胞工程。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
    1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大?。?br>     2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
    3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織完全被消化；
    4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
    5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、熒光鑒定：
    1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
    2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
    3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
    4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
    5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
    6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

培養(yǎng)操作：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。      
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。 
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
小鼠環(huán)孢素A(CsA)ELISAKit                 Mesterolone  1424-00-6  中文名：甲氫  分子式：C20H32O2 

小鼠環(huán)0酸腺苷(mouse cAMP)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Dihydrotanshinone I  中文名：  分子式：C18H14O3  度：98.5%

小鼠環(huán)0酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒     Dimethylolurea  中文名：雙羥甲脲  分子式：C3H8N2O3
克霉唑  Clotrimazole  質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR 5-羥色胺(Serotonin)轉(zhuǎn)運(yùn)功能檢測(cè)試劑盒20

克霉唑(標(biāo)準(zhǔn)品)  Clotrimazole  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>97%,標(biāo)準(zhǔn)品 MouseFreeThyroxine,FT4ELISA試劑盒小鼠游離甲狀腺素(FT4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

秋水仙堿  Colchlcine  質(zhì)量規(guī)格：> 98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 小鼠突觸素(SYP)ELISA試劑盒 ，英文名： SYP ELISA Kit

秋水仙堿(標(biāo)準(zhǔn)品)  Colchlcine  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 兔血管**素2(ANG-2)ELISA檢測(cè)試劑盒RabbitAngiopoietin2,ANG-2ELISAKit 96T/48T

硫酸粘桿菌素,多粘菌素E硫酸鹽  Colistin Sulphate  質(zhì)量規(guī)格：≥19000IU/mg,EP6 牛特異性蛋白B(PSPB)試劑盒 Bovine Pregnancy Specific Protein B,PSPB ELISA Kit

硫酸粘桿菌素(標(biāo)準(zhǔn)品)  Colistin Sulphate  質(zhì)量規(guī)格：效價(jià)測(cè)定 英文名稱Humaissueinhibitorofmaixmetalloproteinase-2,TIMP-2ELISAkit人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)規(guī)格：96T/48T

鹽酸依氟鳥(niǎo)氨酸  Eflornithine HCl  質(zhì)量規(guī)格：>98%,水合物 動(dòng)物甲狀腺組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10

色甘酸鈉  Cromolyn   質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP32,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) Ratprogesteronereceptor,PGRELISA試劑盒大鼠孕同受體(PGR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

色甘酸鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）  Cromolyn   質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠突觸融合蛋白2(STX2)ELISA試劑盒 ，英文名： STX2 ELISA Kit

環(huán)孢菌素,環(huán)孢素A,環(huán)孢霉素A  Cyclosporine A  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR，可用于細(xì)胞培養(yǎng) 小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseInsulin-likegrowthfactorbindingprotein1,IGFBP-1ELISAKit 96T/48T
蛋白酶抑制劑Cocktail（片劑）5×1ml2-Carbamoyl-hydroxy,4-naphthoquinone364

蛋白酶抑制劑混合物（0×，哺乳動(dòng)物樣品提取用）1ml/5×1ml 2-Benzylsuccinic acid39726

蛋白酶抑制劑混合物（0×，通用型）1ml/5×1ml 2-Benzylaminopyridine693572-苯甲基氨基吡啶

蛋白酶抑制劑混合物（0×，抽提用）1ml/5×1ml 2-Benzylacrylic acid56699

蛋白酶抑制劑混合物（0×，或酵母抽提用）1ml/5×1ml 2-Benzyl-(dimethylamino)'-morpholinobutyrophenone11931322-芐基-(二甲基氨基)'-嗎啉基苯基丁酮
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等； 
適ARPE-19細(xì)胞用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。