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產(chǎn)品名稱 |
Hela-mock細胞 |
規(guī)格 |
T25 |
貨號 |
BH-0109620 |
產(chǎn)品詳細 轉染了microRNA-mock基因的陰性對照細胞;Hela-mock
形態(tài)特性
生長特性
特征特性
培養(yǎng)條件
傳代方法
細胞生物學研究有以下幾個方面。產(chǎn)品僅用于科學研究
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括。
①細胞核、染色體以及基因表達的研究。
②生物膜與細胞器的研究。
③細胞骨架體系的研究。
④細胞增殖及其調控。
⑤細胞分化及其調控。
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細胞的起源與進化。
⑧細胞工程。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大?。?br>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織完全被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
培養(yǎng)操作:
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM
EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
小鼠骨特異性堿性0酸酶B(ALP-B)ELISAKit Deoxylapachol 中文名: 分子式:C15H14O2 度:97.0%
小鼠骨橋素elisa試劑盒
小鼠骨橋素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠骨橋素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠骨橋素試劑盒、小鼠骨橋素eisa試劑盒
保存條件:2-8℃
保質期:6個月。
Dorzolomide 130693-82-2
中文名:鹽酸多佐胺 分子式:C1
鹽酸昂丹司瓊 Ondansetron
HCl 質量規(guī)格:>99%,BR,可用于細胞培養(yǎng) 小鼠天冬酸轉酶(AST)ELISA試劑盒 ,英文名: AST ELISA Kit
鹽酸昂丹司瓊(標準品) Ondansetron HCl 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品 豚鼠血清(NO)ELISA檢測試劑盒guineapigniicoxide,NOELISAKit 96T/48T
奧硝唑 Ornidazole 質量規(guī)格:>99%,BR 牛內皮型合成酶(eNOS)試劑盒 Bovine Endothelial niic oxide syhase,eNOS ELISA Kit
奧硝唑(標準品) Ornidazole 質量規(guī)格:HPLC>99%,標準品 英文名稱Human-TELISAKit人肌鈣蛋白-T(Tn-T)規(guī)格:96T/48T
奧沙利鉑 Oxaliplatin 質量規(guī)格:>99%,BR,細胞培養(yǎng)級 動物軟組織線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒20
奧沙利鉑(標準品) Oxaliplatin 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品 RatP-SelectinELISA試劑盒大鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
硝酸奧昔康唑 Oxiconazole Nitrate 質量規(guī)格:度>99% 小鼠天冬酸基轉移酶(AST)ELISA試劑盒 ,英文名: AST ELISA Kit
鹽酸土霉素 Oxytetracycline HCl 質量規(guī)格:>95%,BR 小鼠白介素18(IL-18)ELISA檢測試劑盒MouseIerleukin18,IL-18ELISAKit 96T/48T
鹽酸土霉素(標準品) Oxytetracycline HCl 質量規(guī)格:效價測定 人骨涎蛋白(BSP)試劑盒 Human bone sialoprotein,BSP ELISA Kit
縮宮素,醋酸催產(chǎn)素
Oxytocin Acetate 質量規(guī)格:>97%,BR Ratferritin,FEELISAKit大鼠鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
腸道常見致病菌檢測試劑盒(基因芯片法)盒S-Benzyl-L-cysteine54/1/1S-芐基-L-半胱氨酸
常見醫(yī)學致病菌分屬檢測試劑盒(基因芯片法)盒Sarsasapogenin1269菝葜皂苷元
HCV分片段抗體檢測試劑盒(基因芯片法)盒Sarmentosin719334垂盆草苷
常見篩查試劑盒(基因芯片法)盒Sarmentocymarin986331
蚊媒病原檢測試劑盒(基因芯片法)盒Sarafloxacin 912967鹽酸沙拉沙星
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備 記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5Hela-mock細胞.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣,如細胞學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。