實驗要點及說明 ：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法； 
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)玻璃**，并經(jīng)過鉻酸洗液處理； 
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕； 
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率； 
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

產(chǎn)品詳細(xì) 小鼠睪丸畸胎瘤細(xì)胞；P19
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 P19細(xì)胞株是從C3H/He小鼠中誘導(dǎo)的惡性畸胎瘤中建立的。該細(xì)胞在含有0.1mM2-巰基乙醇的培養(yǎng)基中可高效率地克隆。該細(xì)胞具有多能性，在500nM維A酸誘導(dǎo)下可以分化成神經(jīng)和神經(jīng)膠質(zhì)樣細(xì)胞；在0.5%~1.0%二甲亞砜(DMSO)存在下，分化形成心臟和骨骼肌樣細(xì)胞，但不形成神經(jīng)或神經(jīng)膠質(zhì)樣細(xì)胞；在DMSO和維A酸同時存在時，細(xì)胞的分化與只有維A酸一樣。
培養(yǎng)條件 DMEM(高糖）+10%FBS
傳代方法 1：2傳代
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無**、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究
實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml燒杯2個； 人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞
3、50ml離心筒2個 
4、培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 
5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 
6、細(xì)胞計數(shù)板1塊； 
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 
8、酒精燈1臺； 

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實驗方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計數(shù)器、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
培養(yǎng)操作步驟 ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時； 
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及細(xì)胞化學(xué)檢測。 
小鼠干擾素-α   英文名稱：   Ierferon α   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IFN-α  Ethyl 3-(3-amino-4-(methylamino)-N-(pyridin-2-yl)benzamido)propanoate  中文名：  分子式：C18H22N4O3 

小鼠干擾素-r(mouse IFN-r)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  D-arabinitol  中文名：  分子式：C5H12O5  度：%

小鼠干
馬來酸依那普利  Enalapril Maleate  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,USP 小鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)ELISA試劑盒 ，英文名： A1c ELISA Kit

馬來酸依那普利（標(biāo)準(zhǔn)品）  Enalapril Maleate  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA檢測試劑盒MouseLeukemiainhibitoryfactor,LIFELISAkit 96T/48T

氟尿嘧啶,5-氟脲嘧啶,5-氟尿嘧啶  5-Fluorouracil  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 人骨成型蛋白7(BMP-7)試劑盒 Human BMP-7 ELISA Kit

氟尿嘧啶,5-氟脲嘧啶,5-氟尿嘧啶（標(biāo)準(zhǔn)品）  5-Fluorouracil  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Ratfreechorionicgonadoopin,f-βCGELISAKit大鼠游離β絨毛膜促性腺(f-βCG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

琥珀酸舒馬曲普坦  Sumatriptan succinate   質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR AKT蛋白共沉淀分析試劑盒5

琥珀酸舒馬曲普坦(標(biāo)準(zhǔn)品)  Sumatriptan succinate   質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Mousegrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin,GHRP-GhrelinELISA試劑盒小鼠生長釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

硫酸鏈霉素  Streptomycin Sulphate  質(zhì)量規(guī)格：>720IU/MG,BR 小鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)ELISA 試劑盒

硫酸鏈霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)  Streptomycin Sulphate  質(zhì)量規(guī)格：效價測定 Rat cyclic guanosine monophosphate (cGMP) ELISA Kit 大鼠環(huán)0酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒

硫酸雙氫鏈霉素  Dihydrostreptomycin Sulphate  質(zhì)量規(guī)格：EP/USP Humanoctameranscriptionfactor2B,OTF2BELISAKit 人八聚體轉(zhuǎn)錄因子(OTF2B)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

雙氯芬酸鈉  Diclofenac   質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR Chickenβ-lactamaseELISA試劑盒雞β內(nèi)酰胺酶(β-lactamase)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
鼻疽伯克霍爾德菌核酸檢測試劑盒盒Solanesol1317茄尼醇

馬丘波病毒核酸檢測試劑盒盒 prasterone sulfate997去氫表雄酮硫酸鈉鹽

創(chuàng)傷孤菌核酸檢測試劑盒盒 cholate3619膽酸鈉

蠟樣芽孢核酸檢測試劑盒盒Sitosteryl palmitate285β-谷甾醇棕櫚酸酯

貝氏柯克斯體核酸檢測試劑盒盒Sitostenone581豆甾-烯-酮
收到如何處理:
1、首先，觀察培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、P19細(xì)胞懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作。