實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明 ：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法； 
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)玻璃**，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理； 
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕； 
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率； 
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

產(chǎn)品詳細(xì) 乳腺癌細(xì)胞
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 松散貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞源自40歲女性乳腺癌的腦轉(zhuǎn)移組織。
培養(yǎng)條件 Leibovitz's L-15+20%FBS
傳代方法 1:2～1:6傳代，每周換液2～3次
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)**、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究
實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml燒杯2個(gè)； 人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞
3、50ml離心筒2個(gè) 
4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 
8、酒精燈1臺(tái)； 

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C?；蛘?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。 
培養(yǎng)操作步驟 ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)； 
4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。 
脫氧膽酸   10g  Amoxapine  14028-44-5  中文名：阿莫沙平  分子式：C17H16ClN3O  度：98.0%   

脫羧酶（PDC）試劑盒   紫外分光光度法    50管/48樣  Atracurium oxalate  64228-78-0  中文名：阿曲庫(kù)胺草酸鹽  分子式：C53H68N2O16 

脫氫血栓素B2   英文名稱：   Human 11 dehydro Thromboxane B211   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   11-DH-
N-羥基丁二(>98%,BR)  N-Hydroxysuccinimide  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR ELISAKitBAX兔Bcl-2相關(guān)X蛋白規(guī)格：48T/96T

沒(méi)食子酸一水物(標(biāo)準(zhǔn)品)  Gallic acid monohydrate  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠凝血因子ⅩⅢ(F13)ELISA試劑盒 ，英文名： F13 ELISA Kit

沒(méi)食子酸一水物  Gallic acid monohydrate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,AR 人胰島素受體β(ISR-β)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanInsulieceptorβ,ISR-βELISAKIT 96T/48T

1-酮戊二酸二鈉鹽(>98%,BR)  a-Ketoglutaric acid, di salt, dihydrate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 大鼠載脂蛋白A5(apo-A5)試劑盒 Rat Apolipoprotein A5,apo-A5 ELISA Kit

氫氧化鈣(>95%,BR)  Calcium hydroxide  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 英文名稱HumanD-DELISAKit人D-二聚體規(guī)格：96T/48T

低粘度羥丙基纖維素  HPC, hydroxypropyl cellulose  質(zhì)量規(guī)格：150~400 mpa.s,BR 端粒酶活性AP電泳分析試劑盒10

L(+)二鈉二水(>98%,BC )  L(+) tartrate dihydrate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC  ELISAKit8-epi-PGF2α兔8-異構(gòu)前列腺素規(guī)格：48T/96T

鹽酸吡哆胺(>98%,BC )  Pyridoxamine, di  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC  小鼠凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISA試劑盒 ，英文名： FⅩ ELISA Kit

水楊酸鈉(>99%,USP)   salicylate  質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP 小鼠胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA檢測(cè)試劑盒Mouseghcagons-likepepfide1,GLP-1ELISAKit 96T/48T

3-(環(huán)己氨基 )-1-丙磺酸鈉(分子生物學(xué)級(jí))  CAPS,  salt  質(zhì)量規(guī)格：>99%,分子生物學(xué)級(jí) 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)試劑盒 Human SP-A ELISA Kit
alignment marker 15 bp/0bp0ulTestosterone enanthate3157庚酸

size marker 0bp.5kb0ulTestosterone decanoate57211癸酸

Alignment marker 15 bp/2 kb0ulTestosterone benzoate88117-安息香酸雄烯醇酮

革蘭氏陰性菌DNA提取試劑盒TTestosterone acetate459醋酸

天花病毒核酸檢測(cè)試劑盒（PCR熒光探針?lè)ǎ?4人份/盒tert-Butyl4'-(bromomethyl)biphenyl-carboxylate11477
收到如何處理:
1、首先，觀察培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%，可正常傳代；若未超過(guò)80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、MDA-MB-361細(xì)胞懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過(guò)80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。