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我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無**、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究
產(chǎn)品名稱 |
HCC1937細(xì)胞 |
規(guī)格 |
T25 |
貨號(hào) |
BH-0109809 |
產(chǎn)品詳細(xì) 乳腺癌細(xì)胞
形態(tài)特性 上皮樣;多角形
生長特性 貼壁生長
特征特性 這株細(xì)胞1995年10月13日初來源于原發(fā)性導(dǎo)管癌, 用了11.5個(gè)月建株。腫瘤分類為TNM IIB期, 3級(jí)。BRCA1分析表明這株細(xì)胞是BRCA1 5382C突變純合的, 而來源于同一病人的類母細(xì)胞細(xì)胞株在這個(gè)突變位點(diǎn)上是雜合的。 另兩個(gè)家庭成員也有這個(gè)突變; 一個(gè)同卵雙生姐妹也患有乳腺癌。這株細(xì)胞有一個(gè)后天的TP53突變, 而其野生型等位基因丟失; 一個(gè)PTEN基因的后天的純合缺失, 以及多個(gè)與乳腺癌發(fā)病機(jī)理相關(guān)的位點(diǎn)上發(fā)生的雜合突變。這株細(xì)胞Her2-neu和p53表達(dá)都呈陰性。
培養(yǎng)條件 RPMI1640+10%FBS
傳代方法 1:2傳代;4-5天傳代一次。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個(gè); 人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞
3、50ml離心筒2個(gè)
4、培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺(tái);
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲(chǔ)存,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C?;蛘?,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明 :
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)玻璃**,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
兔子組織因子(TF)ELISAKit
Abiraterone acetate
154229-18-2 中文名:乙酸阿比特龍酯 分子式:C26H33NO2
兔子組織因子(TF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 2,2-Bis(hydroxymethyl)butyric acid 10097-02-6 中文名:2,2-二羥甲基丁酸 分子式:C6H12O4 度:98.0%
兔子組織型纖溶酶原激活劑elisa試劑盒
兔子組織型纖溶酶原激活劑試劑盒
4,5-二氯熒光素(>98%,BR) 4,5-Dichlorofluorescein 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人低密度脂蛋白受體(LDLR)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanlowdensitylipoproteieceptor,LDLRELISAKit
96T/48T
對(duì)乙氧基(>98%,BR) 4-Ethoxybenzaldehyde 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 大鼠抑制素B(INH-B)試劑盒 Rat inhibin B,INH-B ELISA Kit
4-羥基(>98%,BR) 4-Hydroxycoumarin 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 英文名稱HumanCCL22ELISAKit人CCL22規(guī)格:96T/48T
4-甲氧基酚(>98%,BR) 4-Methoxyphenol 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 非蛋白封阻緩沖液100毫升
對(duì)甲基肉桂酸(>98%,BR) 4-Methylcinnamic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR ELISAKitHD人組織蛋白去乙酰化酶規(guī)格:48T/96T
4-甲基傘形酯-N-乙酰-b-D-氨基半乳糖苷(>98%,BR) 4-Methylumbelliferyl N-acetyl-β-D-galactosaminide 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸氧化酶1(NOX1)ELISA試劑盒 ,英文名: NOX1 ELISA Kit
對(duì)硝基芐醇(>98%,BR) 4-Nitrobenzyl alcohol 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人極低密度脂蛋白受體(VLDLR)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanverylowdensitylipoproteieceptor,VLDLRELISAKit 96T/48T
無毒型核酸染色劑 4S Green Nucleic Acid Stain 4S Green 質(zhì)量規(guī)格:BR 大鼠抑制素A(INH-A)試劑盒 Rat Inhibin A,INH-A ELISA Kit
5,5-二甲基-1,3-環(huán)己二酮 5,5-Dimethyl-1,3-cyclohexanedione 質(zhì)量規(guī)格:BR 英文名稱HumanCCL21ELISAKit人CCL21規(guī)格:96T/48T
5-氟胞苷(>98%,BR)
5-Fluorocytidine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 非同位素AP-BCIP/NBT法DNA斑點(diǎn)雜交試劑盒5
5×A-plus MasterMix 5×加A反應(yīng)液
次 4-Acetylbiphenyl9214-乙?;?
5M 甜菜堿溶液 PCR級(jí) 5×1ml 4-Acetamidophenol對(duì)乙酰氨基酚
BSA溶液 PCR級(jí) 5×1ml 4-[2-[(3-Ethyl-methyl-oxo-pyrrolin-yl)carboxamido]ethyl]benzenesulfonamide11189
DMSO-PCR級(jí) 5×1ml 4-[2-(2-Amino,7-dihydro-oxoH-pymol[2,3-d]pyrimodin-yl)ethyl]benzoic acid methyl ester155
dNTP
mM 0.5ml4-[(4-Methylpiperazin-yl) methyl]benzoic
acid di62619甲磺酸伊馬替尼
收到如何處理:
1、首先,觀察培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、HCC1937細(xì)胞懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。