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細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備 記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣,如細胞學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。
產(chǎn)品名稱 |
LS411N細胞 |
規(guī)格 |
T25 |
貨號 |
BH-0109820 |
產(chǎn)品詳細 盲腸癌細胞
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性
培養(yǎng)條件 RPMI-1640+10%FBS
傳代方法 1:2傳代;每周2次
細胞生物學研究有以下幾個方面。產(chǎn)品僅用于科學研究
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括。
①細胞核、染色體以及基因表達的研究。
②生物膜與細胞器的研究。
③細胞骨架體系的研究。
④細胞增殖及其調(diào)控。
⑤細胞分化及其調(diào)控。
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細胞的起源與進化。
⑧細胞工程。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大?。?br>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織完全被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
培養(yǎng)操作:
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM
EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
兔子血小板活化因子elisa試劑盒
兔子血小板活化因子試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子血小板活化因子試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔子血小板活化因子試劑盒、兔子血小板活化因子eisa試劑盒
保存條件:2-8℃
保質(zhì)期:6個月。
Adefovir 中文名:阿德福韋 分子式:C8H12N5O4P
兔子血小板活化因子(PAF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
1-Methyl-3-nitropht
草酸銅(>97%,Tech Grade)
Copper(II) oxalate hydrate 質(zhì)量規(guī)格:>97%,工業(yè)級 英文名稱HumanBAFFELISAKit人B細胞活化因子(BAFF)規(guī)格:96T/48T
無水硫酸銅(>99%,BR) Copper(II) sulfate, anhydrous 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 非同位素HRP-DAB顯色法RNA北方雜交試劑盒5
肌酸酐;肌酐 Creatinine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR ELISAKitTF人轉(zhuǎn)移因子規(guī)格:48T/96T
酸性猩紅7B(>70%,BS) Crocein scarlet 7B 質(zhì)量規(guī)格:>70%,BS 小鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒 ,英文名: ET-1 ELISA Kit
酸性紅44(BS) Crystal ponceau 6R 質(zhì)量規(guī)格:BS 小鼠凋亡誘導因子(AIF)ELISA檢測試劑盒Mouseapoptosisinducingfactor,AIFELISAKit 96T/48T
環(huán)胞甙鹽酸鹽;鹽酸環(huán)胞苷;安西他濱鹽酸鹽 Cyclocytidine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人二0酸尿核苷葡糖酸基轉(zhuǎn)移酶2家族肽B4(UGT2B4)試劑盒 Human uridine dipho-sphate glucuronosylansferase 2 family polypeptide B4,UGT2B4 ELISA Kit
5'-三胞苷三鈉鹽 Cytidine-5'-triphosphate (CTP), 3 質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學級 RatmajorhistocompatibilitycomplexⅢ,MHCⅢ/AgBⅢ/H-1ⅢELISAKit大鼠主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHCⅢ/AgBⅢ/H-1Ⅲ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
細胞松弛素A(>98%,BR) Cytochalasin A 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR DHPR受體蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25
細胞松弛素C(>98%,BR) Cytochalasin C 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Mousep53/tumorprotein,p53/TP53ELISA試劑盒小鼠p53(p53)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
細胞松弛素 D(>98%,BR)
Cytochalasin D 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠內(nèi)皮素1(EDN1)ELISA試劑盒 ,英文名: EDN1 ELISA Kit
LS411N細胞2L 離心瓶5-Benzyl L-glutamate16763L-谷氨酸5-芐酯
2L塑料燒杯 藍標2L 1-Benzoyl-oxopiperidine2468681-苯甲?;?酮
2ml 96孔深孔板塊/包 1-Benzylimidazole423811-芐基咪唑
2ml本色可立螺口凍存管0個/盒N4-Benzoylcytosine266613N4-苯甲酰基胞嘧啶
2ml離心管(Axygen)0個/袋Benzyl 2,4-dihydroxyphenyl ketone366912,4-二羥基苯基芐酮