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菌種的培養(yǎng):
1、是指食用菌菌絲體及其生長基質組成的繁殖材料。菌種分為母種(種)、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經過擴大培養(yǎng)成為具有一定數量和質量的純生產菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的生產菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些生產菌種不產孢子,如赤霉素產生菌或產孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。產品僅用于科研
產品名稱
細黃鏈霉菌乳糖變種
英文名稱
Streptomyces
microflavus var. lactosus
貨號
BH-J011428
產品名稱:細黃鏈霉菌乳糖變種
編號:BH-J011428
拉丁文:Streptomyces microflavus var. lactosus
提供形式: 凍干物
**等級: 1
模式菌株: no
應用領域: 菌肥
培養(yǎng)基: ISP-2培養(yǎng)基:酵母提取物 4.0 g,麥芽提取物 10.0 g,葡萄糖 4.0 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾水 1.0 L,pH7.3。121℃,15分鐘。
生長條件: 28℃,好氧
存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
保存方法:
傳代保存法:培養(yǎng)基的濃度不宜過高,營養(yǎng)成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應在可能的范圍內盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于適生長溫度為好。若為產酸菌種,則應在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。
液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時間更長,適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧等的保存。
懸液保存法:
① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數年。本法應注意避免水分的蒸發(fā)。
② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長達10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。
載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。
常用的冷凍保存法:
① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多,有些可添加保護劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內,再放入低溫冰箱內進行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內,再置于冰箱內進行冷凍保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍廣的微生物保存法。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數為28 ℃,少數為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農產品為培養(yǎng)基。這是由于這些農產品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和完全,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為種子,把種子轉入發(fā)酵罐內發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將種子接入體積較大的種子罐內,經過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉入發(fā)酵罐內發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
細黃鏈霉菌乳糖變種公司專業(yè)代理ATCC菌種,價格優(yōu)惠,質量保證,為大中型科研提供嚴格質量體系控制的ATCC,CMCC,CICC,DSMZ標準菌株。
β-硫丹(標準品) β-Endosulfan 質量規(guī)格:分析標準品 牛誘導型合成酶(iNOS)試劑盒 Bovine
Inducible Niic Oxide Syhase,iNOS ELISA Kit
硫丹醇(標準品) Endosulfan alcohol 質量規(guī)格:分析標準品 牛孕/孕酮(PROG)試劑盒 Bovine
progesterone,PROG ELISA Kit
圣草苷(標準品) Eriocitrin 質量規(guī)格:≥98.0%(HPLC),分析標準品 牛載脂蛋白B100(Apo-B100)試劑盒 Bovine
apolipoprotein B100,Apo-B100 ELISA Kit
芴(Standard for GC,≥99%(HPLC)) Fluorene 質量規(guī)格:Standard
for GC,≥99%(HPLC) 牛脂蛋白脂酶(LPL)試劑盒 Bovine lipoprotein lipase,LPL ELISA Kit
芴(標準品) Fluorene 質量規(guī)格:分析標準品,≥99.5%(HPLC) 牛脂多糖結合蛋白(LBP)試劑盒 Bovine
lipopolysaccharide binding protein,LBP ELISA kit
芴甲氧羰酰氯(Fmoc-Cl) Fmoc chloride 質量規(guī)格:用于HPLC衍生化,≥99.0% (HPLC) 牛脂聯素(ADP)試劑盒 Bovine
adiponectin,ADP ELISA Kit
氟羅里硅土(農殘級) Florisil® 質量規(guī)格:農殘級 牛脂酰輔酶A合成酶試劑盒 Bovine acyl-CoA syhase ELISA kit
合成硅酸鎂吸附劑(250-125um)
Magnesium silicate adsorbent(Synthetic) 質量規(guī)格:250-125um 牛脂酰輔酶A脫氫酶試劑盒 Bovine acyl-Coenzyme A dehydrogenase ELISA kit
吡氟禾草靈標準溶液(0.101mg/ml) Fluazifop-P-butyl solution 質量規(guī)格:0.101mg/ml 牛主要組織相容性復合體(MHC/BoLA)ELISA檢測試劑盒Bovinemajorhistocompatibilitycomplex,MHC/BoLAELISAKit
96T/48T
惡唑酮菌(標準品) Famoxadone solution 質量規(guī)格:分析標準品,98.5% 牛主要組織相容性復合體(MHC/BoLA)試劑盒 Bovine
major histocompatibility complex,MHC/BoLA ELISA Kit
1201438-56-3 IPI-145 (INK1197) 100mg
Staphylococcus epidermidis表皮葡萄球菌探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
1201438-56-3 IPI-145 (INK1197) 10mg
Staphylococcus arlettae阿爾萊特葡萄球菌探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
1201438-56-3 IPI-145 (INK1197) 10mM(in1mLDMSO) Staphylococcus haemolyticus溶血葡萄球菌探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
1201438-56-3 IPI-145 (INK1197) 50mg
Staphylococcus arlettae阿爾萊特葡萄球菌探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
1201438-56-3 IPI-145 (INK1197) 5mg
Staphylococcus haemolyticus溶血葡萄球菌探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
Parsol HS(苯基苯并咪唑磺酸)標準品 PBDE209(Decabromodiphenylether) 27503-81-7 純品型,0.25g
防曬劑 Parsol 1789(丁基甲氧基二苯酰甲烷)
Parsol1789 7
硫酸巴龍霉素 標準品 Pentabromophenol 1263-89-4 純品型,0.1g