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產(chǎn)品名稱 |
小鼠骨膜干細(xì)胞 |
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英文名稱 |
Primary mouse periosteal stem cells |
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產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
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貨號 |
P-X1920 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細(xì)胞介紹：
骨膜是覆蓋在骨質(zhì)表面的一層結(jié)締組織。骨膜通過夏皮式纖維錨定在骨質(zhì)上，充當(dāng)外部肌肉組織和內(nèi)部骨質(zhì)的連接橋梁，這種結(jié)構(gòu)有助于維持骨膜的完整性。
1) 細(xì)胞來源于實驗動物正常關(guān)節(jié)骨膜組織。
我們推薦使用 Delf 原代間充質(zhì)干 細(xì)胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
注意事項：
1)原代培養(yǎng)的分離細(xì)胞在初次接觸體外環(huán)境時，雖然被分散成單個細(xì)胞，但它們之間的互相影響還是存在的， 而且這種影響對細(xì)胞能否存活是非常重要的。在這些細(xì)胞之間能產(chǎn)生一些促生長的活性物質(zhì)， 使細(xì)胞彼此互相促進(jìn)存活和生長。如果接種的細(xì)胞密度過低， 細(xì)胞之間的促生長作用很小， 雖然營養(yǎng)物質(zhì)很充足， 也很難使細(xì)胞適應(yīng)從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進(jìn)入獨立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細(xì)胞密度過大，會導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足， 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
產(chǎn)品的運輸和保存：
視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
骨膜由兩部分組成，外層疏松的纖維層與內(nèi)層致密的細(xì)胞層，纖維層中含有成纖維細(xì)胞、膠原纖維、彈力纖維及微管等。細(xì)胞層中多為骨膜源干細(xì)胞，這種干細(xì)胞與骨髓來源的間充質(zhì)干細(xì)胞類似，具有多向分化的潛能。
骨質(zhì)修復(fù)、重塑和更新與骨膜中的干細(xì)胞密切相關(guān)。在正常生理狀況下，骨膜組織發(fā)揮著維持骨質(zhì)更新及重塑的作用，其中的干細(xì)胞既可以通過膜內(nèi)成骨方式分化為成骨細(xì)胞，也可通過軟骨內(nèi)成骨方式分化為軟骨細(xì)胞。
2) 細(xì)胞鑒定：CD90或CD73免yi熒光染色為陽性。
3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)jun、酵母和真jun。
5) 細(xì)胞生長方式：成纖維樣細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
2)原代培養(yǎng)時初始培養(yǎng)在組織分散和分離細(xì)胞時細(xì)胞可能會受到嚴(yán)重的損傷。適當(dāng)增大原代培養(yǎng)接種的細(xì)胞密度， 給培養(yǎng)的細(xì)胞提供更多的類似于在體內(nèi)時細(xì)胞之間的相互作用， 會極大提高原代培養(yǎng)的細(xì)胞在體外存活率。待細(xì)胞適應(yīng)體外環(huán)境后進(jìn)行傳代培養(yǎng)時再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細(xì)胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破，分離細(xì)胞在體外培養(yǎng)時經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大，在體外存活和生長的難度相應(yīng)增加。 對于貼壁依賴性細(xì)胞來說，盡快使接種的細(xì)胞貼壁，是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵?？梢栽诮臃N后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h，由于細(xì)胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液， 細(xì)胞即可以維持存活， 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁， 是細(xì)胞迅速黏附于底物，待細(xì)胞貼壁后，再補足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細(xì)胞培養(yǎng)法—懸浮型細(xì)胞培養(yǎng) 。
操作步驟如下：
1、剪切組織：先將所取得的組織，用D-Hanks或Hanks液清洗，以去除表面血污，并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后，用手術(shù)刀將組織切成若干小塊，移入青霉素小瓶或小燒杯中，加入適量緩沖液，用彎頭眼科剪，反復(fù)剪切組織，直到組織成糊狀，約1mm3大小。靜置片刻后，用吸管吸去上層液體，加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離：消化分離的目的是將細(xì)小的組織塊消化分離成細(xì)胞團(tuán)或分散的單個細(xì)胞，以利于進(jìn)一步的培養(yǎng)，常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng)：細(xì)胞懸液用計數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。用培養(yǎng)液將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為（2～5）×105 cells／ml，或?qū)嶒炈杳芏龋盅b于培養(yǎng)瓶中，使細(xì)胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi)，5％CO2，37℃靜置培養(yǎng)。一般3～5d，原代培養(yǎng)細(xì)胞可以黏附于瓶壁，并伸展開始生長，可補加原培養(yǎng)液量1／2的新培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)2～3d后換液，一般7～14d可以長滿瓶壁，進(jìn)行傳代。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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兔脊髓神經(jīng)元細(xì)胞 |
Raji-LUC-eGFP-puro人淋ba瘤細(xì)胞 |
Phospho-TSC2 (Thr1462) Antibody Blocking Peptide |
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BOY-12E膀胱癌 |
NIH:OVCAR-3/GFP (STR)人卵巢癌腺癌細(xì)胞 |
RAB3IL1 Antibody Blocking Peptide |
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RAJI/LUC (STR)人Burkitt’s淋ba瘤細(xì)胞 |
TMD8人彌漫性大B細(xì)胞 |
SPRY4 Antibody Blocking Peptide |
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WILL-2人B細(xì)胞 |
SW1088人腦星形細(xì)胞 |
TFF2 Antibody Blocking Peptide |
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hne2人鼻咽癌 |
HL人胚肺二倍體細(xì)胞 |
Recombinant HPV16 E6 protein, DsbC & His |
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ZJU-0430GBC-SD人膽囊癌細(xì)胞 |
293T-LUC-puro人胚腎細(xì)胞 |
CHORDC1 Antibody Blocking Peptide |
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LUVA人肥大細(xì)胞 |
SK-MEL-2+LUC人皮膚黑色素瘤細(xì)胞 |
UHRF1BP1 Antibody Blocking Peptide |
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PC-9/LUC人肺腺癌細(xì)胞 |
LNCaP clone FGC/GFP人前列腺癌細(xì)胞 |
Zona pellucida glycoprotein 4 Antibody Blocking Peptide |
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hepG2-coGFP-PURO人肝癌細(xì)胞 |
NCI-H146人小細(xì)胞 |
ZNF638 Antibody Blocking Peptide |
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HELA/RFP人宮頸癌細(xì)胞 |
NCI-N87-LUC-EGFP-PURO人胃癌細(xì)胞 |
CYP2D6 Antibody Blocking Peptide |
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MUTZ-1 (STR)人骨髓增生異常綜合征細(xì)胞 |
HCC70人乳腺癌細(xì)胞 |
C5ORF33 Antibody Blocking Peptide |
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HDLM-2人霍奇金淋ba瘤細(xì)胞 |
MO3.13 (STR)人少突膠質(zhì)細(xì)胞 |
Ketohexokinase Antibody Blocking Peptide |
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HTh-7 (STR)人甲狀腺癌細(xì)胞 |
ketr-3人腎癌細(xì)胞 |
HSPC014/C13orf12 Antibody Blocking Peptide |
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HT-29/GFP (STR)人結(jié)腸癌細(xì)胞 |
HRGEC人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞 |
ZNF184 Antibody Blocking Peptide |
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HCT-8/V (STR)人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 |
YY8103人體肝癌細(xì)胞 |
小鼠骨膜干細(xì)胞MSR1/CD204 Antibody Blocking Peptide |