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公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
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產(chǎn)品名稱 |
小鼠冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞 |
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英文名稱 |
Mouse primary coronary artery endothelial cells |
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產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
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貨號 |
P-X1779 |
產(chǎn)品規(guī)格：>5×105細(xì)胞數(shù)
包裝規(guī)格：1ml凍存細(xì)胞懸液或T-25培養(yǎng)瓶
細(xì)胞介紹：
內(nèi)皮細(xì)胞層是血液和其它組織的天然屏障。內(nèi)皮細(xì)胞功能病變是造成動脈粥樣硬化的主要原因。內(nèi)皮細(xì)胞同時(shí)會合成和分泌凝血和纖維蛋白溶解系統(tǒng)的增強(qiáng)和抑制物，以及影響血小板粘附和聚集的媒介物。它們同時(shí)也會分泌控制細(xì)胞增殖的蛋白來維持血管壁的健康。
1)組織來源于實(shí)驗(yàn)動物正常的冠狀動脈組織。
我們推薦使用 Delf原代內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
人內(nèi)皮細(xì)胞會分泌 t-PA和PAI-1等抗血栓因子以及響應(yīng)TNF-α，繼而分泌細(xì)胞因子GM-CSF，表達(dá)ICAM-1表面抗體，產(chǎn)生大量的一氧化氮和endothelin。經(jīng)皮冠狀動脈腔內(nèi)成形術(shù)（PTCA）造成的內(nèi)皮細(xì)胞受損和功能破壞可能是導(dǎo)致術(shù)后動脈再狹窄的重要原因。
2)細(xì)胞鑒定：血管假性血友病因子（vWF）免yi熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)jun、酵母和真jun。
5)細(xì)胞生長方式：上皮樣，多角形細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
操作步驟如下：
1、剪切組織：先將所取得的組織，用D-Hanks或Hanks液清洗，以去除表面血污，并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后，用手術(shù)刀將組織切成若干小塊，移入青霉素小瓶或小燒杯中，加入適量緩沖液，用彎頭眼科剪，反復(fù)剪切組織，直到組織成糊狀，約1mm3大小。靜置片刻后，用吸管吸去上層液體，加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離：消化分離的目的是將細(xì)小的組織塊消化分離成細(xì)胞團(tuán)或分散的單個(gè)細(xì)胞，以利于進(jìn)一步的培養(yǎng)，常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng)：細(xì)胞懸液用計(jì)數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。用培養(yǎng)液將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為（2～5）×105 cells／ml，或?qū)嶒?yàn)所需密度，分裝于培養(yǎng)瓶中，使細(xì)胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi)，5％CO2，37℃靜置培養(yǎng)。一般3～5d，原代培養(yǎng)細(xì)胞可以黏附于瓶壁，并伸展開始生長，可補(bǔ)加原培養(yǎng)液量1／2的新培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)2～3d后換液，一般7～14d可以長滿瓶壁，進(jìn)行傳代。
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
注意事項(xiàng)：
1)原代培養(yǎng)的分離細(xì)胞在初次接觸體外環(huán)境時(shí)，雖然被分散成單個(gè)細(xì)胞，但它們之間的互相影響還是存在的， 而且這種影響對細(xì)胞能否存活是非常重要的。在這些細(xì)胞之間能產(chǎn)生一些促生長的活性物質(zhì)， 使細(xì)胞彼此互相促進(jìn)存活和生長。如果接種的細(xì)胞密度過低， 細(xì)胞之間的促生長作用很小， 雖然營養(yǎng)物質(zhì)很充足， 也很難使細(xì)胞適應(yīng)從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進(jìn)入獨(dú)立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細(xì)胞密度過大，會導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足， 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
2)原代培養(yǎng)時(shí)初始培養(yǎng)在組織分散和分離細(xì)胞時(shí)細(xì)胞可能會受到嚴(yán)重的損傷。適當(dāng)增大原代培養(yǎng)接種的細(xì)胞密度， 給培養(yǎng)的細(xì)胞提供更多的類似于在體內(nèi)時(shí)細(xì)胞之間的相互作用， 會極大提高原代培養(yǎng)的細(xì)胞在體外存活率。待細(xì)胞適應(yīng)體外環(huán)境后進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細(xì)胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破，分離細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大，在體外存活和生長的難度相應(yīng)增加。 對于貼壁依賴性細(xì)胞來說，盡快使接種的細(xì)胞貼壁，是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵?？梢栽诮臃N后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h，由于細(xì)胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液， 細(xì)胞即可以維持存活， 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁， 是細(xì)胞迅速黏附于底物，待細(xì)胞貼壁后，再補(bǔ)足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細(xì)胞培養(yǎng)法—懸浮型細(xì)胞培養(yǎng) 。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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人結(jié)腸間質(zhì)細(xì)胞 |
AAV-293 (人胚腎細(xì)胞) (STR鑒定正確) |
PMF1 Antibody Blocking Peptide |
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人膠質(zhì)瘤細(xì)胞TJ905 (STR鑒定正確) |
CaES-17 (人食管癌細(xì)胞) |
Recombinant IcHV-1 ORF53 protein |
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云南宣威肺腺癌細(xì)胞系XWLC-05 |
GNM (人口腔鱗癌頸淋ba結(jié)轉(zhuǎn)移癌細(xì)胞) |
PSMA6 Antibody Blocking Peptide |
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(小鼠心肌細(xì)胞)HL-1（種屬鑒定） |
HL-7702 [L-02; LO2] (人正常肝細(xì)胞) (Hela污染細(xì)胞系，暫不供應(yīng)) |
SC11A Antibody Blocking Peptide |
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人胰腺癌細(xì)胞PATU8988S (STR鑒定正確) |
KLE (人zi宮內(nèi)膜癌細(xì)胞) (STR鑒定正確) |
DNAJB11 Antibody Blocking Peptide |
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人乳腺癌細(xì)胞AU565(STR鑒定正確) |
NCI-H292 (人肺癌細(xì)胞(淋ba結(jié)轉(zhuǎn)移)) (STR鑒定正確) |
TNKS2 Antibody Blocking Peptide |
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人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞Hs 683(STR鑒定正確 |
SK-Hep-1 (人肝癌細(xì)胞) (STR鑒定正確) |
KANSL1 Antibody Blocking Peptide |
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小鼠黑色素瘤細(xì)胞B16-F1（種屬鑒定） |
U251 (人膠質(zhì)瘤細(xì)胞) (STR鑒定正確) |
E2F1 Antibody Blocking Peptide |
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人成骨肉瘤細(xì)胞MG-63(STR鑒定正確) |
SK-CO-1 (人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞) |
SYP Antibody Blocking Peptide |
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小鼠胰腺腺泡癌細(xì)胞266-6 |
NCI-H524 (人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) (STR鑒定正確) |
MFSD14B Antibody Blocking Peptide |
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人肝永生化細(xì)胞THLE-2(STR鑒定正確) |
C918 (人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞) (STR鑒定正確) |
CRYBA2 Antibody Blocking Peptide |
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人結(jié)腸腺癌細(xì)胞LS 180(STR鑒定正確) |
MDA-MB-435 (人乳腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞) (M14污染細(xì)胞系，暫不供應(yīng)) |
Pescadillo Antibody Blocking Peptide |
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人成骨肉瘤細(xì)胞Saos-2(STR鑒定正確) |
293ET (人胚腎細(xì)胞(SV40T和EBNA1基因修飾細(xì)胞)) |
DIP13B Antibody Blocking Peptide |
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人絨毛膜癌細(xì)胞JEG-3(STR鑒定正確) |
Hce-8693 (人盲腸腺癌細(xì)胞(未分化)) (STR鑒定正確) |
GALP Antibody Blocking Peptide |
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人咽頭癌胸水轉(zhuǎn)移細(xì)胞Detroit 562(STR鑒定正確) |
MDA-MB-175VII（人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞）（STR鑒定正確） |
小鼠冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞TIM4 Antibody Blocking Peptide |