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公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
產(chǎn)品名稱 |
小鼠腎間質(zhì)成纖維細(xì)胞 |
英文名稱 |
Primary mouse renal interstitial fibroblasts |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
貨號 |
P-X1846 |
產(chǎn)品規(guī)格:>5×105細(xì)胞數(shù)
包裝規(guī)格:1ml凍存細(xì)胞懸液或T-25培養(yǎng)瓶
細(xì)胞介紹:
腎間質(zhì)是指腎臟血管和腎小管間的區(qū)域,為疏松的結(jié)締組織構(gòu)成,由間質(zhì)細(xì)胞、網(wǎng)狀纖維、少量彈力纖維、成纖維細(xì)胞核巨噬細(xì)胞等組成。
1)組織來源于實驗動物的正常腎組織。
我們推薦使用 DELF 原代 成纖維 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
操作步驟如下:
視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
注意事項:
1)原代培養(yǎng)的分離細(xì)胞在初次接觸體外環(huán)境時,雖然被分散成單個細(xì)胞,但它們之間的互相影響還是存在的, 而且這種影響對細(xì)胞能否存活是非常重要的。在這些細(xì)胞之間能產(chǎn)生一些促生長的活性物質(zhì), 使細(xì)胞彼此互相促進(jìn)存活和生長。如果接種的細(xì)胞密度過低, 細(xì)胞之間的促生長作用很小, 雖然營養(yǎng)物質(zhì)很充足, 也很難使細(xì)胞適應(yīng)從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進(jìn)入獨立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細(xì)胞密度過大,會導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足, 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
2)細(xì)胞鑒定:波形蛋白(Vimentin)免yi熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)jun、酵母和真jun。
5)細(xì)胞生長方式:長梭形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
1、剪切組織:先將所取得的組織,用D-Hanks或Hanks液清洗,以去除表面血污,并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后,用手術(shù)刀將組織切成若干小塊,移入青霉素小瓶或小燒杯中,加入適量緩沖液,用彎頭眼科剪,反復(fù)剪切組織,直到組織成糊狀,約1mm3大小。靜置片刻后,用吸管吸去上層液體,加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離:消化分離的目的是將細(xì)小的組織塊消化分離成細(xì)胞團(tuán)或分散的單個細(xì)胞,以利于進(jìn)一步的培養(yǎng),常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng):細(xì)胞懸液用計數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。用培養(yǎng)液將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為(2~5)×105 cells/ml,或?qū)嶒炈杳芏?,分裝于培養(yǎng)瓶中,使細(xì)胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi),5%CO2,37℃靜置培養(yǎng)。一般3~5d,原代培養(yǎng)細(xì)胞可以黏附于瓶壁,并伸展開始生長,可補(bǔ)加原培養(yǎng)液量1/2的新培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)2~3d后換液,一般7~14d可以長滿瓶壁,進(jìn)行傳代。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
2)原代培養(yǎng)時初始培養(yǎng)在組織分散和分離細(xì)胞時細(xì)胞可能會受到嚴(yán)重的損傷。適當(dāng)增大原代培養(yǎng)接種的細(xì)胞密度, 給培養(yǎng)的細(xì)胞提供更多的類似于在體內(nèi)時細(xì)胞之間的相互作用, 會極大提高原代培養(yǎng)的細(xì)胞在體外存活率。待細(xì)胞適應(yīng)體外環(huán)境后進(jìn)行傳代培養(yǎng)時再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細(xì)胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破,分離細(xì)胞在體外培養(yǎng)時經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大,在體外存活和生長的難度相應(yīng)增加。 對于貼壁依賴性細(xì)胞來說,盡快使接種的細(xì)胞貼壁,是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵。可以在接種后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h,由于細(xì)胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液, 細(xì)胞即可以維持存活, 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁, 是細(xì)胞迅速黏附于底物,待細(xì)胞貼壁后,再補(bǔ)足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細(xì)胞培養(yǎng)法—懸浮型細(xì)胞培養(yǎng) 。
公司正在出售的產(chǎn)品:
A-204 [A204] (人橫紋肌肉瘤細(xì)胞) |
ST豬睪丸細(xì)胞 |
Recombinant mouse TLR4 protein |
L5178Y TK+/- clone小鼠淋ba瘤細(xì)胞 |
CFSC-2G鼠肝星形細(xì)胞 |
NR1D1 + NR1D2 Antibody Blocking Peptide |
Balb/3T3小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 |
ProPAK-A.6293包裝細(xì)胞 |
ECRG4/C2orf40 Antibody Blocking Peptide |
C127小鼠乳腺癌細(xì)胞 |
95-C低轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞 |
GPRIN3 Antibody Blocking Peptide |
RM小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞 |
HCE1宮頸癌細(xì)胞 |
ERC1 Antibody Blocking Peptide |
CA1A9小鼠雜交瘤細(xì)胞 |
HONE1鼻咽癌細(xì)胞 |
phospho-TBC1D4 (Ser588) Antibody Blocking Peptide |
Lu-139小細(xì)胞肺癌 |
P3HR1EBV陽性B淋ba瘤細(xì)胞 |
ZNF157 Antibody Blocking Peptide |
NCI-H2195 [H2195]小細(xì)胞肺癌 |
兔原代膀胱平滑肌細(xì)胞 |
HPV18 E4 Antibody Blocking Peptide |
RPMI 1846敘利亞倉鼠黑色素瘤細(xì)胞 |
兔原代DC細(xì)胞 |
IQCF5 Antibody Blocking Peptide |
PSN-1胰腺癌 |
兔原代腎動脈內(nèi)皮細(xì)胞 |
SUMO1 Antibody Blocking Peptide |
GAK陰鱗癌 |
兔原代牙髓干細(xì)胞 |
CLOCK Antibody Blocking Peptide |
COLO 205-Luc熒光素酶標(biāo)記的人結(jié)腸癌細(xì)胞 |
人原代口腔黏膜上皮細(xì)胞 |
INCA1 Antibody Blocking Peptide |
C1498-Luc熒光素酶標(biāo)記的小鼠白血病細(xì)胞 |
小鼠原代小腸粘膜上皮細(xì)胞 |
FGFBP1Antibody Blocking Peptide |
CADO-ES1尤文氏肉瘤 |
兔原代輸尿管上皮細(xì)胞 |
MITF Antibody Blocking Peptide |
RCM-1直腸癌 |
大鼠原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 |
小鼠腎間質(zhì)成纖維細(xì)胞DYDC1 Antibody Blocking Peptide |