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細(xì)胞介紹:
骨細(xì)胞是成熟骨組織中的主要細(xì)胞,相當(dāng)于人的成年期,由骨母細(xì)胞轉(zhuǎn)化而來(lái)。當(dāng)新骨基質(zhì)鈣化后,細(xì)胞被包埋在其中。此時(shí)細(xì)胞的合成活動(dòng)停止,胞漿減少,成為骨細(xì)胞。骨細(xì)胞能產(chǎn)生新的基質(zhì),改變晶體液,使骨組織鈣、磷沉積和釋放處于穩(wěn)定狀態(tài),以維持血鈣平衡。骨細(xì)胞對(duì)骨吸收和骨形成都起作用,是維持成熟骨新陳代謝的主要細(xì)胞。骨細(xì)胞夾在相鄰兩層骨板間或分散排列于骨板內(nèi)。相鄰骨細(xì)胞的突起之間有縫隙連接。
產(chǎn)品名稱 |
大鼠骨細(xì)胞 |
英文名稱 |
Rat bone cells |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
貨號(hào) |
P-X1646 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細(xì)胞特性:
1)組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常骨組織。
2)細(xì)胞鑒定:鈣結(jié)節(jié)Vonkossa化學(xué)染色。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)jun、酵母和真jun。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:橢圓形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
我們推薦使用 Delf 原代成骨 細(xì)胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
操作步驟如下:
1、剪切組織:先將所取得的組織,用D-Hanks或Hanks液清洗,以去除表面血污,并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后,用手術(shù)刀將組織切成若干小塊,移入青霉素小瓶或小燒杯中,加入適量緩沖液,用彎頭眼科剪,反復(fù)剪切組織,直到組織成糊狀,約1mm3大小。靜置片刻后,用吸管吸去上層液體,加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離:消化分離的目的是將細(xì)小的組織塊消化分離成細(xì)胞團(tuán)或分散的單個(gè)細(xì)胞,以利于進(jìn)一步的培養(yǎng),常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng):細(xì)胞懸液用計(jì)數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。用培養(yǎng)液將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為(2~5)×105 cells/ml,或?qū)嶒?yàn)所需密度,分裝于培養(yǎng)瓶中,使細(xì)胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi),5%CO2,37℃靜置培養(yǎng)。一般3~5d,原代培養(yǎng)細(xì)胞可以黏附于瓶壁,并伸展開(kāi)始生長(zhǎng),可補(bǔ)加原培養(yǎng)液量1/2的新培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)2~3d后換液,一般7~14d可以長(zhǎng)滿瓶壁,進(jìn)行傳代。
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
注意事項(xiàng):
1)原代培養(yǎng)的分離細(xì)胞在初次接觸體外環(huán)境時(shí),雖然被分散成單個(gè)細(xì)胞,但它們之間的互相影響還是存在的, 而且這種影響對(duì)細(xì)胞能否存活是非常重要的。在這些細(xì)胞之間能產(chǎn)生一些促生長(zhǎng)的活性物質(zhì), 使細(xì)胞彼此互相促進(jìn)存活和生長(zhǎng)。如果接種的細(xì)胞密度過(guò)低, 細(xì)胞之間的促生長(zhǎng)作用很小, 雖然營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)很充足, 也很難使細(xì)胞適應(yīng)從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進(jìn)入獨(dú)立生存環(huán)境的變化過(guò)程。 如果接種的細(xì)胞密度過(guò)大,會(huì)導(dǎo)致?tīng)I(yíng)養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足, 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
2)原代培養(yǎng)時(shí)初始培養(yǎng)在組織分散和分離細(xì)胞時(shí)細(xì)胞可能會(huì)受到嚴(yán)重的損傷。適當(dāng)增大原代培養(yǎng)接種的細(xì)胞密度, 給培養(yǎng)的細(xì)胞提供更多的類似于在體內(nèi)時(shí)細(xì)胞之間的相互作用, 會(huì)極大提高原代培養(yǎng)的細(xì)胞在體外存活率。待細(xì)胞適應(yīng)體外環(huán)境后進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細(xì)胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破,分離細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大,在體外存活和生長(zhǎng)的難度相應(yīng)增加。 對(duì)于貼壁依賴性細(xì)胞來(lái)說(shuō),盡快使接種的細(xì)胞貼壁,是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵??梢栽诮臃N后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h,由于細(xì)胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液, 細(xì)胞即可以維持存活, 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁, 是細(xì)胞迅速黏附于底物,待細(xì)胞貼壁后,再補(bǔ)足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細(xì)胞培養(yǎng)法—懸浮型細(xì)胞培養(yǎng) 。
公司正在出售的產(chǎn)品:
COR-L105非小細(xì)胞肺癌 |
HCC4006非小細(xì)胞肺癌 |
PCNP Antibody Blocking Peptide |
NK-92 MI人惡性非霍奇金淋ba瘤患者的自然殺傷細(xì)胞 |
LU99非小細(xì)胞肺癌 |
Tgfbr2 Antibody Blocking Peptide |
pc-9人肺癌細(xì)胞 |
NCI-H1651非小細(xì)胞肺癌 |
H5N6 Antibody Blocking Peptide |
SCC-25人口腔鱗癌細(xì)胞 |
NCI-H2106非小細(xì)胞肺癌 |
Bcl3 Antibody Blocking Peptide |
SK-NO-1人急性髓系白血病細(xì)胞 |
NCI-H661非小細(xì)胞肺癌 |
PQBP1 Antibody Blocking Peptide |
SW948人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 |
CV-1非洲綠猴腎細(xì)胞 |
GPR179 Antibody Blocking Peptide |
TU212人喉癌細(xì)胞 |
JHH-2肝癌 |
ERI3 Antibody Blocking Peptide |
ZR-75-1人乳腺癌細(xì)胞 |
R2C睪丸間質(zhì)細(xì)胞腺瘤 |
GRM2 Antibody Blocking Peptide |
ATN-1白血病 |
Nb2-11淋ba癌 |
TAS1R1 Antibody Blocking Peptide |
MOLT-4白血病 |
SDM昆蟲(chóng)細(xì)胞 |
MRPL21 Antibody Blocking Peptide |
CHO-K1倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞亞株 |
CHL-1黑素瘤 |
Nogo R Antibody Blocking Peptide |
IR983F大鼠骨髓瘤細(xì)胞 |
MMAc·SF黑素瘤 |
ZCCHC13 Antibody Blocking Peptide |
rRTEC大鼠腎小管上皮細(xì)胞 |
RabbitS1家兔皮膚成纖維細(xì)胞 |
ZFP95/ZKSCAN5 Antibody Blocking Peptide |
KHM-1B多發(fā)性骨髓瘤 |
COLO 201結(jié)腸癌 |
FGF-13 Antibody Blocking Peptide |
C831L非小細(xì)胞肺癌 |
KM12結(jié)腸癌 |
大鼠骨細(xì)胞FBXL15 Antibody Blocking Peptide |