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公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
產(chǎn)品名稱 |
大鼠滑膜成纖維細(xì)胞 |
英文名稱 |
Rat synovial fibroblasts cells |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
貨號 |
P-X1649 |
操作步驟如下:
細(xì)胞介紹:
1)細(xì)胞來源于實驗動物正常關(guān)節(jié)組織。
我們推薦使用 Delf 原代成纖維 細(xì)胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
注意事項:
1)原代培養(yǎng)的分離細(xì)胞在初次接觸體外環(huán)境時,雖然被分散成單個細(xì)胞,但它們之間的互相影響還是存在的, 而且這種影響對細(xì)胞能否存活是非常重要的。在這些細(xì)胞之間能產(chǎn)生一些促生長的活性物質(zhì), 使細(xì)胞彼此互相促進(jìn)存活和生長。如果接種的細(xì)胞密度過低, 細(xì)胞之間的促生長作用很小, 雖然營養(yǎng)物質(zhì)很充足, 也很難使細(xì)胞適應(yīng)從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進(jìn)入獨(dú)立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細(xì)胞密度過大,會導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足, 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
公司正在出售的產(chǎn)品:
1、剪切組織:先將所取得的組織,用D-Hanks或Hanks液清洗,以去除表面血污,并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后,用手術(shù)刀將組織切成若干小塊,移入青霉素小瓶或小燒杯中,加入適量緩沖液,用彎頭眼科剪,反復(fù)剪切組織,直到組織成糊狀,約1mm3大小。靜置片刻后,用吸管吸去上層液體,加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離:消化分離的目的是將細(xì)小的組織塊消化分離成細(xì)胞團(tuán)或分散的單個細(xì)胞,以利于進(jìn)一步的培養(yǎng),常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng):細(xì)胞懸液用計數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。用培養(yǎng)液將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為(2~5)×105 cells/ml,或?qū)嶒炈杳芏?,分裝于培養(yǎng)瓶中,使細(xì)胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi),5%CO2,37℃靜置培養(yǎng)。一般3~5d,原代培養(yǎng)細(xì)胞可以黏附于瓶壁,并伸展開始生長,可補(bǔ)加原培養(yǎng)液量1/2的新培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)2~3d后換液,一般7~14d可以長滿瓶壁,進(jìn)行傳代。
滑膜分泌滑液,在關(guān)節(jié)活動中起重要作用。正?;し譃閮蓪?,即薄的細(xì)胞層 (內(nèi)腔層)和血管層(內(nèi)膜下層),是血管豐富的關(guān)節(jié)囊內(nèi)膜,貼附于非關(guān)節(jié)面部分,覆蓋于關(guān)節(jié)囊內(nèi)的骨面上,不在軟骨面上,此部分稱為邊緣區(qū)或裸區(qū)。滑膜呈粉紅色,光滑發(fā)亮、濕而潤滑,有時可見絨毛,內(nèi)含膠原性纖維。
滑膜細(xì)胞有 A、B兩型。巨噬細(xì)胞樣A型細(xì)胞,表面有絲狀偽足、漿膜內(nèi)陷、囊泡、線粒體、溶酶體、胞漿纖維和高爾基體,具有吞噬功能;B型成纖維樣滑膜細(xì)胞(FLS) ,有高濃度的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結(jié)構(gòu),是介導(dǎo) RA 關(guān)節(jié)破壞的主要細(xì)胞。
2)細(xì)胞鑒定:波形蛋白(Vimentin)免yi熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)jun、酵母和真jun。
5)細(xì)胞生長方式:成纖維樣細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
2)原代培養(yǎng)時初始培養(yǎng)在組織分散和分離細(xì)胞時細(xì)胞可能會受到嚴(yán)重的損傷。適當(dāng)增大原代培養(yǎng)接種的細(xì)胞密度, 給培養(yǎng)的細(xì)胞提供更多的類似于在體內(nèi)時細(xì)胞之間的相互作用, 會極大提高原代培養(yǎng)的細(xì)胞在體外存活率。待細(xì)胞適應(yīng)體外環(huán)境后進(jìn)行傳代培養(yǎng)時再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細(xì)胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破,分離細(xì)胞在體外培養(yǎng)時經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大,在體外存活和生長的難度相應(yīng)增加。 對于貼壁依賴性細(xì)胞來說,盡快使接種的細(xì)胞貼壁,是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵??梢栽诮臃N后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h,由于細(xì)胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液, 細(xì)胞即可以維持存活, 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁, 是細(xì)胞迅速黏附于底物,待細(xì)胞貼壁后,再補(bǔ)足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細(xì)胞培養(yǎng)法—懸浮型細(xì)胞培養(yǎng) 。
G-292, clone A141B1骨肉瘤 |
貓腎細(xì)胞CRFK(種屬鑒定) |
SLC9A3R1 Antibody Blocking Peptide |
人腎癌細(xì)胞SW839(STR鑒定正確) |
小鼠樹突狀細(xì)胞DC2.4 (STR鑒定) |
LTA4H Antibody Blocking Peptide |
大鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞系OLN-93(種屬鑒定) |
人喉癌淋ba結(jié)轉(zhuǎn)移細(xì)胞LLN(STR鑒定正確) |
CHIA Antibody Blocking Peptide |
人急性淋ba母細(xì)胞白血病細(xì)胞MT-4(STR鑒定正確) |
人胚肺細(xì)胞 MRC-5(STR鑒定正確) |
GAL4 Antibody Blocking Peptide |
大鼠皮膚成纖維細(xì)胞 |
人腎上腺皮質(zhì)小細(xì)胞癌細(xì)胞SW-13(STR鑒定正確) |
ENDOD1 Antibody Blocking Peptide |
小鼠正常肝細(xì)胞NCTC1469(種屬鑒定) |
人舌磷癌細(xì)胞CAL33(STR鑒定正確) |
phospho-HMGCR(Ser872) Antibody Blocking Peptide |
人類鱗狀上皮舌癌細(xì)胞SCC-9 (STR鑒定正確) |
人咽鱗癌細(xì)胞FaDu(STR鑒定正確) |
ADSL Antibody Blocking Peptide |
豬鼻甲黏膜成纖維細(xì)胞PTK75(種屬鑒定) |
小鼠乳腺上皮細(xì)胞HC11(種屬鑒定) |
CCL23 Antibody Blocking Peptide |
人胃腺癌細(xì)胞(低分化)BGC-823(STR鑒定正確) |
人乳腺細(xì)胞MDA-kb2 (STR鑒定正確) |
phospho-SLP76 (Tyr113) Antibody Blocking Peptide |
人黑素瘤細(xì)胞WM-266-4(STR鑒定正確) |
豬內(nèi)皮細(xì)胞PED(種屬鑒定) |
Prss12 Antibody Blocking Peptide |
大鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞 |
人胰腺癌細(xì)胞HPAF-II(STR鑒定正確) |
phospho-GATA6 (Tyr271) Antibody Blocking Peptide |
小鼠急性骨髓性白血病帶熒光素酶C1498+LUC(種屬鑒定) |
人卵巢畸胎瘤細(xì)胞PA-1(STR鑒定正確) |
SFT2C Antibody Blocking Peptide |
人肺腺癌細(xì)胞LTEP-α-2(STR鑒定正確) |
人皮膚鱗癌細(xì)胞HSC-5(STR鑒定正確) |
BRD3 Antibody Blocking Peptide |
人胃癌順鉑耐藥株 AGS/DDP(STR鑒定正確) |
人微血管內(nèi)皮細(xì)胞株HMEC-1(STR鑒定正確) |
Recombinant human IGFBP6 protein, C-His (HEK293) |
昆蟲卵巢細(xì)胞Sf9(種屬鑒定) |
小鼠腎癌細(xì)胞帶熒光素酶Renca+LUC(種屬鑒定) |
大鼠滑膜成纖維細(xì)胞Phospho-NMDAR2A (Tyr1246) Antibody Blocking Peptide |