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細(xì)胞系建株要點
日期:2024-12-28 19:00
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摘要:
細(xì)胞系建株要點
腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)要點
腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)要點
取材
材料主要來源于外科手術(shù)或活檢瘤組織,取材時避免用壞死組織,要挑選瘤細(xì)胞集中和活力較好的部位,瘤性轉(zhuǎn)移**結(jié)或胸腹水是較好的培養(yǎng)材料。細(xì)胞系取材后盡快培養(yǎng),因故不能立即培養(yǎng)者,可凍存。其培養(yǎng)方法及凍存方法同前述正常組織。
成纖維細(xì)胞排除
在腫瘤組織中?;祀s有一些成纖維細(xì)胞,細(xì)胞系培養(yǎng)時能與瘤細(xì)胞同時生長,并常壓過癌細(xì)胞,導(dǎo)致癌細(xì)胞生長受阻以至消失,應(yīng)仔細(xì)排除。排除方法常有:機械刮除法、反復(fù)貼壁法、消化排除法、膠原酶消化法等。
提高腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)存活率和生長率
根據(jù)實驗經(jīng)驗,腫瘤細(xì)胞在體外不易培養(yǎng),建立能傳代的腫瘤細(xì)胞系更為困難。一般當(dāng)腫瘤組成或細(xì)胞被原代培養(yǎng)后,要經(jīng)過對新環(huán)境的適應(yīng)才能生長,因此不能局限于一般培養(yǎng)法,須采用一些特殊措施。如:用適宜底物,鼠尾膠原底層及飼細(xì)胞底層等。用細(xì)胞生長因子,根據(jù)細(xì)胞種類不同選用不同的促細(xì)胞生長因子,如胰島素、氫化可的松,雌**等。也可以考慮動物媒介培養(yǎng)。
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