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WB免 yi 雜交與顯色操作過(guò)程

日期:2024-12-28 03:32
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摘要: Western Blot(WB)免yi 雜交與顯色操作過(guò)程: 1.用25 ml TBS 洗膜5min,室溫,搖動(dòng)。 2.置膜于25 ml 封閉緩沖液中1h, 室溫,搖動(dòng)。 3.15ml TBS/T洗3次(5 min/T)。 4.加入合適稀釋度的一抗,室溫孵育1-2h或 4°C過(guò)夜,緩慢搖動(dòng)。 5.15 ml TBS/T洗3次(5 min/T)。 6.加入合適稀釋度的堿性磷酸酶(AP)或辣根過(guò)氧化酶(HRP)標(biāo)記的二抗,室溫孵育1h,緩慢搖動(dòng)。 7.15 ml TBS/T洗3次(5 min/T)。 8.15 ml TBS洗1次。 9.蛋白檢測(cè)(顯色法或發(fā)光...

Western Blot(WB)免yi 雜交與顯色操作過(guò)程:


1用25 ml TBS 洗膜5min,室溫,搖動(dòng)。

2置膜于25 ml 封閉緩沖液中1h, 室溫,搖動(dòng)。

315ml TBS/T洗3次(5 min/T)。

4加入合適稀釋度的一抗,室溫孵育1-2h或 4°C過(guò)夜,緩慢搖動(dòng)。

515 ml TBS/T洗3次(5 min/T)。

6加入合適稀釋度的堿性磷酸酶(AP)或辣根過(guò)氧化酶(HRP)標(biāo)記的二抗,室溫孵育1h,緩慢搖動(dòng)。

715 ml TBS/T洗3次(5 min/T)。

815 ml TBS洗1次。

9蛋白檢測(cè)(顯色法或發(fā)光法,按相應(yīng)試劑說(shuō)明操作)。