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ELISA實(shí)驗(yàn)標(biāo)本因素導(dǎo)致假陽性結(jié)果分析
日期:2024-12-28 03:52
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摘要:
ELISA實(shí)驗(yàn)標(biāo)本因素出現(xiàn)假陽性結(jié)果分析如下:
1、標(biāo)本處理不徹底
血液抽出后未完全凝固而離心分離血清不能使纖維蛋白原完全析出,加樣后板孔中形成纖維蛋白薄膜或絮狀物,造成洗板不徹底干凈,酶殘留在反應(yīng)孔中,使反應(yīng)孔吸光度值偏高,出現(xiàn)假陽性,待測(cè)血清中混有纖維蛋白原,這種物質(zhì)易沉淀或附著在聚yi烯孔內(nèi)不易洗凈,試驗(yàn)表明在較高的離心轉(zhuǎn)速(3000/min)和較長的離心時(shí)間(>10/min)之上,血液標(biāo)本被充分地離心分離后,使紅細(xì)胞和纖維蛋白充分沉淀,可以在加樣時(shí)避免加入這兩種干擾物質(zhì)對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的影響。
2、標(biāo)本...
ELISA實(shí)驗(yàn)標(biāo)本因素出現(xiàn)假陽性結(jié)果分析如下:
1、標(biāo)本處理不徹底
血液抽出后未完全凝固而離心分離血清不能使纖維蛋白原完全析出,加樣后板孔中形成纖維蛋白薄膜或絮狀物,造成洗板不徹底干凈,酶殘留在反應(yīng)孔中,使反應(yīng)孔吸光度值偏高,出現(xiàn)假陽性,待測(cè)血清中混有纖維蛋白原,這種物質(zhì)易沉淀或附著在聚yi烯孔內(nèi)不易洗凈,試驗(yàn)表明在較高的離心轉(zhuǎn)速(3000/min)和較長的離心時(shí)間(>10/min)之上,血液標(biāo)本被充分地離心分離后,使紅細(xì)胞和纖維蛋白充分沉淀,可以在加樣時(shí)避免加入這兩種干擾物質(zhì)對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的影響。2、標(biāo)本溶血
標(biāo)本溶血時(shí)細(xì)胞內(nèi)液的各種活性酶以及具有酶活性的物質(zhì)與底物非特異性結(jié)合,洗滌時(shí)不易洗去,催化底物產(chǎn)生一定的顯色反應(yīng),使本底吸光度值偏高形成假陽性。
3、細(xì) 菌污染
標(biāo)本放置、處置不當(dāng)被細(xì) 菌污染,一些細(xì) 菌體內(nèi)可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶會(huì)對(duì)相應(yīng)的酶做標(biāo)記的測(cè)定方法產(chǎn)生非特異性干擾,造成弱的假陽性反應(yīng)。