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挑選ELISA試劑盒技巧集合
挑選ELISA試劑盒技巧集合:
1、 查找待測樣本的蛋白濃度:能夠通過美國國立生物技術(shù)信息中心(NCBI)的文獻(xiàn),Universal Protein(uniprot)上給出的蛋白表達(dá)量參閱值來比較elisa試劑盒中給出的樣本值與報導(dǎo)值是否一致;
2、 試劑盒的使用種屬、檢測樣本的品種:除試劑盒特別說明外,一般不同種屬不能通用。常見待測樣本品種有:血清和血漿(不同抗凝劑),細(xì)胞上清,和細(xì)胞裂解液,試劑盒中不相同本的稀釋液不混用;
3 、試劑盒的檢測規(guī)模:也就是標(biāo)曲規(guī)模,特別要注意待測樣本濃度是否落在標(biāo)曲規(guī)模內(nèi),關(guān)于濃度很高的樣本,能夠先進(jìn)行預(yù)試驗摸索到比較好的稀釋倍數(shù)后再很多測定樣本。
4、 試劑盒中的稀釋線性及回收率:
a.稀釋線性一般指樣本稀釋線性,是將樣本梯度稀釋下來,看各稀釋梯度濃度是否成線性;參閱樣本稀釋線性能夠挑選樣本的*稀釋倍數(shù);
b.稀釋線性也有做加標(biāo)稀釋線性的狀況,加標(biāo)稀釋線性是將規(guī)范品加入樣本中測定加入的規(guī)范品濃度測定是否準(zhǔn)確;相同也是斷定待測樣本稀釋倍數(shù)的參閱目標(biāo)。一般線性和回收率的規(guī)模在80%-120%比較適宜;
5、 試劑盒的其它目標(biāo):
靈敏度:試劑盒能夠檢測到的樣本zui低濃度的才能,如果待檢目標(biāo)含量很低,需求挑選高靈敏度的ELISA試劑盒;
6、 試劑盒的有效期:試劑盒的有效期一般是半年,樣本準(zhǔn)備時間需求考慮到試劑盒的有效期。