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目的蛋白分子量三大內(nèi)參
日期:2024-12-29 09:38
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摘要:目的蛋白分子量三大內(nèi)參
beta Actin、beta Tubulin、GAPDH 的分子量分別是 42kd,50kd,37kd,目的蛋白分子量zui好能與內(nèi)參蛋白分子量相差 5kd 以上,才能分開目的蛋白和內(nèi)參。
三大內(nèi)參:
1、beta Actin,肌動蛋白,細胞骨架蛋白。它們在各組織和細胞中的表達相對恒定,在檢測蛋白的表達水平變化時常用它來做參照物。beta Actin 作為內(nèi)參是得到公認的,針對大多數(shù)組織和細胞來說的,它廣泛分布于細胞質(zhì)內(nèi),表達量非常豐富。但是在一些少量特殊的情況下比如脂肪組織和細胞內(nèi),beta Actin 的表達量就很少。
2、GAPDH,甘油醛-3-磷酸脫氫酶,該酶是糖酵解反應(yīng)中的一個酶,幾乎在所有組織細胞中都高水平表達,在同種細胞或組織中的表達量一般是恒定的,且很少受外部誘導(dǎo)物的影響。但比如缺氧和糖尿病等ji病存在下,會增加 GAPDH 在特定細胞和組織中的表達。
3、beta Tubulin,微管蛋白,細胞骨架蛋白。作為內(nèi)參抗體,beta Tubulin 表達通常不會發(fā)生改變,因此被廣泛用于 Western Blot 內(nèi)參,也常被用于免yi染色觀察細胞的微管結(jié)構(gòu)。