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ELISA測定溫育設(shè)置
日期：2024-12-28 03:43
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摘要：
溫育這一步是ELISA測定中zui容易出現(xiàn)問題的步驟。目前國內(nèi)ELISA試劑盒的反應(yīng)溫育時(shí)間為37℃ 30分鐘-1小時(shí)，進(jìn)口ELISA試劑盒則通常為37℃ 1-2小時(shí)才能有較完全的結(jié)合，低于1小時(shí)，可能會影響測定下限。溫育所需時(shí)間與溫度成反比，即溫度越高，則所需時(shí)間相對較短。溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃（冰箱溫度）等。37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的保溫溫度，也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。在建立ELISA方法作反應(yīng)動力學(xué)研究時(shí)，兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1-2小時(shí)，產(chǎn)物的**可達(dá)頂峰。為加速反應(yīng)，可提高反應(yīng)的溫度，有些試驗(yàn)在4...
溫育這一步是ELISA測定中zui容易出現(xiàn)問題的步驟。目前國內(nèi)ELISA試劑盒的反應(yīng)溫育時(shí)間為37℃ 30分鐘-1小時(shí)，進(jìn)口ELISA試劑盒則通常為37℃ 1-2小時(shí)才能有較完全的結(jié)合，低于1小時(shí)，可能會影響測定下限。溫育所需時(shí)間與溫度成反比，即溫度越高，則所需時(shí)間相對較短。溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃（冰箱溫度）等。37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的保溫溫度，也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。在建立ELISA方法作反應(yīng)動力學(xué)研究時(shí)，兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1-2小時(shí)，產(chǎn)物的**可達(dá)頂峰。為加速反應(yīng)，可提高反應(yīng)的溫度，有些試驗(yàn)在43℃進(jìn)行，但不宜采用更高的溫度?？乖贵w反應(yīng)4℃更為徹底，在放射免yi測定中多使反應(yīng)在冰箱中過夜，以形成zui多的沉淀。但因所需時(shí)間太長，在ELISA中一般不予采用。