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優(yōu)點如下:
1、操作簡便:單試劑操作,全程約15分鐘,可測50例左右樣本。
2、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效,呈色穩(wěn)定好.
3、再現(xiàn)性好:批內(nèi)CV=2.3%,批間CV=5.34%。
4、回收試驗: X =103%。
5、受外界影響因素小:干擾因素少,重復性強。
產(chǎn)品名稱 |
檸檬酸合成酶(CS)活性測試盒 |
規(guī)格 |
20T |
貨號 |
BH-S63362 |
取用規(guī)則:
固體粉末試劑可用潔凈的牛角勺取用。要取一定量的固體時,可把固體放在紙上或表面皿上在臺秤上稱量。要準確稱量時,則用稱量瓶在天平上進行稱量。液體試劑常用量筒量取,量筒的容量為:5mL、10mL、50mL、500mL等數(shù)種,使用時要把量取的液體注入量筒中,使視線與量筒內(nèi)液體凹面的zui低處保持水平,然后讀出量筒上的刻度,即得液體的體積。
如需少量液體試劑則可用滴管取用,取用時應注意不要將滴管碰到或插入接收容器的壁上或里面。
為了達到準確的實驗結果,取用試劑時應遵守以下規(guī)則,以保證試劑不受污染和不變質(zhì):
(1)試劑不能與手接觸。
(2)要用潔凈的藥勺,量筒或滴管取用試劑,不準用同一種工具同時連續(xù)取用多種試劑。取完一種試劑后,應將工具洗凈(藥勺要擦干)后,方可取用另一種試劑。
(3)試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊,不可放錯瓶蓋和滴管,絕不允許張冠李戴,用完后將瓶放回原處。
(4)已取出的試劑不能再放回原試劑瓶內(nèi)。
另外取用試劑時應本著節(jié)約精神,盡可能少用,這樣既便于操作和仔細觀察現(xiàn)象,又能得到較好的實驗結果。
樣品測定的準備:
1、細胞、或組織樣品的制備 :
或細胞:先收集或細胞到離心管內(nèi),棄上清;按照每100萬或細胞加入1mL提取液,超聲波破碎或細胞(功率20%,超聲3秒,間隔10秒,重復30次),之后置沸水浴振蕩提取10min;10000g,常溫離心10min,取上清,冷卻后待測。
組織:稱取約0.1g組織,加入1mL提取液進行冰浴勻漿;之后置沸水浴振蕩提取10min,10000g,常溫離心10min,取上清,冷卻后待測。
2、血清(漿)樣品:取100μL血清(漿)加入1mL提取液,充分混勻,之后置沸水浴振蕩提取10分鐘,10000g,常溫離心10分鐘,取上清,冷卻后待測。
3、標準品的處理:稱取1mg,將標準品稀釋為15、10、8、6、4、2、1、0 μg/ml。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
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