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下列是公司產(chǎn)品ELISA試劑盒的詳細(xì)說明書:
中文名稱:EXO1人核酸外切酶1進(jìn)口檢測試劑盒
英文簡稱:Human Exonuclease 1(EXO1)ELISA Kit
產(chǎn)品貨號:PH101742
規(guī)格:96T/48T
適用范圍:僅供科研使用
保存及有效期:2-8℃保存,6個月,-20℃一年
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān),我司嚴(yán)格按照國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn),已獲得國家承認(rèn)的“三證”,每一個產(chǎn)品都有對應(yīng)的生產(chǎn)批號,只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必?fù)?dān)心會有過期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準(zhǔn)備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30
min后,再進(jìn)行測定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度,以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素:包括類風(fēng)濕因子、補體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類風(fēng)濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測抗原時,可用2-巰基乙醇加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解。
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品 100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37 ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測 吸光值。
使用方法:
測定法的靈敏度來自作為報告的酶。眾所周知,酶是一種有機(jī)催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 24μg/ml 5號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
重樓皂苷I(標(biāo)準(zhǔn)品)Polyphyllin I質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠組織蛋白去乙酰化酶2(Hdac2/Yy1bp)ELISA試劑盒 ,英文名: Hdac2/Yy1bp ELISA Kit 組織氧化型谷胱甘肽(GSSG)濃度比色法定量檢測試劑盒50
芝麻林素(標(biāo)準(zhǔn)品)Sesamolin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠凝血酶受體()ELISA檢測試劑盒Mousethrombieceptor,ELISAKit
96T/48T Humanhemeoxygenase2,HO-2ELISAKit人血紅素氧合酶2(HO-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
芝麻素Sesamin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,BR 人抗補體1q抗體(ai-C1q-aibody)試劑盒 Human ai-C1q-aibody ELISA Kit 人血管緊張素原(aGT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
芝麻素(標(biāo)準(zhǔn)品)Sesamin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 RabbitTissuefactorpathwayinhibitor,TFPIELISAKit兔組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 豬神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)試劑盒 Pig Neuron-specific enolase,NSE
ELISA Kit
托吡酯Topiramate質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 小鼠載脂蛋白E(APOE)ELISA試劑盒 ,英文名: APOE ELISA Kit ELISAKitANG-R-Tie2豬血管**素受體Tie2規(guī)格:48T/96T
鹽酸地芬尼多雜質(zhì)(烯化合物)(標(biāo)準(zhǔn)品)Alkene質(zhì)量規(guī)格:供檢查用 猴腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA檢測試劑盒MonkeyTumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKIT 96T/48T
HumanE-SelectinELISAKit人E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
N-甲基帕羅西?。?biāo)準(zhǔn)品)N-Methylparoxetine質(zhì)量規(guī)格:供檢查用 犬窖蛋白Caveolin-1(CAV1)試劑盒 Dog Caveolin-1,CAV1 ELISA
kit 人脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
七氟烷(標(biāo)準(zhǔn)品)Sevoflurane質(zhì)量規(guī)格:供GC法檢查用 英文名稱Humanhemeoxygenase-2ELISAKit人血紅素氧合酶2(HO-2)規(guī)格:96T/48T 豬腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)試劑盒 Pig iestinal fatty acid binding
protein,iFABP ELISA Kit
美羅培南碳酸鈉質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Meropenem with carbonate
Humandeubiquitinatingenzyme,DUBELISA試劑盒人泛素分解酶(DUB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 大鼠視黃醇結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
N-氧基曲唑酮質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Trazodone N-Oxide 組織MET激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20 人糖原1酸化酶同工酶MM(GP-MM)試劑盒 Human Glycogen
phosphorylase MM,GP-MM ELISA Kit
4'-羥基鹽酸曲唑酮質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口4'-Hydroxy Trazodone
HCl HumanPhospholipidaseA2,PL-A2ELISAKit人1脂酶A2(PL-A2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T NADPH-細(xì)胞色素C還原酶(NCR)測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
鹽酸伐倫克林標(biāo)記15N3質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Varenicline Labeled 15N3
兔子神經(jīng)生長因子(NGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 RatsubstancePreceptor,SP-RELISA試劑盒大鼠P物質(zhì)受體(SP-R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
EXO1人核酸外切酶1進(jìn)口檢測試劑盒ELISA 試驗時,注意事項如下:
1. 正式試驗時,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進(jìn)行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要**價廉、**、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。