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操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
產品名稱 |
英文名稱 |
貨號 |
EFNA1人肝配蛋白A1進口檢測試劑盒 |
Human Ephrin A1(EFNA1)ELISA Kit |
PH101990 |
優(yōu)勢特點:產品僅用于科研
1.高效、靈敏、特異的抗體;
2.穩(wěn)定的重復性和可靠性;
3.吸附性能好,空白值低,孔低透明度高的固相載體;
4.使用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)液、尿液、唾液等等多種標本類型;
5.節(jié)省實驗經費。
組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標準品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標準濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內配制。
如配制50 ng/ml標準品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制(100ul/孔),實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制。
7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
乙酸-1-萘酯(>98%,BR)質量規(guī)格:>98%,BR1-Naphthyl acetate 英文名稱MouseCCL26ELISAKit小鼠CCL26規(guī)格:96T/48T 大鼠脂蛋脂酶A2(Lp-PLA2)ELISA試劑盒 ,英文名: Lp-PLA2 ELISA Kit
二十八烷醇(>98%,BR)質量規(guī)格:>98%,BR1-Octacosanol 冰凍切片組織衰老特異性β-半乳糖苷酶原位染色試劑盒50 人抗皮膚抗體(ASA)ELISA檢測試劑盒HumanAi-SkinAibody,ASAELISAKit 96T/48T
1-苯基-5-巰基四氮唑(>98.5%,BR)質量規(guī)格:>98.5%,BR1-Phenyl-1H-tetrazole-5-thiol RatEotaxin1ELISA試劑盒大鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 大鼠白細胞抗原DR(HLA-DR)試劑盒 Rat leukocyte aigen-DR,HLA-DR ELISA kit
新戊二醇(>98%,BR)質量規(guī)格:>98%,BR2,2-Dimethyl-1,3-propanediol 小鼠白介素1β (IL-1β)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 CLIAKitfoie-2ELISAKit大鼠含球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪氨酸激酶2規(guī)格:48T/96T
四丁基化銨(離子對色譜級)Tetrabutylammonium iodide質量規(guī)格:離子對色譜級 小鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒 ,英文名: OxLDL ELISA Kit ELISAKitGHRH羊促生長釋放規(guī)格:48T/96T
三辛胺(離子對試劑)Trioctylamine質量規(guī)格:離子對試劑 小鼠己糖激酶(HK)ELISA檢測試劑盒MouseHexokinase,HKELISAKit 96T/48T Humanc-sisELISAKit人c-sisELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
草酸鈉容量分析用溶液標準物質(0.05M) oxalate solution質量規(guī)格:0.05M 人集蛋白亞家族成員11(COLEC11)試劑盒 human collectin sub-family member 11,COLEC11 ELISA Kit 人神經肽Y(NP-Y)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
剛果紅(分析標準品,≥97.0%(HPLC))Congo red質量規(guī)格:分析標準品,≥97.0%(HPLC) RatBone-specificAlkphaseB,ALP-BELISAKit大鼠骨特異性堿性1酸酶B(ALP-B)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 小鼠游離脂肪酸(FFA)試劑盒 Mouse free fatty acids,FFA ELISA Kit
硫酸鈰八水(>97%,BR)質量規(guī)格:>97%,BRCerium(III)
sulfate, octahydrate 英文名稱RatC5aELISAKit大鼠補體片斷C5a(C5a)規(guī)格:96T/48T 大鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體4(AIL-R4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Br-Mmc (=4-溴甲基-7-甲氧基)(>98.0%(T))質量規(guī)格:>98.0%(T)Br-Mmc (=4-Bromomethyl-7-methoxycoumarin) 酒類氨熒光定量檢測試劑盒20 人血管**素4(ANG-4)試劑盒 Human Angiopoietin 4 ELISA Kit
3-溴甲基-7-甲氧基-1,4-苯并惡嗪-2-酮(>98.0%(T))質量規(guī)格:>98.0%(T)3-Bromomethyl-7-methoxy-1,4-benzoxazin-2-one ELISAKitBRCA-1人癌易感蛋白1規(guī)格:48T/96T 人抗肝可溶性抗原抗體(SLA)ELISA試劑盒 ,英文名: SLA ELISA Kit
4-溴甲基-6,7-二甲氧基(>98.0%(HPLC))質量規(guī)格:>98.0%(HPLC)4-Bromomethyl-6,7-dimethoxycoumarin 小鼠白介素3(IL-3)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-3 ELISA Kit RatIerleukin1β,IL-1βELISA試劑盒大鼠白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
注意事項:
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3. 各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5 分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD 值大于標準品孔孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n 倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物請避光保存。
7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號組分不得混用。
EFNA1人肝配蛋白A1進口檢測試劑盒服務:
我們可以根據您的應用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。