試劑和樣本的控制方法：
一、試劑
1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關，我司嚴格按照國家標準進行生產，已獲得國家承認的“三證”，每一個產品都有對應的生產批號，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產品，不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。
2.試劑的準備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后，再進行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應微孔內的溫度較快地達到所需的溫度，以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內源性干擾因素：包括類風濕因子、補體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；
類風濕因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG；
②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；
③檢測抗原時，可用2-巰基乙醇加入到標本稀釋液中使RF降解。

下列是公司產品ELISA試劑盒的詳細說明書：
中文名稱：PKCγ人蛋白激酶Cγ免費代測試劑盒
英文簡稱：Human Protein Kinase C Gamma(PKCg)ELISA Kit
產品貨號：PH102399
規(guī)格：96T/48T
適用范圍：僅供科研使用
保存及有效期：2-8℃保存，6個月，-20℃一年

使用方法：
測定法的靈敏度來自作為報告的酶。眾所周知，酶是一種有機催化劑，很少量的酶即可誘導大量的催化反應，產生可供觀察的顯色反應現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。   24μg/ml    5號標準品    150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
 12μg/ml    4號標準品    150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
 6μg/ml     3號標準品    150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
 3μg/ml     2號標準品    150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
 1.5μg/ml   1號標準品    150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2. 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。|
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
ELISA 試驗時，注意事項如下： 
     1. 正式試驗時，應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件，待檢樣品應作一式二份，以保證實驗結果的準確性。有時本底較高，說明有非特異性反應，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。 
     2. 在ELISA中，進行各項實驗條件的選擇是很重要的，其中包括: 
     （1） 固相載體的選擇：許多物質可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應，觀察其顯色反應是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。 
     （2） 包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時。蛋白質包被的zui適濃度需進行滴定：即用不同的蛋白質濃度（0.1、1.0和10μg／ml等）進行包被后，在其它試驗條件相同時，觀察陽性標本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質來說通常為1～10μg／ml。 
     （3） 酶標記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定（見酶標記抗體部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。 
     （4） 酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要**價廉、**、有明顯地顯色反應，而本身無色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后，應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入 。

延胡索甲素（標準品）Corydaline質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品  小鼠球蛋白E(IgE)ELISA檢測試劑盒MouseImmunoglobulinE,IgEELISAKit 96T/48T  ELISAKitAβ1-42小鼠β淀粉樣蛋白1-42規(guī)格：48T/96T

脫氫紫堇堿;去氫紫堇堿（標準品）Dehydrocorydaline質量規(guī)格：HPLC≥97%，標準品  人富亮氨酸α2糖蛋白1(LRG1)試劑盒 Human leucine-rich alpha-2 glycoprotein 1,LRG1 ELISA Kit  Duckcarbonicanhydrase,CAELISAKit鴨子酶(CA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小檗紅堿（標準品）Berberrubine質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品  RatIerleukin2,IL-2ELISAKit大鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  人堿性成纖維細胞生長因子6(bFGF-6)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

反式丁烯醛(standard for GC)(E)-2-Butenal質量規(guī)格：standard for GC  CASPASE-9蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25  小鼠高靈敏度促甲狀腺(U-TSH)試劑盒 Mouse ulasensitive thyroid-stimulating hormone,U-TSH ELISA Kit
曲美替尼Trametinib (GSK1120212)質量規(guī)格：>99%,MEK抑制劑  Mousemucin-5subtypeB,MUC5BELISA試劑盒小鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  血漿激肽釋放酶(KLKB1)ELISA試劑盒 ，英文名： KLKB1 ELISA Kit

對氨基水楊酸異煙（標準品）Pasiniazid質量規(guī)格：UV法溶出度檢查  小鼠皮質酮/腎上腺酮(CO)ELISA試劑盒 ，英文名： CO ELISA Kit  MouseCTX-2ELISA試劑盒小鼠骨退化特異標志物(CTX-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

曲匹布通（標準品）Trepibutone質量規(guī)格：UV法含量測定  小鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA檢測試劑盒MousesolubleP-selectin,sP-selectinELISAKit 96T/48T  ELISAKitBid小鼠BH3結構域凋亡誘導蛋白規(guī)格：48T/96T

曲匹地爾（標準品）Trapidil質量規(guī)格：供鑒別用  人肺炎支原體抗體(MP-Ab)試劑盒 Human Mycoplasma pneumoniae aibody,MP-Ab ELISA Kit  ChickenLeukemiainhibitoryfactor,LIFELISAKit雞白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
結晶紫內酯(>95.0%(HPLC)(T))質量規(guī)格：>95.0%(HPLC)(T)Crystal Violet Lactone  Ratadrenomedullin,ADMELISA試劑盒大鼠腎上腺髓質素(ADM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  植物原測試盒 可見分光光度法 50管/24樣

6'-(二乙氨基)-1',3'-二甲基熒烷(>98.0%(HPLC)(T))質量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)6'-(Diethylamino)-1',3'-dimethylfluoran  小鼠S100B蛋白(S100B)ELISA試劑盒 ，英文名： S100B ELISA Kit  RatneuropeptideY,NP-YELISA試劑盒大鼠神經肽Y(NP-Y)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

三丁基化锍(>96.0%(T))質量規(guī)格：>96.0%(T)Tributylsulfonium Iodide  大鼠球蛋白A(IgA)ELISA檢測試劑盒RatImmunoglobulinA,IgAELISAKit 96T/48T  HumanHighdensitylipoprotein,HDLELISA試劑盒人高密度脂蛋白(HDL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

螺[1,3,3-基吲哚苯并二氫吡喃][光致變色化合物](>98.0%(HPLC)(T))質量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)1,3,3-Trimethylindolinobenzopyrylospiran [Photochromic Compound]  人GDP解離抑制因子2(GdI2)試劑盒 Human GdI2 ELISA kit  HumanLysozyme，LZMELISAKit人溶菌酶(LZM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

PKCγ人蛋白激酶Cγ免費代測試劑盒檢測程序：
1.  加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2.  洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。
3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6.  洗板：同前。
7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗處反應15 分鐘。
8.  每孔加入100ul 終止液混勻。
9.  30分鐘內用酶標儀在 45 0 nm 處測 吸光值。