檢測程序：
1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向?yàn)V紙上印干。
3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6.  洗板：同前。
7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。
8.  每孔加入100ul 終止液混勻。
9.  30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測 吸光值。

下列是公司產(chǎn)品ELISA試劑盒的詳細(xì)說明書：
中文名稱：MPHOSPH8人M-期磷蛋白8elisa試劑盒說明書
英文簡稱：Human M-Phase Phosphoprotein 8(MPHOSPH8)ELISA Kit
產(chǎn)品貨號：PH103184
規(guī)格：96T/48T
適用范圍：僅供科研使用
保存及有效期：2-8℃保存，6個(gè)月，-20℃一年

試劑和樣本的控制方法：
一、試劑
1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān)，我司嚴(yán)格按照國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn)，已獲得國家承認(rèn)的“三證”，每一個(gè)產(chǎn)品都有對應(yīng)的生產(chǎn)批號，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必?fù)?dān)心會有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。
2.試劑的準(zhǔn)備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后，再進(jìn)行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度，以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；
類風(fēng)濕因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG；
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；
③檢測抗原時(shí)，可用2-巰基乙醇加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解。

使用方法：
測定法的靈敏度來自作為報(bào)告的酶。眾所周知，酶是一種有機(jī)催化劑，很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng)，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。   24μg/ml    5號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 12μg/ml    4號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 6μg/ml     3號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 3μg/ml     2號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 1.5μg/ml   1號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
ELISA 試驗(yàn)時(shí)，注意事項(xiàng)如下： 
     1. 正式試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗(yàn)條件，待檢樣品應(yīng)作一式二份，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高，說明有非特異性反應(yīng)，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。 
     2. 在ELISA中，進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的，其中包括: 
     （1） 固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選：用等量抗原包被，在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。 
     （2） 包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時(shí)，要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度（0.1、1.0和10μg／ml等）進(jìn)行包被后，在其它試驗(yàn)條件相同時(shí)，觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg／ml。 
     （3） 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定（見酶標(biāo)記抗體部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。 
     （4） 酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要**價(jià)廉、**、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后，應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入 。

甲地孕酮(標(biāo)準(zhǔn)品)  Megestrol base  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA檢測試劑盒RatAi-ypsin,ATELISAKit 96T/48T

3-縮酮  Estradiene dione-3-keta  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 大鼠抗胰蛋白酶(AT)試劑盒 Rat Ai-ypsin,AT ELISA Kit

索拉非尼  Sorafenib base  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 大鼠抗增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)抗體試劑盒 Rat proliferating cell nuclear aigen(PCNA)aibody ELISA kit

二組胺；組胺  Histamine phosphate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP,BR 大鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)ELISA檢測試劑盒Ratproliferatingcellnuclearaigenaibody,PCNAELISAKit 96T/48T

氯喹,氯喹二鹽  Chloroquine diphosphate  質(zhì)量規(guī)格：>98% 大鼠抗中性粒/中心體抗體(ACA)ELISA檢測試劑盒Ratai-cenolandcenosomeaibody,ACAELISAKit 96T/48T

(-)-莨菪堿,L-天仙子胺，L-天仙子堿  (-)-Hyoscyamine  質(zhì)量規(guī)格：>99% 大鼠抗中性粒/中心體抗體(ACA)試劑盒 Rat ai-cenol and cenosome aibody,ACA ELISA Kit

(-)-莨菪堿,L-天仙子胺，澳洲茄堿(標(biāo)準(zhǔn)品)  (-)-Hyoscyamine  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)ELISA檢測試劑盒RatPerinuclearai-neuophilcytoplasmicaibody,pANCAELISAKit 96T/48T

葡聚糖D70/右旋糖苷  Dextran D70  質(zhì)量規(guī)格：Mw:63000~77000,USP32 大鼠抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)試劑盒 Rat Perinuclear ai-neuophil cytoplasmic aibody,pANCA ELISA Kit

右旋糖苷/葡聚糖D40  Dextran D40  質(zhì)量規(guī)格：Mw35 000 to 45 000 大鼠抗**內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISA檢測試劑盒RatEndomeiumAibody,EMAbELISAKit 96T/48T

葡聚糖D20/右旋糖苷  Dextran D20  質(zhì)量規(guī)格：MW:16000~24000 大鼠顆粒酶A(Gzms-A)ELISA檢測試劑盒RatgranzymesA,Gzms-AELISAKit 96T/48T
TACSTD2 Others Human 人 OP2 / TACSTD2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 漆黃素Fisetin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95%,BR

山羊皮膚成纖維樣細(xì)胞;DG-S1漆黃素（標(biāo)準(zhǔn)品）Fisetin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

PDCD1LG2 Others Mouse 小鼠 B7-DC / PD-L2 / CD273 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 奇任醇(標(biāo)準(zhǔn)品)Kirenol質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

HuTu-80 人十二指腸腺癌細(xì)胞千層紙素A(標(biāo)準(zhǔn)品)Oroxylin A質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

WERI-Rb-1人視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞 WERI-Rb-1 human retinal glial cell RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS千金子二萜醇二乙酰苯甲酰酯（標(biāo)準(zhǔn)品）5,15-Diacetyl-3-benzoyllathyrol質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體-3(VEGFR-3)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Methyl chlorogenate  中文名：綠原酸甲酯  分子式：C17H20O9 

小鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體2(VEGFR-2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Methyl chlorogenate  29708-87-0  中文名：綠原酸甲酯  分子式：C17H20O9  度：98.0%  關(guān)鍵詞：  莽草酸; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

MPHOSPH8人M-期磷蛋白8elisa試劑盒說明書小鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Estradiol-3-benzoate-17-butyrate  中文名：雌二醇-3-苯甲酸-17-丁酸酯  分子式：C29H34O4 

小鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體1(VEGFR-1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Methyl chlorogenate  29708-87-0  中文名：綠原酸甲酯  分子式：C17H20O9 

小鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體1(mouse VEGF-R1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝     Methyl 4'-bromomethyl biphenyl-2-carboxylate  114772-38-2  中文名：  分子式：C15H13BrO2