試劑和樣本的控制方法：
一、試劑
1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關(guān)，我司嚴格按照國家標準進行生產(chǎn)，已獲得國家承認的“三證”，每一個產(chǎn)品都有對應的生產(chǎn)批號，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。
2.試劑的準備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后，再進行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應微孔內(nèi)的溫度較快地達到所需的溫度，以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風濕因子、補體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；
類風濕因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG；
②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；
③檢測抗原時，可用2-巰基乙醇加入到標本稀釋液中使RF降解。

下列是公司產(chǎn)品ELISA試劑盒的詳細說明書：
中文名稱：MPHOSPH6人M-期磷蛋白6特價elisa試劑盒
英文簡稱：Human M-Phase Phosphoprotein 6(MPHOSPH6)ELISA Kit
產(chǎn)品貨號：PH103185
規(guī)格：96T/48T
適用范圍：僅供科研使用
保存及有效期：2-8℃保存，6個月，-20℃一年

使用方法：
測定法的靈敏度來自作為報告的酶。眾所周知，酶是一種有機催化劑，很少量的酶即可誘導大量的催化反應，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。   24μg/ml    5號標準品    150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
 12μg/ml    4號標準品    150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
 6μg/ml     3號標準品    150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
 3μg/ml     2號標準品    150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
 1.5μg/ml   1號標準品    150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2. 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。|
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
ELISA 試驗時，注意事項如下： 
     1. 正式試驗時，應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件，待檢樣品應作一式二份，以保證實驗結(jié)果的準確性。有時本底較高，說明有非特異性反應，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。 
     2. 在ELISA中，進行各項實驗條件的選擇是很重要的，其中包括: 
     （1） 固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應，觀察其顯色反應是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。 
     （2） 包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度（0.1、1.0和10μg／ml等）進行包被后，在其它試驗條件相同時，觀察陽性標本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg／ml。 
     （3） 酶標記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定（見酶標記抗體部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。 
     （4） 酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要**價廉、**、有明顯地顯色反應，而本身無色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后，應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入 。

甲鈷胺  Mecobalamin  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 人胸腺五肽(TP-5)ELISA檢測試劑盒Humahymopein,TP-5ELISAKit 96T/48T

右旋酮洛芬氨丁三醇  (S)-Ketoprofen trometamol  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR 人胸腺依賴性抗原(TD-Ag)ELISA檢測試劑盒Humahymus-dependeaigen,TD-AgELISAKit 96T/48T

右旋酮洛芬氨丁三醇(標準品)  (S)-Ketoprofen trometamol  質(zhì)量規(guī)格：含量測定 人脫氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA檢測試劑盒HumanBromodeoxyuridine,BrdUELISAKit 96T/48T

植物凝膠(Sigma)  Phytagel  質(zhì)量規(guī)格：進分;SigmaP8169 人血管活性腸肽(VIP)ELISA檢測試劑盒HumanVasoactiveIestinalPeptide,VIPELISAKit 96T/48T

右旋酮洛芬  (S)-(+)-Ketoprofen  質(zhì)量規(guī)格：>98.5% 人血管緊張肽酶(Angiotensinase)ELISA檢測試劑盒HumanAngiotensinaseELISAKit 96T/48T

5-磺基水楊酸  sulfosalicyclic acid  質(zhì)量規(guī)格：AR 人血紅蛋白(HbCO)ELISA檢測試劑盒Humancarboxyhemoglobin,HbCOELISAKit 96T/48T

1-氨基-2-萘酚-4-磺酸  1-Amino-2-naphthol-4-sulfonic Acid   質(zhì)量規(guī)格：AR 人血紅蛋白C(HbC)ELISA檢測試劑盒HumanHemoglobinC,HbCELISAKit 96T/48T

利卡西平；10,11-二氫-10-羥基卡馬西平  10,11-Dihydro-10-hydroxy Carbamazepine   質(zhì)量規(guī)格：>98%,美國進口原裝 人血紅蛋白H(HbH)ELISA檢測試劑盒HumanHemoglobinH,HbHELISAKit 96T/48T

三七皂苷R2(S型)(標準品)  S-Notoginsenoside R2  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥90%，標準品 人血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA檢測試劑盒Humanhemeoxygenase1,HO-1ELISAKit 96T/48T

無水醋酸鋅  Zinc acetate  質(zhì)量規(guī)格：AR 人血紅素氧合酶2(HO-2)ELISA檢測試劑盒Humanhemeoxygenase2,HO-2ELISAKit 96T/48T
山羊皮膚細胞;WGS1齊墩果酸Oleanolic acid質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95%，BR

CAMK4 Others Mouse 小鼠 CAMK4 / CaMKIV 桿狀病-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 齊墩果酸(高98%）Oleanolic acid質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，BR

CL-0137NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Sain L](小鼠成纖維5×106cells/瓶×2齊墩果酸(標準品）Oleanolic acid質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標準品

HGC-27人胃癌細胞 細胞，HelaS3細胞 ES-2(卵巢透明細胞癌細胞)莽草酸Shikimic acid質(zhì)量規(guī)格：≥98%,BR

人小細胞肺癌;NCI-H2227莽草酸(標準品)Shikimic acid質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品
小鼠內(nèi)皮抑素(mouse Endostatin)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝     Diclofenac   15307-79-6  中文名：雙氯芬酸鈉  分子式：C14H10Cl2NNaO2 

小鼠內(nèi)皮細胞粘附分子elisa試劑盒   小鼠內(nèi)皮細胞粘附分子試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠內(nèi)皮細胞粘附分子試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠內(nèi)皮細胞粘附分子試劑盒、小鼠內(nèi)皮細胞粘附分子elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。     N-[3-Chloro-4-(3-fluorobenzyloxy)phenyl]-6-iodoquinazolin-4-amine  231278-20-9  中文名：  分子式：C21H14ClFIN3O 

小鼠內(nèi)皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Methyl chlorogenate  中文名：綠原酸甲酯  分子式：C17H20O9  度：98.0%

小鼠內(nèi)皮細胞生長因子受體elisa試劑盒   小鼠內(nèi)皮細胞生長因子受體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠內(nèi)皮細胞生長因子受體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠內(nèi)皮細胞生長因子受體試劑盒、小鼠內(nèi)皮細胞生長因子受體elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  Methyl 4-O-feruloylquinate  中文名：  分子式：C18H22O9  度：95.0%

小鼠內(nèi)皮細胞生長因子受體-3(VEGFR-3/Flt-4)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Fexofenadine   中文名：鹽酸非索非那定  分子式：C32H40ClNO4

MPHOSPH6人M-期磷蛋白6特價elisa試劑盒檢測程序：
1.  加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2.  洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。
3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6.  洗板：同前。
7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗處反應15 分鐘。
8.  每孔加入100ul 終止液混勻。
9.  30分鐘內(nèi)用酶標儀在 45 0 nm 處測 吸光值。