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操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
產(chǎn)品名稱 |
英文名稱 |
貨號 |
ENKUR人Enkurin蛋白免費代測試劑盒 |
Human Enkurin(ENKUR)ELISA Kit |
PH103335 |
優(yōu)勢特點:產(chǎn)品僅用于科研
1.高效、靈敏、特異的抗體;
2.穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
3.吸附性能好,空白值低,孔低透明度高的固相載體;
4.使用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)液、尿液、唾液等等多種標本類型;
5.節(jié)省實驗經(jīng)費。
組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標準品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標準濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標準品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計算好的每次實驗所需的總量配制(100ul/孔),實際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制。
7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
氯化銀(>99%,BC) Silver chloride 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BC 小鼠血管內(nèi)皮生長因子C(VEGFC)ELISA試劑盒 ,英文名: VEGFC ELISA Kit
偏釩酸銀(>98%,BR) Silver metavanadate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠血管內(nèi)皮生長因子D(VEGFD)ELISA試劑盒 ,英文名: VEGFD ELISA Kit
銀粉(200目)(>99.5%,EP) Silver powder 質(zhì)量規(guī)格:>99.5%,EP 小鼠血管內(nèi)皮生長因子受體1(VEGFR1)ELISA試劑盒 ,英文名: VEGFR1 ELISA Kit
5-硝基愈創(chuàng)木酚鈉(>98%,BR) 5-nitroguaiacolate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR2)ELISA試劑盒 ,英文名: VEGFR2 ELISA Kit
苯亞磺酸鈉(>98%,BR) benzenesulfinate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠血管內(nèi)皮生長因子受體3(VEGFR3)ELISA試劑盒 ,英文名: VEGFR3 ELISA Kit
鉍酸鈉(>80%,BC) bismuthate 質(zhì)量規(guī)格:>80%,BC 小鼠血管內(nèi)皮細胞蛋白C受體(PROCR)ELISA試劑盒 ,英文名: PROCR ELISA Kit
泛影酸鈉(>98%,BC) diatrizoate dihydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC 小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)ELISA檢測試劑盒MouseVascularEndothelialcellGrowthFactor,VEGFELISAKIT 96T/48T
氟鋁酸鈉(>98%,BR) fluoroaluminate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒 ,英文名: VEGF ELISA Kit
馬尿酸鈉(>98%,BR) hippurate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子B(VEGF-B)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
鈉(>95%,BR) laurate
質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子B(VEGF-B)ELISA檢測試劑盒MouseVascularEndothelialcellGrowthFactorB,VEGF-BELISAkit
96T/48T
22RV1細胞,前列腺癌細胞 人肝癌細胞,Bel-7405細胞 CL-0024Anglne(人卵巢癌細胞)5×106cells/瓶×2柏醇Coniferyl alcohol質(zhì)量規(guī)格:>98%,sigma223735
中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1乙酰輔酶A鈉鹽Acetyl coenzyme A salt 質(zhì)量規(guī)格:≥93%,美國進口
IL1RAPL1 Others Human 人 IL1R8 人細胞裂解液 (陽性對照) 肌苷酸二鈉Di 5'-Inosinate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
細胞衰老檢測試劑盒CSA環(huán)索奈德Ciclesonide質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
ACVR1
Others Canine 狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 人細胞裂解液 (陽性對照) 環(huán)索奈德(標準品)Ciclesonide質(zhì)量規(guī)格:>99%,標準品
中文名稱 方法 規(guī)格 Toltrazuril
中文名:托曲珠利 分子式:C18H14F3N3O4S 度:98.0%
中文名稱 方法 規(guī)格 Tolazoline 中文名:鹽酸妥拉唑林 分子式:C10H13ClN2 度:98.0%
中文名稱 方法 規(guī)格 Tokinolide B 中文名: 分子式:C24H28O4 度:96.0%
中文名稱 方法 規(guī)格 Tofacitinib 中文名:枸櫞酸托法替尼 分子式:C22H28N6O8 度:98.0%
中文名稱 方法 規(guī)格 Tiotropium bromide 中文名:噻托溴銨
分子式:C19H22NO4S2 度:98.0%
注意事項:
ENKUR人Enkurin蛋白免費代測試劑盒1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
3. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5 分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD 值大于標準品孔孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物請避光保存。
7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號組分不得混用。
服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。