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操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
產(chǎn)品名稱 |
英文名稱 |
貨號 |
COCH人Cochlin蛋白elisa試劑盒說明書 |
Human Cochlin(COCH)ELISA Kit |
PH103416 |
優(yōu)勢特點(diǎn):產(chǎn)品僅用于科研
1.高效、靈敏、特異的抗體;
2.穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
3.吸附性能好,空白值低,孔低透明度高的固相載體;
4.使用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)液、尿液、唾液等等多種標(biāo)本類型;
5.節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(100ul/孔),實(shí)際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制。
7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
培美曲塞二鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) Pemetrexed Di
質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
RatsolubleIerleukin6receptor,sIL-6RELISA試劑盒大鼠可溶性白介素6受體(sIL-6R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
酞磺胺噻唑 Phthalylsulfathiazole 質(zhì)量規(guī)格:>95% Ratsolubleplateletendothelialcelladhesionmolecule1,sPECAM-1ELISAKit大鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
匹格列酮 Pioglitazone base 質(zhì)量規(guī)格:>99% RatSolubleprotein-100,S-100ELISAKit大鼠S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
匹格列酮(標(biāo)準(zhǔn)品) Pioglitazone base 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 RatSolubleprotein-100B,S-100BELISAKit大鼠S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
匹格列酮鹽酸鹽 Pioglitazone HCl 質(zhì)量規(guī)格:>98.5% RatsolubleP-selectin,sP-selectinELISAKit大鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
匹格列酮鹽酸鹽(標(biāo)準(zhǔn)品) Pioglitazone HCl 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Ratsolublereceptoractivatorofnuclearfactor-kBligand,sRANKLELISAKit大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
苯噻啶蘋果酸鹽 Pizotifen Malate 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR RatsolubleToll-likereceptor2,sTLR-2ELISAKit大鼠可溶性Toll樣受體2(sTLR2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
硫酸多粘菌素B Polymyxin B Sulfate 質(zhì)量規(guī)格:>6500 IU/mg,USP30 RatsolubleToll-likereceptor6,sTLR-6ELISAKit大鼠可溶性Toll樣受體6(sTLR6)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
硫酸多粘菌素B(標(biāo)準(zhǔn)品) Polymyxin B Sulfate 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 Ratsolubletumornecrosisfactor-relatedapoptosisinducingligand,sAILELISAKit大鼠可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sAIL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
醋酸普蘭林肽 Pramlintide Acetate 質(zhì)量規(guī)格:度≥98.0%
RatsolubleVascuolarcelladhesionmolecule1,sVCAM-1ELISAKit大鼠可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Calu-3 人肺腺癌細(xì)胞(胸膜滲出液)順式-α-羥基它莫西芬cis-α-Hydroxy Tamoxifen質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
BGC-823-EGFP-puro人胃癌細(xì)胞 Human gasic cancer cells BGC-823-EGFP-puro 1640+10% Hyclone滅**清+2ug/ml puromycinN-氧基它莫西芬Tamoxifen-N-oxide質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
BMP2 Protein Human 重組人 BMP-2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)α-羥基它莫西芬α-Hydroxy Tamoxifen質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
人心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞 (HCMEC)( 5×105 ) SF9, 昆蟲卵巢細(xì)胞 其它N-去甲基-4'-羥基它莫西芬N-Desmethyl-4'-hydroxy Tamoxifen質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
小鼠紅白血病細(xì)胞;MELN-去甲基它莫西芬鹽酸鹽N-Desmethyl Tamoxifen 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
豬血栓調(diào)節(jié)蛋白elisa試劑盒 豬血栓調(diào)節(jié)蛋白試劑盒
規(guī)格型號:96T/48T Senkyunolide E 中文名:
分子式:C12H12O3
豬血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Senkyunolide H 中文名: 分子式:C12H16O4 度:96.0%
豬血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISAKit ELISA. 96T/48T Sertaconazole 99592-32-2 中文名:舍他康唑 分子式:C20H15Cl3N2OS
豬血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Senkyunolide H 94596-27-7 中文名: 分子式:C12H16O4 度:96.0% 關(guān)鍵詞:
豬血清(NO)ELISA試劑盒 96T/48T
試劑盒 組裝/原裝 Senkyunolide H 中文名:
分子式:C12H16O4
注意事項(xiàng):
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
3. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時間控制在5 分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD 值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物請避光保存。
7. 嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號組分不得混用。
COCH人Cochlin蛋白elisa試劑盒說明書服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費(fèi)代測。