檢測程序：
1.  加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。
3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6.  洗板：同前。
7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。
8.  每孔加入100ul 終止液混勻。
9.  30分鐘內(nèi)用酶標儀在 45 0 nm 處測 吸光值。

下列是公司產(chǎn)品ELISA試劑盒的詳細說明書：
中文名稱：ATOH1人Atonal同源物1elisa試劑盒說明書
英文簡稱：Human Atonal Homolog 1(ATOH1)ELISA Kit
產(chǎn)品貨號：PH103504
規(guī)格：96T/48T
適用范圍：僅供科研使用
保存及有效期：2-8℃保存，6個月，-20℃一年

試劑和樣本的控制方法：
一、試劑
1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關(guān)，我司嚴格按照國家標準進行生產(chǎn)，已獲得國家承認的“三證”，每一個產(chǎn)品都有對應(yīng)的生產(chǎn)批號，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。
2.試劑的準備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后，再進行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達到所需的溫度，以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風濕因子、補體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；
類風濕因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG；
②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；
③檢測抗原時，可用2-巰基乙醇加入到標本稀釋液中使RF降解。

使用方法：
測定法的靈敏度來自作為報告的酶。眾所周知，酶是一種有機催化劑，很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng)，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。   24μg/ml    5號標準品    150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
 12μg/ml    4號標準品    150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
 6μg/ml     3號標準品    150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
 3μg/ml     2號標準品    150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
 1.5μg/ml   1號標準品    150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。|
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
ELISA 試驗時，注意事項如下： 
     1. 正式試驗時，應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件，待檢樣品應(yīng)作一式二份，以保證實驗結(jié)果的準確性。有時本底較高，說明有非特異性反應(yīng)，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。 
     2. 在ELISA中，進行各項實驗條件的選擇是很重要的，其中包括: 
     （1） 固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。 
     （2） 包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度（0.1、1.0和10μg／ml等）進行包被后，在其它試驗條件相同時，觀察陽性標本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg／ml。 
     （3） 酶標記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定（見酶標記抗體部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。 
     （4） 酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要**價廉、**、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應(yīng)注意防護。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后，應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入 。

炔雌醇17-β-D-葡萄糖苷酸  Ethynyl Estradiol 17-β-D-Glucuronide  質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱RatNN-T4ELISAKit大鼠新生甲狀腺素(NN-T4)規(guī)格：96T/48T

炔雌醇3-醋酸鹽  Ethynyl Estradiol 3-Acetate  質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱RatNOELISAKit大鼠(NO)ELISA規(guī)格：96T/48T

β-雌二醇 3-(β-D-葡萄糖苷酸)鈉鹽  β-Estradiol 3-(β-D-glucuronide)  salt  質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱RatNoradrenalinELISAKit大鼠去甲(Noradrenalin)規(guī)格：96T/48T

2-羥基炔雌醇  2-Hydroxy Ethynyl Estradiol  質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱RatNoradrenalinELISAKit大鼠去甲(Noradrenalin)規(guī)格：96T/48T

4-羥基炔雌醇  4-Hydroxy Ethynyl Estradiol  質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱RatoponinIELISAKit大鼠心肌肌鈣蛋白I(cTnI)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

炔雌醇 3-β-D-葡萄糖苷酸  Ethynyl Estradiol 3-β-D-Glucuronide  質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱RatoponinIELISAKit大鼠心肌肌鈣蛋白I(cTnI)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

3-O-甲基 4-羥基雌二醇  3-O-Methyl 4-Hydroxy Estradiol  質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱RatOsteocalcin(OT)ELISAKit大鼠骨鈣素(OT)ELISAKit規(guī)格：96T/48T

17α-雌二醇-16,16,17-d3  17α-Estradiol-16,16,17-d3  質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱RatOsteocalcin(OT)ELISAKit大鼠骨鈣素(OT)ELISAKit規(guī)格：96T/48T

炔雌醇-2,4,16,16-d4  Ethynyl Estradiol-2,4,16,16-d4  質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱RatOsteocalcinELISAKit大鼠骨橋素(Osteocalcin)規(guī)格：96T/48T

炔雌醇3-硫酸鹽  Ethynyl Estradiol 3-Sulfate  質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱RatOsteocalcinELISAKit大鼠骨橋素(Osteocalcin)規(guī)格：96T/48T
ERBB4 Others Human 人 ErbB4 / HER4 人細胞裂解液 (陽性對照) 鋅標準溶液(1000μg/ml,基體:1mol/L HNO3)Zinc standard質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml,基體:1mol/L HNO3

小鼠紋狀體神經(jīng)元MN-s鋅標準溶液(100μg/ml,,基體:1%HNO3)Zinc standard質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,,基體:1%HNO3

HAVCR2 Others Mouse 小鼠 TIM3 / HAVCR2 人細胞裂解液 (陽性對照) 蚜滅1標準溶液(0.100mg/ml) Vamidothion standard solution質(zhì)量規(guī)格：0.100mg/ml

人胚肺成纖維細胞;MRC-5優(yōu)級真空泵油(Viscosity Grade 46)Vacuum pump oil質(zhì)量規(guī)格：Viscosity Grade 46

DMS153細胞，人小細胞肺癌細胞 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞,PC12細胞 CM-H127人晶狀體上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL優(yōu)級真空泵油(Viscosity Grade 68)Vacuum pump oil質(zhì)量規(guī)格：Viscosity Grade 68
Daturataturin A aglycone  904665-71-0  中文名：  分子式：C28H38O5    組織PKCε激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

6-Hydroxystigmasta-4,22-dien-3-one  36450-01-8  中文名：  分子式：C29H46O2    humanParathyroidhormone,PTHELISAKit人甲狀旁腺(PTH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Oleandrin  465-16-7  中文名：  分子式：C32H48O9    兔子基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

β-Anhydrouzarigenin  3080-20-4  中文名：  分子式：C23H32O3    Human thymus independe aigen (TI-Ag) ATOH1人Atonal同源物1elisa試劑盒說明書ELISA Kit 人胸腺非依賴性抗原(TI-Ag)ELISA試劑盒

Tenacigenin B  80508-42-5  中文名：  分子式：C21H32O5    Humanai-cenolandcenosomeaibody,ACAELISAKit 人抗中性粒/中心體抗體(ACA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝