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下列是公司產(chǎn)品ELISA試劑盒的詳細(xì)說(shuō)明書(shū):
中文名稱(chēng):COL15人ⅩⅤ型膠原特價(jià)elisa試劑盒
英文簡(jiǎn)稱(chēng):Human Collagen Type XV(COL15)ELISA Kit
產(chǎn)品貨號(hào):PH103561
規(guī)格:96T/48T
適用范圍:僅供科研使用
保存及有效期:2-8℃保存,6個(gè)月,-20℃一年
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國(guó)家明確要求要采用批批檢定的形式對(duì)ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān),我司嚴(yán)格按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn),已獲得國(guó)家承認(rèn)的“三證”,每一個(gè)產(chǎn)品都有對(duì)應(yīng)的生產(chǎn)批號(hào),只要客戶(hù)提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必?fù)?dān)心會(huì)有過(guò)期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準(zhǔn)備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來(lái),在室溫下放置20-30
min后,再進(jìn)行測(cè)定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度,以滿(mǎn)足后面的測(cè)定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素:包括類(lèi)風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類(lèi)風(fēng)濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測(cè)抗原時(shí),可用2-巰基乙醇加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解。
檢測(cè)程序:
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向?yàn)V紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37 ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測(cè) 吸光值。
使用方法:
測(cè)定法的靈敏度來(lái)自作為報(bào)告的酶。眾所周知,酶是一種有機(jī)催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱(chēng)為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支,用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 24μg/ml 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。
雙壁碳納米管(>50%) 小于5nm(直徑),5-15μm(長(zhǎng)度) Carbon Nanotube Double-walled (>50%) below
5nm(diam.), 5-15μm(length) 質(zhì)量規(guī)格: 小鼠血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
交叉縫式碳納米管 10-20nm(直徑),5-15μm(長(zhǎng)度) Carbon Nanotube Herringbone 10-20nm(diam.),
5-15μm(length) 質(zhì)量規(guī)格:>95%(TPO Method) 小鼠血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA檢測(cè)試劑盒Mouse50%complemehemolysis,CH50ELISAKit
96T/48T
復(fù)壁碳納米管 小于10nm(直徑),5-15μm(長(zhǎng)度)(允許溫度上限:620℃) Carbon Nanotube Bundled Multi-walled below
10nm(diam.), 5-15μm(length) (allowable temperature limit : 620°C) 質(zhì)量規(guī)格: 小鼠血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA試劑盒 ,英文名: CH50 ELISA Kit
復(fù)壁碳納米管 小于10nm(直徑),5-15μm(長(zhǎng)度) Carbon Nanotube Multi-walled below
10nm(diam.), 5-15μm(length) 質(zhì)量規(guī)格:>95%(TPO Method) 小鼠血栓前體蛋白(TpP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
復(fù)壁碳納米管 小于10nm(直徑),1-2μm(長(zhǎng)度) Carbon Nanotube Multi-walled below
10nm(diam.), 1-2μm(length) 質(zhì)量規(guī)格:>95%(TPO Method) 小鼠血栓前體蛋白(TpP)ELISA試劑盒 ,英文名: TpP ELISA Kit
復(fù)壁碳納米管 10-20nm(直徑),5-15μm(長(zhǎng)度) Carbon Nanotube Multi-walled 10-20nm(diam.),
5-15μm(length) 質(zhì)量規(guī)格:>97%(TPO Method) 小鼠血栓素A2(TXA2)ELISA試劑盒 ,英文名: TXA2 ELISA Kit
整列式復(fù)壁碳納米管 10-20nm(直徑),5-15μm(長(zhǎng)度) Carbon Nanotube Aligned Multi-walled
10-20nm(diam.), 5-15μm(length) 質(zhì)量規(guī)格:>95%(TPO Method) 小鼠血栓素B2(TXB2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
復(fù)壁碳納米管 10-30nm(直徑),5-15μm(長(zhǎng)度) Carbon Nanotube Multi-walled 10-30nm(diam.),
5-15μm(length) 質(zhì)量規(guī)格:>97%(TPO Method) 小鼠血栓素B2(TXB2)ELISA試劑盒 ,英文名: TXB2 ELISA Kit
復(fù)壁碳納米管 10-30nm(直徑),1-2μm(長(zhǎng)度) Carbon Nanotube Multi-walled 10-30nm(diam.),
1-2μm(length) 質(zhì)量規(guī)格:>95%(TPO Method) 小鼠血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA檢測(cè)試劑盒Mousethrombomodulin,TMELISAKit
96T/48T
復(fù)壁碳納米管 20-40nm(直徑),5-15μm(長(zhǎng)度) Carbon Nanotube Multi-walled 20-40nm(diam.),
5-15μm(length) 質(zhì)量規(guī)格:>95%(TPO Method) 小鼠血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA試劑盒 ,英文名: TM ELISA Kit
T-CEM細(xì)胞,人T細(xì)胞白血病細(xì)胞 615小鼠肺癌瘤株,HP615細(xì)胞 MesenFectagen? 間充質(zhì)干細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒溴化亞銅(>98%,BR)Copper(I) bromide質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
NCI-H596(人肺腺鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2無(wú)水乙酸銅(>99%,BR)Copper(II)
acetate質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
Ca
Ski(人上皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0014A-375(人惡性色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 小鼠血細(xì)胞;WEHI-3 [WEHI3]溴化銅(>99%,BR)Copper(II)
bromide質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
新生牛眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞;NBTF檸檬酸銅(>98.5%,BR)Copper(II) ,
hydrate質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
10.
尿道細(xì)胞系統(tǒng)氫氧化銅(>96.5%,Tech
Grade)Copper(II) hydroxide質(zhì)量規(guī)格:>96.5%,工業(yè)級(jí)
Methyl chlorogenate 29708-87-0
中文名:綠原酸甲酯 分子式:C17H20O9 HumanHeatShockProtein60,HSP-60ELISAKit 人熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
3,6'-Disinapoylsucrose 139891-98-8
中文名:3,6'- 二芥子酰基蔗糖 分子式:C34H42O19
Humandeoxyribonucleicproteinaibody,DNP-AbELISA試劑盒人抗脫氧核糖核蛋白抗體(DNP-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Triethyl 77-93-0
中文名:檸檬酸三乙酯 分子式:C12H20O7 組織LYNA激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
α-Lipoic acid 1077-28-7
中文名:α-硫辛酸 分子式:C8H14O2S2 Humanplaceagrowthfactor,PLGFELISAKit人胎盤(pán)生長(zhǎng)因子(PLGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Polyhydroxybutyrate 2
ELISA 試驗(yàn)時(shí),注意事項(xiàng)如下:
1. 正式試驗(yàn)時(shí),應(yīng)分別以陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高,說(shuō)明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽(yáng)性標(biāo)本的OD值。選擇OD值z(mì)ui大而蛋白量zui少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見(jiàn)酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
COL15人ⅩⅤ型膠原特價(jià)elisa試劑盒 (4) 酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要**價(jià)廉、**、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無(wú)色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿(mǎn)意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。