咨詢電話:18117197628
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
產(chǎn)品名稱 |
英文名稱 |
貨號 |
I型膠原試劑盒 |
詳見說明書 |
BH-0011750 |
優(yōu)勢特點:產(chǎn)品僅用于科研
1.高效、靈敏、特異的抗體;
2.穩(wěn)定的重復性和可靠性;
3.吸附性能好,空白值低,孔低透明度高的固相載體;
4.使用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)液、尿液、唾液等等多種標本類型;
5.節(jié)省實驗經(jīng)費。
組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標準品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標準濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內配制。
如配制50 ng/ml標準品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預先計算好的每次實驗所需的總量配制(100ul/孔),實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制。
7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
β-Sitosterol 中文名:β-谷甾醇
分子式:C29H50O 應急反應生長因子-1
英文名稱: Early growth response 1 規(guī)格:
48T/96T 英文縮寫: EGR-1
β-Anhydrouzarigenin 中文名: 分子式:C23H32O3 轉錄因子E2F1 英文名稱: anscription factor E2F1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: E2F1
α-Tocopherolquinone 中文名: 分子式:C29H50O3 腺來源的內皮生長因子 英文名稱: endocrine gland-derived vascular endothelial growth factor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: EG-VEGF
α-Spinasterone 中文名: 分子式:C29H46O 中性粒細胞蛋白酶抑制劑Elafin 英文名稱: neuophil elastase inhibitor Elafin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: Elafin
α-Spinasterol
glucoside 中文名:α-菠甾醇葡萄糖苷
分子式:C35H58O6 游離脂肪酸(NEFA)檢測
Total iron binding (TIBC) detection
4,5,6,7-Tetrahydrothieno [3,2,c]pyridine 28783-41-7
中文名: 分子式:C7H10ClNS 乙酰甲基原醇V-P檢測試劑盒20次
5,6,7,7a-Tetrahydrothieno[3,2-c]pyridine-2(4H)-one 115473-15-9 中文名: 分子式:C7H10ClNOS rabbitFibrinogenDegradationProduct,FDPELISAKit兔子血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Pidotimod 121808-62-6 中文名:匹多莫德 分子式:C9H12N2O4S 豚鼠白介素15(IL15)ELISA試劑盒 ,英文名: IL15 ELISA Kit
Dicyclanil 112636-83-6 中文名:地昔尼爾 分子式:C8H10N6 Human mannose binding protein / mannose binding lectin (MBP/MBL) ELISA Kit 甘露糖結合蛋白/甘露糖結合凝集素(MBP/MBL)ELISA試劑盒
Iloperidone 133454-47-4
中文名:伊潘立酮 分子式:C24H27FN2O4
rabbitiercellularadhesionmolecule1,ICAM-1/CD54ELISAKit 兔子細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
D-蠶絲氨基酸;D-2-氨基-3-羥基丙酸;D-β-羥基丙氨酸
D-Serine
其他D-2-Aminohydracrylic acid;D-2-Amino-3-hydroxypropionic acid;D-β-Hydroxyalanine;(R)-2-Amino-3-hydroxypropionic acid;(R)-(-)-Serine;D-3-Hydroxy-α-alanine
產(chǎn)品規(guī)格:BR,99%
包裝:10克/25克/100克/500克
CAS號:312-84-5
C3H7NO3=105.09
級別:BR
含量:≥99.0%
比旋光度:-14.4~-15.5o
PH:5.2~6.2
鑒別:合格
氯化物:≤0.08%
銨鹽:≤0.02%
硫酸鹽:≤0.02%
重金屬:≤10ppm
砷鹽:≤1ppm
干燥失重:≤0.20%
灼燒殘渣:≤0.10%
性狀:結晶或結晶性粉末。溶于水,不溶于乙醇。熔點228℃(分解)。
用途:生化研究
注意事項:
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3. 各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5 分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD 值大于標準品孔孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物請避光保存。
7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號組分不得混用。
I型膠原試劑盒服務:
我們可以根據(jù)您的應用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。