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檢測(cè)程序:
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向?yàn)V紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37 ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測(cè) 吸光值。
下列是公司產(chǎn)品ELISA試劑盒的詳細(xì)說明書:
中文名稱:鉤端螺旋體IgM抗體試劑盒
英文簡(jiǎn)稱:詳見說明書
產(chǎn)品貨號(hào):BH-0012143
規(guī)格:96T/48T
適用范圍:僅供科研使用
保存及有效期:2-8℃保存,6個(gè)月,-20℃一年
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對(duì)ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān),我司嚴(yán)格按照國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn),已獲得國家承認(rèn)的“三證”,每一個(gè)產(chǎn)品都有對(duì)應(yīng)的生產(chǎn)批號(hào),只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必?fù)?dān)心會(huì)有過期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準(zhǔn)備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30
min后,再進(jìn)行測(cè)定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度,以滿足后面的測(cè)定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素:包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類風(fēng)濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測(cè)抗原時(shí),可用2-巰基乙醇加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解。
使用方法:
測(cè)定法的靈敏度來自作為報(bào)告的酶。眾所周知,酶是一種有機(jī)催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 24μg/ml 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
ELISA 試驗(yàn)時(shí),注意事項(xiàng)如下:
1. 正式試驗(yàn)時(shí),應(yīng)分別以陽性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值z(mì)ui大而蛋白量zui少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要**價(jià)廉、**、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。
小鼠C-肽 英文名稱:
C-peptide 規(guī)格: 48T/96T
英文縮寫: C-peptide
Benzoyl leuco methylene blue
1249-97-4 中文名:芐酰基無色亞甲基蘭 分子式:C23H23N3OS 度:98.0%
小鼠C-反應(yīng)蛋白elisa試劑盒 小鼠C-反應(yīng)蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠C-反應(yīng)蛋白試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠C-反應(yīng)蛋白試劑盒、小鼠C-反應(yīng)蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Benzotetramisole 885051-07-0 中文名:苯并四咪唑
分子式:C15H12N2S 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠C反應(yīng)蛋白(mouse CRP) 作用:
ELISA 規(guī)格: 48T/96T
進(jìn)口分裝 Marsdenoside F 中文名:
分子式:C39H60O14
小鼠C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒 Benzoyl leuco methylene blue 中文名:芐?;鶡o色亞甲基蘭
分子式:C23H23N3OS
小鼠C反應(yīng)蛋白 英文名稱:
C-reactive protein 規(guī)格: 48T/96T
英文縮寫: CRP
Benzopinacol 464-72-2 中文名:苯頻哪醇
分子式:C26H22O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
3-Amino-4-hydroxybenzoic acid 中文名:3-氨基-4-羥基苯甲酸 分子式:C7H7NO3 度:98.0% 小鼠MCP-3(mouse MCP-3) 作用:
ELISA 規(guī)格: 48T/96T
進(jìn)口分裝
1-Amino-4-hydroxyanthraquinone 中文名:1-氨基-4-羥基蒽醌 分子式:C14H9NO3 度:98.0% 小鼠促黃體elisa試劑盒 小鼠促黃體試劑盒
規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠促黃體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠促黃體試劑盒、小鼠促黃體eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
2-Amino-3-hydroxyanthraquinone 中文名:2-氨基-3-羥基蒽醌 分子式:C14H9NO3 度:98.0% 小鼠雌三醇elisa試劑盒 小鼠雌三醇試劑盒
規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠雌三醇試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠雌三醇試劑盒、小鼠雌三醇eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
6-Amino-4-hydroxy-2-naphthalenesulfonic
acid 中文名:6-氨基-4-羥基-2-萘磺酸 分子式:C10H9NO4S 度:98.0% 小鼠雌elisa試劑盒 小鼠雌試劑盒
規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠雌試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠雌試劑盒、小鼠雌eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
4-Amino-3-hydroxy-1-naphthalenesulfonic
acid 中文名:4-氨基-3-羥基-1-萘磺酸 分子式:C10H9NO4S 度:98.0% 小鼠雌二醇受體elisa試劑盒 小鼠雌二醇受體試劑盒
規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠雌二醇受體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠雌二醇受體試劑盒、小鼠雌二醇受體eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
乳酪素;酪蛋白;酪朊;酪素;乳酪素;奶酪素;酪膠;酪朊酸
Casein
其他β-Casein
產(chǎn)品規(guī)格:BR,N:14%
包裝:500克
產(chǎn)品規(guī)格:精制級(jí),95%,牛奶提取
包裝:100克
CAS號(hào):9000-71-9
分子量:大約為57000~375000
級(jí)別:BR
含量(N計(jì)):≥14.0%
水分:≤10.0
可溶物:≤0.5%
比重:1.25~1.31
脂肪:≤0.4%
灼燒殘?jiān)骸?.0%
級(jí)別:Purified
蛋白質(zhì)(干基):≥95.0%
脂肪:≤1.5%
灰份:≤1.8%
酸度:≤45
乳糖:≤1.0%
鉤端螺旋體IgM抗體試劑盒性狀:微黃色無定性粉末或顆粒。是一種含磷復(fù)合蛋白。無臭。無味。有吸濕性。干燥時(shí)性質(zhì)穩(wěn)定,潮濕時(shí)易變壞。溶于堿性水溶液,溶于濃鹽酸呈淺紫色,幾乎不溶于水和非極性有機(jī)溶劑,當(dāng)浸入水中則迅速膨脹,但粒子不結(jié)合。相對(duì)密度1.25~1.31。等電點(diǎn)pI4.7。
用途:生化研究