我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買143B 細胞到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無**、支原體污染。 細胞到達客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。

產(chǎn)品名稱	143B 細胞
規(guī)格	詳見說明書
貨號	BH-8010745

實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個； 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞

3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺； 

培養(yǎng)細胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。

2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。

3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。

6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C?；蛘?，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 

培養(yǎng)操作步驟 ：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）； 

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時； 

4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及細胞化學(xué)檢測。 

實驗要點及說明 ：

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法； 

2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)玻璃**，并經(jīng)過鉻酸洗液處理； 

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕； 

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率； 

5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

phospho-beta 2 Adrenergic Receptor (Ser355 + Ser356) 英文名稱： 磷酸化腎上腺素能受體β2/β2-AR抗體  0.1ml

APOD 英文名稱： 載脂蛋白D抗體  0.2ml

ASIC1/BNaC2/ASIC1A 英文名稱： 酸敏感離子通道1抗體  0.1ml

ADAR1 (C-terminus) 英文名稱： 雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗體（C端）  0.2ml

AF10 英文名稱： 髓系、混合系白血病易位基因10抗體  0.1ml

ADCY1 英文名稱： 腺苷酸環(huán)化酶1抗體  0.2ml

APC 英文名稱： 腺瘤樣息肉抗體  0.1ml

AGPAT1 英文名稱： 溶血磷脂?；D(zhuǎn)移酶抗體  0.2ml

ANKS3 英文名稱： 錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體  0.2ml

phospho-ALK (Tyr1586) 英文名稱： 磷酸化間變型瘤激酶抗體  0.1ml

ACADVL 英文名稱： 酰基輔酶A脫氫酶很長鏈抗體  0.2ml

AMSH 英文名稱： 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)銜接結(jié)合蛋白抗體  0.2ml

ASB3 英文名稱： 錨蛋白重復(fù)序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族3抗體  0.2ml

Aurora C 英文名稱： 有絲分裂激酶B抗體  0.2ml

Phospho-Ack1 (Tyr284) 英文名稱： 磷酸化Ack1抗體  0.1ml

Phospho-Ack1 (Tyr326) 英文名稱： 磷酸化Ack1抗體  0.1ml

Phospho-beta-Arrestin 1 (Ser412) 英文名稱： 磷酸化β抑制蛋白1抗體  0.1ml

L-天門冬鈉

英文名稱：L-Aspartic acid sodium salt

其他名稱：L-天冬氨酸鈉鹽；L-天門冬氨酸鈉鹽；氨基-L-丁二酸一鈉

CAS號：3792-50-5

HO2CCH2CH(NH2)CO2Na ? H2O = 173.10

級別：BR

含量：≥98.0%

比旋光度：+18.5～+21.0o

PH值（10%溶液）：6.0～7.5

氯化物：≤0.10%

干燥失重：≤0.5%

重金屬：≤0.001%

鐵鹽：≤0.002%

砷鹽：≤0.0001%

性狀(以下信息僅供參考)：白色結(jié)晶粉末

用途：本品僅供科研，不得用于其它用途

保存：RT

L-天冬氨酸鎂

英文名稱：L-Aspartic acid Mg salt

其他名稱：L-天門冬氨酸鎂

CAS號：2068-80-6

C8H12MgN2O8·2H2O=324.53

級別：BR

含量：≥98.0%

比旋光度：+20.5～+23.0o

PH值（10%溶液）：6.0～8.0

重金屬：≤0.001%

143B 細胞水分：10～14%

氯化物：≤0.02%

硫酸鹽：≤0.05%

鐵鹽：≤0.003%

銨鹽：≤0.02%

砷鹽：≤0.0001%

性狀(以下信息僅供參考)：白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末，易溶于水

用途：本品僅供科研，

收到如何處理:

1、首先，觀察培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。

2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。

4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。

5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。

6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。