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培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及細胞化學檢測。
產(chǎn)品名稱 |
JVM-2細胞 |
規(guī)格 |
T25 |
貨號 |
BH-0109846 |
產(chǎn)品詳細 EB病毒感染的外周細胞
形態(tài)特性 母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞是 J.V.Melo從一位63歲患有套細胞瘤白人女性外周血中分離建立的,經(jīng)EBV介導獲得永生化,該細胞表達p16和細胞周期蛋白D2,低水平表達細胞周期蛋白D1。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 +2mM Glutamine + 10% FBS.
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個; 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞
3、50ml離心筒2個
4、培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C?;蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
實驗要點及說明 :
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)玻璃**,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
收到如何處理:
1、首先,觀察培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。
兔子球蛋白E(IgE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
1,2-Cyclohexanedicarboximide
7506-66-3 中文名: 分子式:O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
兔子球蛋白Aelisa試劑盒
兔子球蛋白A試劑盒
規(guī)格型號:96T/48T 兔子球蛋白A試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔子球蛋白A試劑盒、兔子球蛋白A elisa試劑盒
保存條件:2-8℃
保質(zhì)期:6個月。
8-Hy
抑霉唑(標準品) Imazalil 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品 ELISAKitAIL-R1人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體1規(guī)格:48T/96T
春雷霉素鹽酸鹽(標準品) Kasugamycin 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,≥90% (HPLC) 小鼠球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒 ,英文名: IgM ELISA Kit
標準溶液(10μg/ml,u=4%) Kitazine solution 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=4% 大鼠游離狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA檢測試劑盒RatFreei-iodothyronineIndes,Free-T3ELISAKit 96T/48T
利谷?。藴势罚?nbsp; Linuron 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品 人多巴胺(DA)試劑盒 human dopamine,DA ELISA KIT
苯噻草胺(標準品) Mefenacet 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,98.5% RatMelatonin,MT/MLTELISAKit大鼠褪黑素(MT/MLT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
甲磺隆標準溶液(10μg/ml,u=4%) Metsulfuron-methyl solution 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=4% DNA合成1樣本
甲霜靈(標準品) Metalaxyl 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,98% Mousepituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide,PACAPELISA試劑盒小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
甲氧?。藴势罚?nbsp; Metoxuron 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品 小鼠球蛋白M(IgM)ELISA 試劑盒
滅草?。藴势罚?nbsp; Monuron 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品 Rat calcitonin (CT) ELISA Kit 大鼠降鈣素(CT)ELISA試劑盒
煙嘧磺隆(標準品)
Nicosulfuron 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品 Humanheatshockprotein27,HSP-27ELISAKit 人熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
1×TBS0ml3-Benzoylpyridine542493-苯甲酰吡啶
JVM-2細胞1×TBS 粉末裝×1L3-Benzofurancarboxaldehyde468753-甲醛
1×Western半干轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)膜液 ×1L(粉末)3-Benzalphthalide57513-亞芐基苯酞
1×Western濕轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)膜液×1L(粉末)3-Aminoquinoline573-氨基
0×DualColorDNA loading buffer(雙染料)×1ml3-Aminopiperidine di3346183
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無**、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。產(chǎn)品僅用于科學研究