產(chǎn)品詳細 宮頸癌細胞/C33A
形態(tài)特性 上皮樣細胞生長
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系由Auersperg N建立，源于宮頸癌活檢標本。p53 +，pRB +，在273位密碼子發(fā)生點突變。狀瘤病毒DNA、RNA陰性。
培養(yǎng)條件 DMEM+10%FBS
傳代方法 1:3~1:8傳代；2~3天換液1次。
細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面。產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究
細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括。
①細胞核、染色體以及基因表達的研究。
②生物膜與細胞器的研究。
③細胞骨架體系的研究。
④細胞增殖及其調(diào)控。
⑤細胞分化及其調(diào)控。
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細胞的起源與進化。
⑧細胞工程。

實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
    1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大??；
    2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
    3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織完全被消化；
    4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
    5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、熒光鑒定：
    1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
    2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
    3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
    4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
    5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
    6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

培養(yǎng)操作：
1）復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。      
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。 
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
Rabbitalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISAKit兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  2-[(Acetylthio)methyl]-phenylpropionic acid  中文名：  分子式：C12H14O3S 

Rabbitai-Monocyteaibody,AMAELISAKit兔抗單核細胞抗體(AMA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  2-Amino-5-nitrobenzophenone  中文
二氯酞菁錫(IV)  Tin(IV) Phthalocyanine Dichloride  質(zhì)量規(guī)格： 英文名稱RatPaRathyroidHormone-LikeRelatedProteinELISAKit大鼠甲狀旁腺相關(guān)蛋白(PTHrP)規(guī)格：96T/48T

酞菁鎂(II)  Magnesium(II) Phthalocyanine  質(zhì)量規(guī)格： 酵母谷胱甘肽過氧化物酶(GSHPX)活性酶動力比色法定量檢測試劑盒20

酞菁錫(II)  Tin(II) Phthalocyanine  質(zhì)量規(guī)格： ELISAKitHOXB2人同源框B2規(guī)格：48T/96T

酞菁二鋰(>93.0%(N))  Dilithium Phthalocyanine  質(zhì)量規(guī)格：>93.0%(N) 小鼠低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF1α)ELISA試劑盒 ，英文名： HIF1α ELISA Kit

4-氨基鄰苯二甲腈(>98.0%(N))  4-Aminophthalonitrile  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(N) 人α橫紋肌肌動蛋白(α-SCA)ELISA檢測試劑盒Humanα-sarcomericactin,α-SCAELISAKit 96T/48T

4-叔丁基鄰苯二甲腈(>98.0%(GC)(N))  4-tert-Butylphthalonitrile  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(N) 大鼠凝聚素(CLU)試劑盒 Rat Clusterin,CLU ELISA Kit

4-丁氧基鄰苯二甲腈(>95.0%(GC))  4-Butoxyphthalonitrile  質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC) 英文名稱RatPaRathyroidHormone-LikeRelatedProteinELISAKit大鼠甲狀旁腺相關(guān)蛋白(PTHrP)規(guī)格：96T/48T

1,3-二亞氨基異吲哚啉(>98.0%(T))  1,3-Diiminoisoindoline  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T) 酵母谷胱甘肽還原酶活性比色法定量檢測試劑盒20

4,5-二氯鄰苯二甲腈(>98.0%(GC)(N))  4,5-Dichlorophthalonitrile  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(N) ELISAKitGTC人通用轉(zhuǎn)錄復(fù)合體規(guī)格：48T/96T

4-十二烷氧基鄰苯二甲腈(>99.0%(GC))  4-Dodecyloxyphthalonitrile  質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC) 小鼠低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒 ，英文名： HIF-1α ELISA Kit
人腸脂肪酸結(jié)合蛋白(IFABP/FABP2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 別稱:FABPI, I-FABP Human IFABP/FABP2(Intestinal Fatty Acid Binding Protein) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清，血漿或其他生物體液中天然及部分重組IFABP/FABP2濃度
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際進行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
C33A細胞采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等； 
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。