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細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面。產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括。
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達的研究。
②生物膜與細(xì)胞器的研究。
③細(xì)胞骨架體系的研究。
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控。
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控。
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細(xì)胞的起源與進化。
⑧細(xì)胞工程。
產(chǎn)品名稱 |
DT40細(xì)胞 |
規(guī)格 |
T25 |
貨號 |
BH-0110314 |
產(chǎn)品詳細(xì) DT40(雞瘤細(xì)胞)
形態(tài)特性 母細(xì)胞
生長特性 懸浮
特征特性 DT40是來自Hyline SC雞法氏囊細(xì)胞株經(jīng)鳥類白血病病毒誘導(dǎo)建株的。原始瘤用羅氏相關(guān)病毒1(RAV-1)感染出生1天的小雞得到。 法氏囊中**的腫瘤制成細(xì)胞懸液后通過靜脈注射輸入同基因型的受體小雞。 經(jīng)過一次體內(nèi)移植后,建立了DT40細(xì)胞株。 這株細(xì)胞包含的前病毒基因整合在CS-myc原癌基因的上游,表達的CS-myc RNA水平較高。 它缺少一個正常CS-myc基因,但含有兩個拷貝ALV去調(diào)控的myc基因。 這株細(xì)胞保留了重排球蛋白輕鏈基因(IgL)的能力。 在IgL位點,DT40包含一個重
培養(yǎng)條件 1640+10%FBS
傳代方法 1:2傳代
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實際進行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時,可采用克隆化等方法使細(xì)胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大?。?br>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織完全被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
培養(yǎng)操作:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM
EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
Potassium benzylpenicillin 中文名:青霉素鉀 分子式:C16H17KN2O4S 中文名稱 方法 規(guī)格
Ponasterone A 中文名:坡那甾酮A 分子式:C27H44O6 大鼠Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISAKit
Polypodine B 20,22-acetonide 中文名:20,22-異丙叉基水龍骨甾酮B 分子式:C30H48O8 大鼠維生素C(VC)ELISAKit
Polypodine
B 中文名:水龍骨甾酮B
己二酸二乙酯(>99.0%(GC))
Diethyl Adipate 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC) 小鼠血清總補體(CH50)ELISA檢測試劑盒Mouse50%complemehemolysis,CH50ELISAKit 96T/48T
己二酸二異癸酯 Diisodecyl Adipate 質(zhì)量規(guī)格: 人抗BP180抗體(ai-BP180-Ab)試劑盒 Human ai-BP180-Ab ELISA Kit
壬二酸雙(2-乙基己基)酯(>75.0%(GC)) Bis(2-ethylhexyl) Azelate 質(zhì)量規(guī)格:>75.0%(GC) RatAcetylcholinesterase,AChEELISAKit大鼠乙酰膽堿酯酶(AChE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
己二酸二異丙酯(>99.0%(GC)) Diisopropyl Adipate 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC) 載玻片細(xì)胞PI-3KINASEP110BETA蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20
己二酸二丁酯(>99.0%(GC)) Dibutyl Adipate 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC) MonkeyMacrophageMigrationInhibitoryFactor,MIFELISA試劑盒巨噬細(xì)胞移動抑制因子(MIF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
己二酸二異丁酯(>99.0%(GC)) Diisobutyl Adipate 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC) 小鼠蛋白C(Protein C)ELISA試劑盒 ,英文名: Protein C ELISA Kit
己二酸二丙酯(>99.0%(GC)) Dipropyl Adipate 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC) 大鼠多巴胺D1受體(D1R)ELISA檢測試劑盒RatDopamineD1receptor,D1RELISAKit 96T/48T
壬二酸二甲酯(>98.0%(GC)) Dimethyl Azelate 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 人艾柯病毒IgM(ECHO IgM)試劑盒 human EchoVirus IgM,ECHO IgM ELISA Kit
己二酸雙(2-丁氧乙基)酯(>97.0%(GC)) Bis(2-butoxyethyl) Adipate 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC) 英文名稱MouseIGFBP4ELISAkit小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP4)規(guī)格:96T/48T
油酸乙酯(>70.0%(GC)) Ethyl Oleate
質(zhì)量規(guī)格:>70.0%(GC) PROTEINASEK酶解法石蠟切片抗原修復(fù)處理試劑盒50
DT40細(xì)胞人凝血酶原(PT)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 別稱:Prothrombin,coagulation factor II, F2,
PT, RPRGL2, THPH1 Human PT(Prothrombin) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組PT濃度