產(chǎn)品詳細 肝癌細胞；Li-7
形態(tài)特性
生長特性 貼壁生長
特征特性 人肝癌細胞株。這株細胞從裸鼠體外移植瘤中建立。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes)   15%FBS
傳代方法 1:2傳代
細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面。產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究
細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括。
①細胞核、染色體以及基因表達的研究。
②生物膜與細胞器的研究。
③細胞骨架體系的研究。
④細胞增殖及其調(diào)控。
⑤細胞分化及其調(diào)控。
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細胞的起源與進化。
⑧細胞工程。

實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
    1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大??；
    2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
    3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織完全被消化；
    4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
    5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、熒光鑒定：
    1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
    2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
    3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
    4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
    5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
    6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

培養(yǎng)操作：
1）復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。      
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。 
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
廣防風(fēng)苷A HPLC≥98% 20mg 小鼠周期素依賴性激酶抑制因子1A(CDKN1A)ELISA試劑盒 ，英文名： CDKN1A ELISA Kit

廣藿香酮 HPLC≥98% 20mg 犬維生素A(VA)ELISA檢測試劑盒CanineVitaminA,VAELISAKit 96T/48T

鬼臼 HPLC≥98% 20mg 犬透明質(zhì)酸酶1(HAase 1)試劑盒 Canine Hyaluronidase 1,HAase 1 ELISA Kit

鬼臼O葡萄糖苷 HPLC≥98% 10mg 英文名稱Hum
優(yōu)級真空泵油(Viscosity Grade 100)  Vacuum pump oil  質(zhì)量規(guī)格：Viscosity Grade 100 犬球蛋白G(IgG)試劑盒 Dog Immunoglobulin G,IgG ELISA Kit

優(yōu)級真空泵油(Viscosity Grade 150)  Vacuum pump oil  質(zhì)量規(guī)格：Viscosity Grade 150 犬球蛋白M(IgM)試劑盒 Canine Immunoglobulin M,IgM ELISA Kit

紫尿酸 一水合物(97%)  Violuric acid monohydrate  質(zhì)量規(guī)格：0.97 犬繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管(MIS/AMH)試劑盒 Canine Mullerian Inhibiting Substance/Ai-Mullerian Hormone,MIS/AMH ELISA Kit

生育酚乙酸酯(標準品)  Vitamin E acetate  質(zhì)量規(guī)格：分析標準品 犬腦素/腦尿肽(BNP)試劑盒 Canine brain naiuretic peptide,BNP ELISA Kit

烯效唑(分析標準品97.5%)  Uniconazole  質(zhì)量規(guī)格：分析標準品97.5% 犬內(nèi)(ET)試劑盒 Canine endotoxin,ET ELISA Kit

2-羥基-5-硝基煙酸(98%)  2-Hydroxy-5-nitronicotinic acid  質(zhì)量規(guī)格：0.98 犬內(nèi)皮生長因子受體(EGFR)試劑盒 Canine Epidermal Growth Factor Receptor,EGFR ELISA Kit

三十六烷(standard for GC,≥98.0%(GC))  Hexatriacontane  質(zhì)量規(guī)格：standard for GC,≥98.0%(GC) 犬內(nèi)皮素1(ET-1)Elisa檢測試劑盒CanineEndothelin1,ET-1ELISAKit 96T/48T

三十六烷(分析標準品,≥99.0%(GC))  Hexatriacontane  質(zhì)量規(guī)格：分析標準品,≥99.0%(GC) 犬內(nèi)皮素1(ET-1)試劑盒 Dog Endothelin 1,ET-1 ELISA Kit

正十六烷(Standard for GC,>99.5%(GC))  Hexadecane  質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,>99.5%(GC) 犬內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISA檢測試劑盒CanineEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit 96T/48T

正十六烷(分析標準品,≥99.5%(GC))  Hexadecane  質(zhì)量規(guī)格：分析標準品,≥99.5%(GC) 犬內(nèi)皮型合成酶(eNOS)試劑盒 Dog Endothelial niic oxide syhase,eNOS ELISA Kit
人基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子1(TIMP-1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 別稱:TIMP1, CLGI, EPA, EPO, HCI Human TIMP-1(Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 1) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清，血漿或其他生物體液中天然及部分重組TIMP-1濃度
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際進行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
人肝癌細胞；Li-7細胞3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等； 
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。