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菌種的培養(yǎng):
1、是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種(種)、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經(jīng)過擴大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子,如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。產(chǎn)品僅用于科研
產(chǎn)品名稱:銅綠假單胞菌
編號:BH-J011082
拉丁文:Pseudomonas aeruginosa (Schroeter) Migula
分離基物: Blood culture
提供形式: 定量菌片,西林瓶,2.0~2.5×10e3CFU/瓶
**等級: 2
模式菌株: no
培養(yǎng)基: 營養(yǎng)瓊脂:牛肉膏 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 20.0g,蒸餾水 1.0L,pH 7.0。121℃,15min。
生長條件: 37℃,好氧
存儲條件: -20℃,避光冷藏。
保存方法:
傳代保存法:培養(yǎng)基的濃度不宜過高,營養(yǎng)成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種,則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。
液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時間更長,適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧等的保存。
懸液保存法:
① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。
② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長達10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。
載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。
常用的冷凍保存法:
① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多,有些可添加保護劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi),再放入低溫冰箱內(nèi)進行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內(nèi),再置于冰箱內(nèi)進行冷凍保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍廣的微生物保存法。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和完全,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為種子,把種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
公司專業(yè)代理ATCC菌種,銅綠假單胞菌價格優(yōu)惠,質(zhì)量保證,為大中型科研提供嚴格質(zhì)量體系控制的ATCC,CMCC,CICC,DSMZ標準菌株。
克螨特標準溶液(1.00mg/ml)
Propargite solution 質(zhì)量規(guī)格:1.00mg/ml 人αL巖藻糖苷酶(AFU)試劑盒 Human alpha-L-fucosidase,AFU ELISA Kit
三氯殺蟲酯標準溶液(10μg/ml,u=2%) Plifenat solution 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=2% 人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA檢測試劑盒HumanαN-acetylglucosaminidase,αNAGELISAKit 96T/48T
三氯殺蟲酯標準溶液(100μg/ml,u=2%) Plifenat solution 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=2% 人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)試劑盒 Human αN-acetylglucosaminidase,αNAG ELISA Kit
霜霉威(分析標準品,99%) Propamocarb 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,99% 人α半乳糖苷酶(αGAL)ELISA檢測試劑盒Humanα-galactosidase,αGALELISAKit 96T/48T
喹(標準品) Cloquintocet-mexyl 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品 人α半乳糖苷酶(αGAL)試劑盒 Human α-galactosidase,αGAL ELISA Kit
綠麥隆標準溶液(100μg/ml,u=4%) Chlortoluron solution 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=4% 人α半乳糖基(α-Gal)試劑盒 Human α-galactoyl,α-Gal ELISA
Kit
敵草隆(99%)
Diuron 質(zhì)量規(guī)格:0.99 人α半乳糖基抗體(Gal)ELISA檢測試劑盒Humanα-galactoyl,GalELISAKit 96T/48T
四螨嗪(分析標準品,98.6%) Clofentezine 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,98.6% 人α淀粉酶(AMY1)試劑盒 Human alpha-amylase,AMY1 ELISA Kit
非草隆(標準品) Fenuron 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品 人α-防御素4(NP-4)試劑盒 Human NP-4 ELISA Kit
丁(B9)(標準品) Daminozide 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品 人α-輔肌動蛋白1(ACTN-1)試劑盒 Human ACTN-1 ELISA Kit
1156-19-0 Tolazamide (U-17835) 50mg
Bovine Lumpy Skin Disease Virus(LSDV)牛結(jié)節(jié)疹病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
115621-84-6 PAF-AN-1
10mg Ovine pulmonary
adenocarcinoma virus(OPAV)綿羊肺腺瘤病病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
115621-84-6 PAF-AN-1
1mg Infectious Bovine
Rhinotracheitis Virus(IBRV)牛傳染性鼻氣管炎病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
115621-84-6 PAF-AN-1
20mg Ovine pulmonary
adenocarcinoma virus(OPAV)綿羊肺腺瘤病病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
115621-84-6 PAF-AN-1
5mg Infectious Bovine
Rhinotracheitis Virus(IBRV)牛傳染性鼻氣管炎病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
惡霜靈 10 ng/ml 標準品 Propiconazole 10ng/ul于環(huán)己烷,10ML 特征形態(tài) 液態(tài)
惡霜靈 標準品 Propham
10ng/ul于乙腈,10ML 特征形態(tài) 液態(tài)
Oxadiazon,10ng/ul 標準品 Propazine
10ng/ul于乙腈,10ML 特征形態(tài) 液態(tài)