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產(chǎn)品名稱：雙氮纖維單胞菌

編號：BH-J011116

拉丁文:Cellulomonas biazotea

分離基物: Soil from Greenville Agr. Exp. Farm

提供形式: 凍干物

**等級: 1

模式菌株: yes

應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株

培養(yǎng)基: NB

生長條件: 30℃，好氧，72h

存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

保存方法：

傳代保存法：培養(yǎng)基的濃度不宜過高，營養(yǎng)成分不宜過于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種，則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。

液體石蠟覆蓋保存法：該法較前一種方法保存菌種的時間更長，適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧等的保存。

懸液保存法：

① 蒸餾水保存法：適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌，將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。

② 糖液保存法：適用于酵母菌，如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗處保存，可長達(dá)10年。除此之外，也可使用緩沖液或食鹽水等進(jìn)行保存。

載體保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅膠保存法；④磁珠保存法；⑤麩皮保存法；⑥紙片(濾紙)保存法。

常用的冷凍保存法：

① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便，也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多，有些可添加保護(hù)劑。此外，也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi)，再放入低溫冰箱內(nèi)進(jìn)行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即將菌種管插入干冰內(nèi)，再置于冰箱內(nèi)進(jìn)行冷凍保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是適用范圍廣的微生物保存法。        

微生物菌種的培養(yǎng)：

⒈ 孢子制備

⑴ 放線菌孢子的制備

一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過0.5％)，碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境，不利于放線菌孢子的形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時間為5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制備

霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時間為4～14天。

⒉ 種子制備

⑴ 搖瓶種子制備

搖瓶種子進(jìn)罐，常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng)，有時母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和完全，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。

⑵ 種子罐種子制備

種子罐種子制備的工藝過程，因菌種不同而異，一般可分為種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱為種子，把種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為二級發(fā)酵。如果將種子接入體積較大的種子罐內(nèi)，經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱為二級種子，將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為三級發(fā)酵。同樣道理，使用三級種子的發(fā)酵，稱為四級發(fā)酵。

堿式乙酸鋁(>50%,BR)  Aluminum acetate, basic  質(zhì)量規(guī)格：>50%,BR 呼吸鏈依賴性化線粒體氧化應(yīng)激活性氧(ROS)高質(zhì)熒光測定試劑盒20

氟化鋁三水(>98%,BR)  Aluminum fluoride trihydrate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 呼吸鏈依賴性化線粒體氧化應(yīng)激活性氧(ROS)高質(zhì)熒光測定試劑盒20

酸性氧化鋁(>90%,BC)  Aluminum oxide, active  質(zhì)量規(guī)格：Al2O3>90%,BC 胡蘿卜(carrot)完全培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑

堿性氧化鋁(>90%,BC)  Aluminum oxide, active  質(zhì)量規(guī)格：Al2O3>90%,BC 琥珀酸待測樣品處理試劑盒20

硫酸鋁鉀十二水(>99%,BR)  Aluminum potassium sulfate docecahydrate  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 花椰菜完全培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑

丁胺卡那霉素?zé)o水  Amikacin  質(zhì)量規(guī)格：效價：>900 u/mg 化學(xué)發(fā)光分析20樣本

氨茶堿(>98%,BR)  Aminophyllin hydrate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 化學(xué)發(fā)光印跡消除試劑盒20

檸檬酸鉍銨  Ammonium bismuth , hydrate  質(zhì)量規(guī)格：BR 化學(xué)法石蠟切片抗原修復(fù)處理試劑盒50

化銨(>99%,BR)  Ammonium bromide  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 化學(xué)合成1樣本

化銨(>99%,BR)  Ammonium iodide  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 化妝品阿斯巴塘(aspaame)含量薄層色譜法定性檢測試劑盒20

116229-36-8  Bactenecin (Bactenecin, bovine)  1mg  Proteus vulgaris普通變形桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒  動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒  50次  低溫  負(fù)20度

116229-36-8  Bactenecin (Bactenecin, bovine)  5mg  Proteus vulgaris普通變形桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒  動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒  50次  低溫  負(fù)20度

1162656-22-5  MCB-613  10mM(in1mLDMSO)  Prevotella melaninogenica黑色普雷沃菌探針法熒光定量PCR試劑盒  動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒  50次  低溫  負(fù)20度

1162656-22-5  MCB-613  25mg  Prevotella melaninogenica黑色普雷沃菌探針法熒光定量PCR試劑盒  動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒  50次  低溫  負(fù)20度

1162656-22-5  MCB-613  5mg  Proteus spp.變形桿菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒  動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒  50次  低溫  負(fù)20度

醋酸戊酯 標(biāo)準(zhǔn)品 Phosphonicacid 628-63-7 純品型，1g

己酮可可堿 標(biāo)準(zhǔn)品 Phthalicacid,bis-cyclohexylesterD4 6493/5/6 純品型，100MG

環(huán)戊惡草酮 標(biāo)準(zhǔn)品 Phorate-oxon-sulfoxide 110956-75-7 純品型，10mg

菌種的培養(yǎng)：

雙氮纖維單胞菌1、是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種（種）、原種（二級種）和栽培種（三級種）三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。

2、挑選具有某種能力的有用菌種，也稱種子制備，是指菌種在一定條件下，經(jīng)過擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。

3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。

4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種，用無菌手續(xù)挑取少許，接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在25℃（或較高溫度）下培養(yǎng)5～7天（或較長時間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子（對于霉菌類孢子制備，多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基）。

5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液，接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上，于25～28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。

6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子，如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的，則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿），及無機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯，無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%～20%。