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菌種的培養(yǎng):
1、是指食用菌菌絲體及其生長基質組成的繁殖材料。菌種分為母種(種)、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經過擴大培養(yǎng)成為具有一定數量和質量的純生產菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的生產菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些生產菌種不產孢子,如赤霉素產生菌或產孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。產品僅用于科研
產品名稱
大斑凸臍蠕孢 斜面
英文名稱
Exserohilum
turcicum (Pass.) K.J. Leonard & Suggs
貨號
BH-J011158
產品名稱:大斑凸臍蠕孢 斜面
編號:BH-J011158
拉丁文:Exserohilum turcicum (Pass.) K.J. Leonard & Suggs
分離基物: 玉米葉片
提供形式: 斜面培養(yǎng)物
**等級: 1
模式菌株: no
應用領域: 進行分析檢測及抗病性鑒定,指導生產。
培養(yǎng)基: 綜合PDA:20%馬鈴薯汁1L,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g,硫胺素微量,瓊脂 15g,pH 自然,121℃,15min。
生長條件: 25-28℃,好氧
存儲條件: 定期移植法
保存方法:
大斑凸臍蠕孢 斜面傳代保存法:培養(yǎng)基的濃度不宜過高,營養(yǎng)成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應在可能的范圍內盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于適生長溫度為好。若為產酸菌種,則應在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。
液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時間更長,適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧等的保存。
懸液保存法:
① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數年。本法應注意避免水分的蒸發(fā)。
② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長達10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。
載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。
常用的冷凍保存法:
① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多,有些可添加保護劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內,再放入低溫冰箱內進行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內,再置于冰箱內進行冷凍保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍廣的微生物保存法。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數為28 ℃,少數為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農產品為培養(yǎng)基。這是由于這些農產品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和完全,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為種子,把種子轉入發(fā)酵罐內發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將種子接入體積較大的種子罐內,經過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉入發(fā)酵罐內發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
公司專業(yè)代理ATCC菌種,價格優(yōu)惠,質量保證,為大中型科研提供嚴格質量體系控制的ATCC,CMCC,CICC,DSMZ標準菌株。
環(huán)嗪酮(標準品)
Hexazinone 質量規(guī)格:分析標準品,98% 綿羊白介素1β(IL-1β)ELISA檢測試劑盒SheepIerleukin1β,IL-1βELISAKit 96T/48T
氯吡嘧磺?。藴势罚?span lang="EN-US">
Halosulfuron-methyl
噻螨酮(標準品)
Hexythiazox 質量規(guī)格:分析標準品,99.5% 綿羊白介素2受體(IL-2R)ELISA檢測試劑盒SheepIerleukin-2receptor,IL-2RELISAkit 96T/48T
氟吡禾靈(標準品)
Haloxyfop 質量規(guī)格:分析標準品 綿羊白介素6(IL-6)ELISA檢測試劑盒SheepIerleukin6,IL-6ELISAKit
96T/48T
吡蟲啉(標準品)
Imidacloprid 質量規(guī)格:分析標準品,98.5% 綿羊補體片段3b受體(C3bR)ELISA檢測試劑盒SheepComplemefragme3brccptor,C3bRELISAKit 96T/48T
稻瘟靈(標準品)
Isoprothiolane 質量規(guī)格:分析標準品,97.5% 綿羊主要組織相容性復合體(MHC)ELISA檢測試劑盒Sheepmajorhistocompatibilitycomplex,MHCELISAKit
96T/48T
咪唑乙煙酸(標準品)
Imazethapyr 質量規(guī)格:分析標準品,98.5% 膜功能低滲膨脹法(HOST)檢測試劑盒50
異丙?。藴势罚?span lang="EN-US">
Isoproturon solution 質量規(guī)格:分析標準品,99.5% 腦素/腦尿肽(BNP)ELISA檢測試劑盒Monkeybrainnaiureticpeptide,BNPELISAKit 96T/48T
甲咪唑煙酸(標準品)
Imazapic 質量規(guī)格:分析標準品 內(ET)ELISA檢測試劑盒Monkeyendotoxin,ETELISAKit
96T/48T
異標準溶液(10μg/ml,u=6%) Iprobenfos standard solution 質量規(guī)格:10μg/ml,u=6% 內皮素1(ET-1)ELISA檢測試劑盒MonkeyEndothelin1,ET-1ELISAKit 96T/48T
117047-07-1 3’-Methoxypuerarin 10mM*1mLinDMSO Lassa Fever Virus(LASV)拉沙熱病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
117047-07-1 3’-Methoxypuerarin 5mg
Acholeplasma laidlawii 萊氏無膽甾原體探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
117048-49-4 N-1-Fmoc-1,4-diaminobutane . HCl 1g
Lassa Fever Virus(LASV)拉沙熱病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
117048-49-4 N-1-Fmoc-1,4-diaminobutane . HCl 5g
Latino virus(LATV)拉蒂諾病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
117048-59-6 Combretastatin A4 10mg Latino virus(LATV)拉蒂諾病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
吡羅米特酸 標準品 Santonin 19562-30-2 純品型,25mg
甲基嘧啶磷 標準品 Chlorbufam 29232-93-7 純品型,0.25g
乙基嘧啶磷 標準品 Chlorfenapyr 23505-41-1 純品型,0.1g