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菌種的培養(yǎng):
1、是指食用菌菌絲體及其生長基質組成的繁殖材料。菌種分為母種(種)、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經過擴大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質量的純生產菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的生產菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些生產菌種不產孢子,如赤霉素產生菌或產孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。產品僅用于科研
產品名稱:乳白耙菌
編號:BH-J011533
拉丁文:Irpex lacteus (Fr.) Fr.
分離基物: 子實體
提供形式: 斜面培養(yǎng)物
**等級: 1
模式菌株: no
培養(yǎng)基: 綜合PDA瓊脂:馬鈴薯煮液 1.0L,葡萄糖 20.0g,KH2PO4 3.0g,MgSO4·7H2O 1.5g,維生素B1 微量,瓊脂 20.0g,pH 6.0±0.2。121℃,15min。馬鈴薯煮液:稱取200g去皮的馬鈴薯塊,沸水煮30min,收集濾液定容至1.0L。
生長條件: 25-28℃,5d,好氧
存儲條件: 2-8溫度
保存方法:
傳代保存法:培養(yǎng)基的濃度不宜過高,營養(yǎng)成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應在可能的范圍內盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于適生長溫度為好。若為產酸菌種,則應在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。
液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時間更長,適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧等的保存。
懸液保存法:
① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應注意避免水分的蒸發(fā)。
② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長達10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。
載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。
常用的冷凍保存法:
① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多,有些可添加保護劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內,再放入低溫冰箱內進行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內,再置于冰箱內進行冷凍保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍廣的微生物保存法。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農產品為培養(yǎng)基。這是由于這些農產品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和完全,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
乳白耙菌種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為種子,把種子轉入發(fā)酵罐內發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將種子接入體積較大的種子罐內,經過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉入發(fā)酵罐內發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
公司專業(yè)代理ATCC菌種,價格優(yōu)惠,質量保證,為大中型科研提供嚴格質量體系控制的ATCC,CMCC,CICC,DSMZ標準菌株。
dGTP;三脫氧鳥苷鈉鹽
2'-Deoxyguanosine 5'-triphosphate tri salt 質量規(guī)格:>98%,BR 人蛋白酪氨酸0酸酶1B(PTP1B)試劑盒 Human protein tyrosine phosphatase 1B,PTP1B ELISA Kit
dCTP;三脫氧胞苷鈉鹽
2'-Deoxycytidine 5'-triphosphate di salt 質量規(guī)格:>98%,BR 人蛋白酪氨酸0酸酶自身抗體試劑盒 Human Tyrosine Phosphatase Aoaibodies ELISA Kit
dTTP;2‘-脫氧胸苷-5’三鈉鹽(dTTP) 2'-deoxythymidine-5'-triphosphate (dTTP),3
salt, dihydrate 質量規(guī)格:>98%,BR 人蛋白酶3(PR3)試劑盒 Human PR3 ELISA Kit
2‘-脫氧尿苷
2'-Deoxyuridine 質量規(guī)格:>99%,BR 人蛋白酶3抗體(PR3Ab)ELISA檢測試劑盒HumanProteinase3Aibody,PR3AbELISAKit
96T/48T
β-胸苷(dT);2'-脫氧胸苷 Thymidine 質量規(guī)格:>99%,BR 人蛋白酶3抗體(PR3Ab)試劑盒 Human Proteinase 3 Aibody,PR3Ab ELISA Kit
2’-脫氧鳥苷;2'-dG
2'-Deoxyguanosine monohydrate 質量規(guī)格:>98%,BR 人蛋白酶3特異性抗中性粒細胞胞質抗體(PR3-ANCA)ELISA檢測試劑盒Humanproteinase-aineuophilcytoplasmicaibody,PR3-ANCAELISAKit
96T/48T
2‘-脫氧胞苷
2'-Deoxycytidine;2'-dC 質量規(guī)格:>98%,BR 人蛋白酶3特異性抗中性粒細胞胞質抗體(PR3-ANCA)試劑盒 Human
proteinase-aineuophil cytoplasmic aibody,PR3-ANCA ELISA Kit
2‘-脫氧胞苷(標準品) 2'-Deoxycytidine;2'-dC 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品 人蛋白酶激活復合體亞基2(PSME2)試劑盒 Human PSME2 ELISA kit
2’-脫氧腺苷
2'-Deoxyadenosine monohydrate 質量規(guī)格:>99%,BR 人蛋白酶體(prosome,macropain)亞基,β型,1(PSMB1)試劑盒 Human
PSMB1 ELISA kit
魚精DNA
DNA, Fishsperm 質量規(guī)格:進分,Sigma74782,蛋白小于1% 人蛋白酶體(prosome,macropain)亞基,β型,2(PSMB2)試劑盒 Human PSMB2 ELISA kit
1211-28-5 Prolintane (hydrochloride) 1mg
Equine Herpesvirus 3 (EHV-3)馬皰疹病毒3型探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
1211-28-5 Prolintane (hydrochloride) 5mg
Equine Herpesvirus 2 (EHV-2)馬皰疹病毒2型探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
1211441-98-3 LEE011
10mg Equine Herpesvirus 1 (EHV-1)馬皰疹病毒1型探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
1211441-98-3 LEE011
10mM(in1mLDMSO) Equine
Herpesvirus 1 (EHV-1)馬皰疹病毒1型探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
1211441-98-3 LEE011
25mg Equine Herpesvirus(EHV)馬皰疹病毒通用探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
Fenoxaprop-P
(R-enantiomer),10ng/ul 標準品 Florasulam
10ng/ul于乙腈,10ML 特征形態(tài) 液態(tài)
苯硫威 標準品 Flamprop-isopropyl 10ng/ul于甲苯/正己烷,10ml 特征形態(tài) 液態(tài)
Fenoprop-methyl
ester,10ng/ul 標準品 Fipronil-sulfide 10ng/ul于乙酸乙酯,10ML 特征形態(tài) 液態(tài)