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單抗原理:
抗體主要由B細(xì)胞合成。每個(gè)B細(xì)胞有合成一種抗體的遺傳基因。動(dòng)物脾臟有上百萬(wàn)種不同的B細(xì)胞系,含遺傳基因不同的B細(xì)胞合成不同的抗體。當(dāng)機(jī)體受抗原刺激時(shí),抗原分子上的許多決定簇分別激活各個(gè)具有不同基因的B細(xì)胞。被激活的B細(xì)胞分裂增殖形成多克隆,并合成多種抗體。如果能選出一個(gè)制造一種專一抗體的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),就可得到由單細(xì)胞經(jīng)分裂增殖而形成細(xì)胞群,即單克隆。單克隆細(xì)胞將合成一種決定簇的抗體,稱為單克隆抗體。
別 名 mitochondrial; somatic form;
ODPA_HUMAN; PDH; PDHA1; PDHCE1A; PDHE1 A type I; PDHE1-A type I; PHE1A;
Pyruvate Dehydrogenase (lipoamide) alpha 1; Pyruvate Dehydrogenase E1 alpha;
Pyruvate dehydrogenase E1 component subunit alpha; Pyruvate dehydrogenase E1
component subunit alpha, somatic form, mitochondrial.
英文名稱 Anti-phospho-PDHA1(Ser293)抗體
中文名稱 磷酸化丙酮酸脫氫酶α1抗體
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human,
Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗 磷酸化抗體
研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物
學(xué) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 激酶和磷酸酶 線粒體
蛋白分子量 predicted
molecular weight: 40kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH
conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human PDHA1 around the
phosphorylation site of Ser293
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 0.01M PBS,
pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500
ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1:100-500
IF=1:100-500
具有全、新、優(yōu)、品、好四大特點(diǎn):
全:公司提供上萬(wàn)種產(chǎn)品,涵蓋了生物試劑,elisa試劑盒,標(biāo)準(zhǔn)品,培養(yǎng)基,原裝耗材,抗體、培養(yǎng)基、ATCC細(xì)胞等,基本上各種科研所需產(chǎn)品在我司都能找到。
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實(shí)驗(yàn)原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以病原微生物或?qū)е虏±頁(yè)p傷。然而,抗體可通過(guò)與病毒或特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補(bǔ)體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過(guò)經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過(guò)替代途徑激活補(bǔ)體。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與應(yīng)答。
(4)可通過(guò)胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過(guò)胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)
球蛋白A(IgA)可通過(guò)消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機(jī)體產(chǎn)生應(yīng)答的性能。不同的蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無(wú)載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過(guò)濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
石墨粉(>99%,BR) Graphite powder 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR Human3-Niotyrosine,3-ELISA試劑盒人3-硝基酪氨酸(3-)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
己二醇(>98%,BR)
Hexylene glycol 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR /酵母總巰基含量比色法定量檢測(cè)試劑盒20
六甲基磷酰三胺(>98%,BR) HMPA, hexamethylphosphoramide 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Mouseai-Thyroid-Peroxidaseaibody,TPO-AbELISAKit小鼠抗甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體(TPO-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
還原茚三酮二水合物(>98%,BR) Hydrindantin hydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠腦源性神經(jīng)生長(zhǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒 ,英文名: BDNF ELISA Kit
中粘度羥丙基纖維素
Hydroxypropyl cellulose 質(zhì)量規(guī)格:4000~6500 mpa.s,BR 大鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA檢測(cè)試劑盒RatLeptinSolubleReceptor,sLRELISAKit
96T/48T
3-吲哚基-beta-D-吡喃半乳糖苷(>98%(TLC),BR) Indoxyl-Gal
質(zhì)量規(guī)格:>98%(TLC),BR 人鵝膏蕈堿試劑盒 Human Amanitin ELISA Kit
3-吲哚基-beta-D-葡糖苷酸環(huán)已胺鹽(>98%(HPLC),BR) Indoxyl-Glucuronide 質(zhì)量規(guī)格:>98%(HPLC),BR
Ratmaixmetalloproteinase1,MMP-1ELISAKit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
代苯(>98%,醫(yī)藥級(jí))
Iodobenzene 質(zhì)量規(guī)格:>98%,醫(yī)藥級(jí) DMDC處理試劑盒100
硫化鐵 (II)(>70%,BR) Iron (II) sulfide 質(zhì)量規(guī)格:>70%,BR
MousePerinuclearai-neuophilcytoplasmicaibody,pANCAELISA試劑盒小鼠抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
四氧化三鐵(>98%,BR) Iron (II,III ) oxide 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠腦型肌酸激酶(CKB)ELISA試劑盒 ,英文名: CKB ELISA Kit
人透明質(zhì)酸酶(HAase)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 別稱:Hyaluronic Lase Human
HAase(Hyaluronidase) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測(cè)Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組HAase濃度
Rabbit Anti-rat IgM/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗大鼠IgM 0.1ml
GADD34 英文名稱: 生長(zhǎng)抑制DNA損傷基因34抗體 0.1ml
Rhesus
antibody Rh APOC4/Apolipoprotein CIV 載脂蛋白C4抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-IL-6/FITC
熒光素標(biāo)記白介素6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus
antibody Rh Rabbit anti-MG IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgG 規(guī)格 0.1ml
Anti-PSAP/PAP/FITC
熒光素標(biāo)記前列腺酸性0酸酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
SERTAD2 英文名稱: 調(diào)控周期蛋白依賴蛋白激酶SEI2抗體 0.2ml
FRMD1 英文名稱: FRMD1蛋白抗體 0.2ml
管內(nèi)皮透明質(zhì)酸受體抗體 anti-LYVE-1 0.1ml
Anti-Phospho-Rictor
(Thr1135)/FITC 熒光素標(biāo)記0酸化雷帕霉素靶蛋白復(fù)合體2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus
antibody Rh phospho-PKC delta (Tyr311) 0酸化蛋白激酶C亞性D型抗體 規(guī)格 0.1ml
Leupeptin
亮抑酶肽Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
Anti-phospho-PDHA1(Ser293)抗體單抗制備過(guò)程:
1.提取合成專一性抗體的單個(gè)B細(xì)胞(不能在體外生長(zhǎng))。
2.應(yīng)用細(xì)胞雜交技術(shù)使骨髓瘤細(xì)胞與B細(xì)胞融合,得到雜交瘤細(xì)胞。
3.對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),選出所需要的細(xì)胞群,并進(jìn)行克隆化培養(yǎng),得到穩(wěn)定的雜交瘤細(xì)胞,再進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)獲得單克隆抗體。
4.提純,一般常用金黃色葡萄球菌蛋白A-瓊脂糖4B親和層析法。