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單抗原理:
抗體主要由B細胞合成。每個B細胞有合成一種抗體的遺傳基因。動物脾臟有上百萬種不同的B細胞系,含遺傳基因不同的B細胞合成不同的抗體。當機體受抗原刺激時,抗原分子上的許多決定簇分別激活各個具有不同基因的B細胞。被激活的B細胞分裂增殖形成多克隆,并合成多種抗體。如果能選出一個**一種專一抗體的細胞進行培養(yǎng),就可得到由單細胞經分裂增殖而形成細胞群,即單克隆。單克隆細胞將合成一種決定簇的抗體,稱為單克隆抗體。
別 名 p73(Phospho-Tyr99);
TP73(phospho Y99); p53 like transcription factor; p53 Related Protein; p73; TP
73; TP73; Tumor Protein p73; P73_HUMAN.
英文名稱 Anti-Phospho-p73(Tyr99)抗體
中文名稱 磷酸化P73腫瘤抑制基因抗體
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human,
Mouse, Rat
產品類型 一抗 磷酸化抗體
研究領域 腫瘤 學 信號轉導
細胞凋亡 轉錄調節(jié)因子 激酶和磷酸酶
蛋白分子量 predicted
molecular weight: 70kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH
conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human p73 around the
phosphorylation site of Tyr99 [SP(p-Y)AQ]
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS,
pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產品應用 WB=1:100-500
ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
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實驗原理 :
(1)特異性結合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以病原微生物或導致病理損傷。然而,抗體可通過與病毒或特異性結合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結合細胞:不同類別的球蛋白,可結合不同種的細胞,參與應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質,也具有刺機體產生應答的性能。不同的蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質,均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經透析法將其純化。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所**的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
2-Naphthyl
N-benzoylphenylalaninate 中文名:2-萘基N-苯甲?;奖彼狨?nbsp; 分子式:C26H21NO3 干細胞因子受體 (SCF R) 作用: ELISA 規(guī)格:
48T/96T 進口分裝
2-Methylsulfanylpyrimidin-4(3H)-one 中文名: 分子式:C5H6N2OS 血清淀粉樣蛋白 英文名稱: serum amyloid A
protein 規(guī)格:
48T/96T 英文縮寫: SAA
2-Methylanthraquinone 中文名:2-甲基蒽醌 分子式:C15H10O2
Salusin-α
英文名稱: Salusin-α 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫:
Salusin-α
2-Methyl-4-nitrobenzoic
acid 中文名: 分子式:C8H7NO4 干細胞因子 英文名稱: stem cell
factor 規(guī)格:
48T/96T 英文縮寫: SCF
2-Methyl-4-(2-methylbenzoylamino)benzoic
acid 中文名: 分子式:C16H15NO3 干細胞因子受體 英文名稱: stem cell factor
receptor 規(guī)格:
48T/96T 英文縮寫: SCF R
刺桐酚素 HPLC≥98% 5mg 10倍酵母菌SD-URA培養(yǎng)基100毫升
刺桐特靈堿 HPLC≥98% 5mg MouseCollagenaseIELISA試劑盒小鼠膠原酶I(CollagenaseI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
刺五加甙 C HPLC≥98% 5mg 小鼠血管內皮細胞生長因子D(VEGF-D)ELISA試劑盒 ,英文名: VEGF-D ELISA Kit
粗毛甘草素 A HPLC≥98% 5mg 小鼠硫氧還蛋白還原酶(xR)ELISA檢測試劑盒Mousethioredoxieductase,xRELISAKit
96T/48T
粗毛羊藿苷 HPLC≥98% 5mg 人肌聯(lián)蛋白(TTN)抗體試劑盒 Human ai-titin (TTN)aibody ELISA kit
醋酸獨活屬醇 HPLC≥98% 5mg RatcoagulationfactorⅧrelatedaigen,FⅧ-AgELISAKit大鼠凝血因子Ⅷ相關抗原(FⅧ-Ag)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
達瑪二烯醇乙酸酯 HPLC≥98% 5mg 10倍酵母菌SD-URA培養(yǎng)基(半乳糖)100毫升
達瑪烯二醇II HPLC≥98% 5mg MouseCollagenaseTypeIIELISA試劑盒小鼠膠原酶II(CollagenaseII)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
大豆腦苷 I HPLC≥98% 5mg 小鼠血管內皮細胞生長因子D(VEGF-D)ELISA 試劑盒
大豆腦苷 II HPLC≥98% 5mg Rat calcineurin (CaN) ELISA Kit 大鼠鈣調0酸酶(CaN)ELISA試劑盒
10X DREAMTAQ GREEN BUFFER 4x1.25ml
PCR
10X
FASTDIGEST GREEN BUFFER 5x1ml 限制性內切酶和克隆酶
BUFFER
B 5x1ml
限制性內切酶和克隆酶
BUFFER
G 5x1ml
限制性內切酶和克隆酶
BUFFER
O 5x1ml
限制性內切酶和克隆酶
癸二酸雙(2-乙基己基)酯 標準品 2-Naphthylaceticacid 122-62-3 純品型,100mg 特征形態(tài) 固態(tài)
癸二酸二乙酯 標準品 2-Naphthyloxyacetamide 110-40-7 純品型,500mg 特征形態(tài) 固態(tài)
癸二酸丁酯 標準品 Sebacicacid,bis-n-butylester 109-43-3 純品型,1g 特征形態(tài) 固態(tài)
Anti-Phospho-p73(Tyr99)抗體單抗制備過程:
1.提取合成專一性抗體的單個B細胞(不能在體外生長)。
2.應用細胞雜交技術使骨髓瘤細胞與B細胞融合,得到雜交瘤細胞。
3.對雜交瘤細胞進行細胞培養(yǎng),選出所需要的細胞群,并進行克隆化培養(yǎng),得到穩(wěn)定的雜交瘤細胞,再進行大規(guī)模培養(yǎng)獲得單克隆抗體。
4.提純,一般常用金黃色葡萄球菌蛋白A-瓊脂糖4B親和層析法。