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公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
產(chǎn)品名稱 |
人肝纖維母細(xì)胞 |
英文名稱 |
Human primary hepatic fibroblasts |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
貨號(hào) |
P-X1315 |
產(chǎn)品規(guī)格:>5×105細(xì)胞數(shù)
包裝規(guī)格:1ml凍存細(xì)胞懸液或T-25培養(yǎng)瓶
細(xì)胞介紹:
纖維母細(xì)胞是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。纖維母細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損以及骨創(chuàng)傷的修復(fù)起著重要作用。
1)細(xì)胞來源于人正常肝臟組織。
推薦使用 delf原代 成纖維 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為該細(xì)胞的培養(yǎng)基。
操作步驟如下:
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
注意事項(xiàng):
1)原代培養(yǎng)的分離細(xì)胞在初次接觸體外環(huán)境時(shí),雖然被分散成單個(gè)細(xì)胞,但它們之間的互相影響還是存在的, 而且這種影響對(duì)細(xì)胞能否存活是非常重要的。在這些細(xì)胞之間能產(chǎn)生一些促生長(zhǎng)的活性物質(zhì), 使細(xì)胞彼此互相促進(jìn)存活和生長(zhǎng)。如果接種的細(xì)胞密度過低, 細(xì)胞之間的促生長(zhǎng)作用很小, 雖然營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)很充足, 也很難使細(xì)胞適應(yīng)從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進(jìn)入獨(dú)立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細(xì)胞密度過大,會(huì)導(dǎo)致營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足, 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
肝臟內(nèi)存在兩種纖維母細(xì)胞,一種是肝星形細(xì)胞,另一種是位于門脈周圍的纖維母細(xì)胞。其中,肝星形細(xì)胞在肝纖維化過程中,細(xì)胞內(nèi)脂含量減少,轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維母細(xì)胞。纖維母細(xì)胞的活化不僅表現(xiàn)在數(shù)量及表型的改變,更重要的是生物功能發(fā)生很大變化,開始分泌大量的膠原,轉(zhuǎn)變?yōu)楦卫w維化甚至肝硬化。
2)細(xì)胞鑒定:Vinculin或GFAP免yi熒光染色為陽(yáng)性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)jun、酵母和真jun。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:長(zhǎng)梭形,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
1、剪切組織:先將所取得的組織,用D-Hanks或Hanks液清洗,以去除表面血污,并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后,用手術(shù)刀將組織切成若干小塊,移入青霉素小瓶或小燒杯中,加入適量緩沖液,用彎頭眼科剪,反復(fù)剪切組織,直到組織成糊狀,約1mm3大小。靜置片刻后,用吸管吸去上層液體,加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離:消化分離的目的是將細(xì)小的組織塊消化分離成細(xì)胞團(tuán)或分散的單個(gè)細(xì)胞,以利于進(jìn)一步的培養(yǎng),常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng):細(xì)胞懸液用計(jì)數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。用培養(yǎng)液將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為(2~5)×105 cells/ml,或?qū)嶒?yàn)所需密度,分裝于培養(yǎng)瓶中,使細(xì)胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi),5%CO2,37℃靜置培養(yǎng)。一般3~5d,原代培養(yǎng)細(xì)胞可以黏附于瓶壁,并伸展開始生長(zhǎng),可補(bǔ)加原培養(yǎng)液量1/2的新培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)2~3d后換液,一般7~14d可以長(zhǎng)滿瓶壁,進(jìn)行傳代。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
2)原代培養(yǎng)時(shí)初始培養(yǎng)在組織分散和分離細(xì)胞時(shí)細(xì)胞可能會(huì)受到嚴(yán)重的損傷。適當(dāng)增大原代培養(yǎng)接種的細(xì)胞密度, 給培養(yǎng)的細(xì)胞提供更多的類似于在體內(nèi)時(shí)細(xì)胞之間的相互作用, 會(huì)極大提高原代培養(yǎng)的細(xì)胞在體外存活率。待細(xì)胞適應(yīng)體外環(huán)境后進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細(xì)胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破,分離細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大,在體外存活和生長(zhǎng)的難度相應(yīng)增加。 對(duì)于貼壁依賴性細(xì)胞來說,盡快使接種的細(xì)胞貼壁,是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵。可以在接種后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h,由于細(xì)胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液, 細(xì)胞即可以維持存活, 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁, 是細(xì)胞迅速黏附于底物,待細(xì)胞貼壁后,再補(bǔ)足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細(xì)胞培養(yǎng)法—懸浮型細(xì)胞培養(yǎng) 。
公司正在出售的產(chǎn)品:
K7M2WT (K7M2-wt)小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
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P19小鼠畸胎瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
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C7orf59 Antibody Blocking Peptide |
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人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPSC)培養(yǎng)體系 |
Cx40 Antibody Blocking Peptide |
TCMK-1小鼠腎小管上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
血管平滑肌細(xì)胞誘導(dǎo)鈣化試劑盒(培養(yǎng)體系) |
phospho-Tau protein (Ser721) Antibody Blocking Peptide |
C6大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
原代雪旺細(xì)胞添加劑 |
phospho-NMDAR2B (Ser1303) Antibody Blocking Peptide |
IEC-18鼠回腸細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
原代腎足細(xì)胞添加劑 |
TRIM48 Antibody Blocking Peptide |
PC12未分化大鼠腎上腺嗜鉻瘤 未分化 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
原代平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)體系 |
FATE1 Antibody Blocking Peptide |
CHO倉(cāng)鼠卵巢 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
原代內(nèi)皮祖細(xì)胞培養(yǎng)體系 |
ALDH1A2 Antibody Blocking Peptide |
PT-K75豬鼻甲黏膜成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
轉(zhuǎn)鐵蛋白 |
Phospho-SGK1 (Ser78) Antibody Blocking Peptide |
UMNSAH/DF-1雞胚胎成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
牛胰島素 |
TLR9 Antibody Blocking Peptide |
人胰腺癌相關(guān)成纖維細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
原代前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)體系 |
Recombinant human Complement C3d fragment protein, C-His |
人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
原代精原細(xì)胞培養(yǎng)體系 |
KIAA1755 Antibody Blocking Peptide |
人zi宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
原代支持細(xì)胞培養(yǎng)體系 |
phospho-Ku70 (Ser5) Antibody Blocking Peptide |
豬zi宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
McCoy’s 5A基礎(chǔ)培養(yǎng)基 |
LILRA3/CD85e Antibody Blocking Peptide |
人主動(dòng)脈瓣膜間質(zhì)細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
氟尿嘧啶 |
人肝纖維母細(xì)胞MURF2 Antibody Blocking Peptide |